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全人源肝癌噬菌体单链抗体的筛选及特异性鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的对全人源肝癌噬菌体单链抗体库进行鉴定,筛选肝癌抗体,同时对抗体的活性及特异性进行鉴定。方法PCR鉴定阳性重组菌TG1中人肝癌ScFv的插入率。先以人成纤维细胞吸附后再以体外培养的肝癌细胞SMMC7721为抗原对所建抗体库进行3轮“吸附洗脱扩增”的亲和筛选。将筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定;通过ELISA法及FCM鉴定其与人肝癌细胞及正常细胞的结合活性。结果ScFv基因插入率为70%。在亲和筛选过程中,肝癌噬菌体单链抗体得到富集,收获率逐轮得到提高,第3轮为第1轮的214倍。筛选后的ScFv进行PCR鉴定及双酶切鉴定,均可检测到目的基因。ELISA分析结果显示18个克隆与SMMC7721呈阳性反应,阳性率为90%,15个克隆与成纤维细胞有交叉反应。得到3株肝癌单链抗体。ScFv的FCM鉴定表明,以正常胎肝细胞L02为对照,ScFv与肝癌结合比率为41.3%。特异性鉴定表明,其与肝癌细胞结合活性明显高于正常细胞。结论利用噬菌体抗体库技术结合减数筛选得到了肝癌噬菌体单链抗体及其基因,且筛选后的抗体片段与人肝癌细胞有特异性的结合活性。 相似文献
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KAI1在肺癌组织芯片中的表达及其生物学意义 总被引:2,自引:1,他引:2
背景与目的 KAI1基因是新发现的转移抑制基因,它在多种肿瘤中有表达。该研究通过分析KAI1蛋白在肺良性病变组织、癌前组织、原发癌组织及局部淋巴结肺转移癌组织中的表达及其与临床病理生理特征之间的关系,探讨其在肺癌发生、发展、浸润、转移中的作用。方法 应用组织芯片技术和免疫组化S P方法检测肺癌组织中KAI1蛋白的表达。统计学方法采用χ2 检验、Fisher确切概率。结果 KAI1 蛋白在10例肺良性病变组织中阳性表达率为100.0%,在12例癌前病变组织中为66.7%,而在89例肺原发癌组织中表达仅为24.7%,在淋巴结转移肺癌病灶中更是显著下调(0)(P<0.05);原发癌组织中KAI1 蛋白的表达与患者年龄、性别、大体病理类型均无明显关系(P>0.05),而与肿瘤的组织学类型、分化程度、病理分期以及是否伴有淋巴结转移密切相关(P<0.05)。结论 KAI1 蛋白的异常表达可能参与了肺癌的恶性进展,它的表达降低促进了肿瘤的浸润转移,检测肺癌组织中KAI1 表达对肺癌的诊断及预后判断有一定的参考价值。 相似文献
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十二指肠血管压迹的影像学观察 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨胃肠钡餐造影检查中十二指肠横部血管压迹的来源.材料和方法对比研究50例钡餐造影所见的十二指肠横部血管压迹与相应CT层面上十二指肠横部、腹主动脉、肠系膜上动、静脉及下腔静脉之间的关系;3例血管造影与钡餐造影联合检查,证实该压迹的来源.结果所有病例十二指肠横部血管压迹均与腹主动脉相吻合;肠系膜上动脉等血管与该压迹的位置及宽度不符;下腔静脉偶可导致另一压迹.结论十二指肠横部血管压迹,为腹主动脉压迫所致,称其为"十二指肠腹主动脉压迹”较为准确. 相似文献
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大肠杆菌脂多糖诱导大鼠Kupffer细胞NF-κB激活及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨大肠杆菌脂多糖(LPS)诱导大鼠Kupffer细胞NF-κB激活及其意义。方法将Kupffer细胞随机分为A、B、C三组。A组为对照组,B组将LPS加入Kupffer细胞培养基共同培养,C组将PDTC和LPS加Kupffer细胞培养基共同培养。用EMSA法检测NF-κB活性,用Western blot法检测I-κB蛋白含量,用RT-PCR法检测TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达。结果培养液中加入LPS后Kupffer细胞NF-κB活性增加,I-κB水平下降,TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达增加;含有LPS的培养液中加入PDTC后Kupffer细胞NF-κB活性减少,I-κB水平上升,TNF-αmRNA、IL-6mRNA表达减少。结论LPS可诱导NF-κB激活,并促进KCs源性细胞损害递质的表达从而促进细胞损伤。 相似文献
