应用乳酸脱氢酶建立预测模型评估慢加急性肝衰竭预后

目的：探讨以血清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）水平及LDH和终末期肝病模型（model for end?stage liver disease,MELD）评分结合建立的模型MELD?LDH评估慢加急性肝衰竭（acute?on?chronic liver failure,ACLF）患者预后的效能,并对血清LDH水平与不同程度多系统损伤的关系进行研究,以期提高对该病的认识和救治水平。方法：采用回顾性研究方法,收集 2015年10月—2019年8月南京医科大学第一附属医院收治的119例ACLF 患者的临床资料。按照入院后28 d的预后情况,分为存活组（n=90）和死亡组（n=29）。采用单因素和多因素回归分析法,分析影响ACLF患者预后的相关因素,探讨血清LDH水平与不同程度多系统损伤的关系,建立MELD?LDH模型并验证其效能。结果：回归分析显示,血清LDH水平是影响ACLF患者预后的独立危险因素（OR=1.015,P=0.002）。并发肾衰竭、肝性脑病患者的血清LDH水平显著较高（P=0.002,P=0.018）。MELD?LDH模型预测28 d、90 d临床转归的效能明显优于MELD评分（P=0.028,P=0.002）。结论：高血清LDH水平是ACLF患者28 d死亡的独立危险因素,且与并发肾衰竭、肝性脑病密切相关;LDH和传统的MELD评分结合的MELD?LDH模型对ACLF患者28 d、90 d预后的预测效能较好。     

间充质干细胞旁分泌物质诱导肝星状细胞凋亡的体外研究

目的:研究间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSC)旁分泌物质对活化的肝星状细胞Lx－2的影响及作用机制?方法:应用6孔塑料细胞培养板,每孔使用半透膜,构建Transwell共培养体系;将骨髓来源的间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BM－MSC)和人肝星状细胞系Lx－2分别接种在体系的上下层,并把此组作为实验组,单独培养的Lx－2作为对照组,观察培养液中MSC旁分泌物质对Lx－2的影响?采用流式细胞术及Hoechst33342染色法分别检测Lx－2细胞凋亡的情况,qRT－PCR和Western blot检测Lx－2中解耦联蛋白2(uncoupling protein 2,UCP2)的mRNA和蛋白水平的表达量,荧光探针法检测Lx－2细胞内及线粒体中活性氧(reactive oxygen species,ROS)的荧光强度,采用硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)法检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)的含量?结果:与对照组相比,Hoechst 33342染色后可见部分Lx－2染色质固缩?颗粒状荧光等凋亡细胞典型表现,实验组Lx－2凋亡率是对照组的2.6倍(P < 0.05)?实验组Lx－2中UCP2 mRNA及蛋白表达量显著低于对照组(P < 0.05);实验组Lx－2细胞内和线粒体中ROS水平明显升高?细胞培养上清中MDA为(0.43 ± 0.47) mmol/L,显著高于对照组(0.16 ± 0.43)mmol/L(P < 0.05)?结论:MSC旁分泌物质有诱导Lx－2细胞凋亡的作用;可能与MSC旁分泌物质抑制UCP2的表达,促进细胞内及线粒体ROS过量生成有关?     

脓毒症肝损伤的发病机制及治疗研究进展

脓毒症是临床常见的危重病之一，近年来由于抗生素、激素及免疫抑制剂的广泛应用，脓毒症的发病率和病死率持续升高。脓毒症早期即可诱发肝损伤，其发病机制不明，本文将近年来脓毒症肝损伤的发病机制及潜在治疗方向的进展做一阐述。     

一例双眼先天性球形品状体行超声乳化联合后房人工晶体植入术患儿的护理

临床上常见的球形晶状体[1]多见于球形晶状体-短指综合征患者,又名Marchesani综合征.其除眼部表现外,还合并有骨骼发育异常,严重者可伴有智力障碍.     