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杨进 曾竣 张杰 司国爱 梁贵臣 梁大斌 廖和壮 李翠云 黄焕新 董柏青 杨宏徽 R Leon Ochial Ali Mohammad Camilo J Acosta 《中国公共卫生》2004,20(8):900-902
目的 了解影响成人疫苗接种率的有关社会经济影响因素。方法 选择广西河池市2个城镇,对5~60岁登记在册居民按有对照的组群随机抽样原则进行伤寒Vi疫苗和A群流脑疫苗的大规模接种;比较接种者的人口学和社会经济特征与接种率的关系。结果 应接种对象118071人,实际接种92476人,接种率为78.32%,其中伤寒Vi疫苗76.87%;流脑疫苗79.69%。城市接种率为77.29%,农村接种率为80.58%;5~9岁接种率最高,为89.65%;20~29岁组最低,仅为69.07%;男女接种率分别为79.07%和82.11%;高收入住户人群接种率最高达到90%左右;18~60岁人群中,按受教育程度分析以“小学毕业”人群接种率最高,为78.34%;按居住单元分析,学生的人群接种率最高,达92.01%,私营业主和退休人群接种率最低,分别为69.71%和68.82%;居住未满1年者的人群接种率最低.为62.5%.居住1~2年者接种率最高,为84.47%。结论 受教育程度、经济收入、居住年限以及城乡差别对接种率并无直接影响;流动性大、老年人是影响疫苗接种率的主要因素。 相似文献
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目的:构建人补体衰变加速因子(Decayacceleratingfactor,DAF)、补体膜辅助调节蛋白(membranecofactorprotein,MCP)、CD59的真核表达载体pSecTag2/HygroB-DAF、pSecTag2/HygroB-MCP、pSecTag2/HygroB-CD59。方法:应用PCR方法,从DAF-pGEM-TEasyVector、MCP-pGEM-TEasyVector和CD59-pGEM-TEasyVector分别克隆所需的DNA片段,经限制性内切酶BglandXhol消化后,插入到具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,分别构建人DAF、MCP、CD59真核表达质粒,并进行酶切鉴定及DNA序列测定分析。结果:DAF基因大小为1049bp,MCP基因大小为1065bp,CD59基因大小为312bp,与genbank中记载的人DAF、MCP和CD59cDNA序列结果基本相同。结论:成功构建DAF、MCP和CD59真核表达质粒,为今后进一步探讨及研究转基因肝脏奠定了基础。 相似文献
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目的:观察水蛭注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后TNFα-、IL-lβ和ICAM-1表达的影响,以探讨水蛭注射液对脑缺血再灌注损伤的保护机制。方法:96只健康W istar大鼠随机分为假手术组、模型组、丹参对照组、水蛭注射液组。采用线栓法制作大鼠脑缺血再灌注损伤模型,规定时间取脑标本,检测相关指标。结果:再灌注3h后脑组织TNFα-、IL-lβ和ICAM-1含量明显升高,水蛭注射液可以明显降低脑组织TNFα-、IL-lβ和ICAM-1含量(P<0.01~0.05)。结论:水蛭注射液可降低炎性细胞因子TNFα-、IL-lβ和ICAM-1的表达,抗脑缺血后炎症反应,从而起到脑保护作用。 相似文献