不同方法分离外周血单个核细胞对树突状细胞增殖的影响

目的 :探讨不同方法分离的外周血单个核细胞 (PBMC)对树突状细胞 (dentriticcells,DC)增殖产量的影响。方法 :取肝素抗凝血 ,分别用羟乙基淀粉 (hydroxyethy1starch ,HES)离心沉淀法、Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞 ,直接进行贴壁计数及DC的诱导培养。结果 :HES离心沉淀法、Ficoll密度梯度离心法分离的外周血单个核细胞 ,其贴壁细胞经FACS检测 ,CD1 4 细胞分别占贴壁总数的 6 5 0 6 %、6 3 80 % ,每 4 0ml外周血扩增的DC产量分别为 (0 .88～ 3.1 7)× 1 0 6和 (0 .79～ 3.0 2 )× 1 0 6。结论 :羟乙基淀粉法分离的PBMC更适用于DC的诱导培养。     

原发性胆汁性肝硬化25例临床与病理特征

目的:通过分析原发性胆汁性肝硬化的临床与病理特征,提高对该病的诊治水平。方法:对临床/病理学诊断的PBC25例住院患者的临床资料进行回顾性分析,总结患者的临床、生化、免疫学与病理学特征。结果:25例中抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)均阳性,抗核抗体(ANA)阳性21例;碱性磷酸酶(ALP)均明显升高,为524.9±214.4U/L,γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)升高17例,为461.1±248.9U/L,总胆红素升高8例,为274.1±161.6mol/L,均以DBIL升高为主。行肝穿刺病理检查12例,其中符合11例。熊去氧胆酸可延缓病程、改善胆汁淤积指标。结论:PBC主要累及中老年女性,血清ALP、γ-GT水平升高及AMA阳性有助于诊断本病。     

肾综合征出血热发病机制的系列研究

应用免疫组化、荧光免疫、放射免疫、RT-PCR、ECT、动物实验等现代技术对肾综合征出血热(HFRS)发病机制作了系列研究,发现HFRS病毒(HFRSV)有直接致病作用,病毒之膜蛋白(MP)在发病中起关键作用。HFRSV能侵犯外周血单个核细胞(PBMC),在其中复制,表达其结构蛋白,并随单核细胞散布至其它组织;病毒MP可引起肾小管上皮细胞融合;PBMC中病毒MP之表达强度与血浆内皮素水平     

外周血树突状细胞免疫治疗体外培养条件的优化

树突状细胞（DC）是人体内最重要的抗原递呈细胞。DC在抗病毒、抗肿瘤免疫治疗中具独特作用，展现出良好的应用前景。研究已证实，乙型肝炎病毒（HBV）感染及HBV慢性发病机制与DC成熟状态，有着密切关系。本研究通过优化培养条件，为开展DC抗病毒治疗进行理论探讨。     

模拟微重力下三维培养对人肝干细胞增殖和分化的影响

目的:探讨微重力环境对肝干细胞增殖及分化的影响。方法:从人肝组织中分离、培养肝干细胞,进行肝干细胞鉴定后,分别进行平面培养、微载体培养、模拟微重力下三维培养。利用倒置相差显微镜、扫描电镜观察不同培养条件下细胞形态学变化;检测上清液中葡萄糖消耗量和乳酸脱氢酶含量以比较细胞增殖和活性情况;荧光定量PCR法检测细胞ALB、EpCAM、CK19、AFP、HNF6、CYP3A4、CYP3A7 mRNA表达变化。结果:模拟微重力环境下,肝干细胞以微载体球面为基底呈三维立体结构生长,形成大小不等细胞团;扫描电镜下见细胞团表面有丰富的细胞外基质及微绒毛;从9 d开始葡萄糖消耗量明显增加,至17 d达高峰,而LDH含量始终保持低水平;培养至21 d细胞仍高表达EpCAM、ALB、CK19、HNF6、CYP3A7,不表达AFP、CYP3A4,符合肝干细胞表型特征,与微载体培养结果相比有统计学差异(P<0.05)。结论:模拟微重力环境能促进肝干细胞呈三维立体结构生长,有利于细胞快速增殖并维持细胞活性和表型。     

一例脉络膜转移癌眼球摘除术患者术前的心理护理

脉络膜转移癌临床较为少见。国内报道原发癌以肺癌为最多。我院于2002年4月收治1例肺癌并发脉络膜转移癌患者行眼球摘除术，术前实施心理护理取得较好的效果，现介绍如下。