协同刺激分子B7和CD40在寄生虫感染免疫中的作用

协同刺激分子是一类参与免疫反应的辅助分子 ,存在于T/B细胞、抗原呈递细胞 (APC)和靶细胞表面。其中 ,APC/靶细胞表达 CD40、CD80 (B7-1)、CD86(B7-2 ) ;活化 T细胞表达 CD2 8、CD15 2 (CTLA-4 )、CD40 L、CD13 7等 ;活化 B细胞表达 CD40、CD2 4等。协同刺激分子与其相应受体结合可以产生协同刺激信号 ,参与细胞的免疫活化过程 ,在细胞抗原识别及免疫应答过程中起重要作用。B7∶CD2 8/CTL A4和 CD40∶ CD40 L是两类重要的协同刺激信号。 B7和 CD40也参与多种疾病的致病过程 ,如宿主抗移植物排斥反应、移植物抗宿主疾病…     

芪参益气滴丸治疗老年充血性心力衰竭疗效评价

将58例老年慢性充血性心力衰竭(CHF)患者随机分成两组,均给予洋地黄、利尿剂、血管扩张剂、ACEI治疗,治疗组在此基础上加用芪参益气滴丸口服,疗程2周,用药前后进行多普勒超声心动图检查.结果 治疗组心排血量、心脏指数和射血分数均较治疗前明显增加(P<0.01),与对照组比较亦有统计学差异(P<0.05),临床总有效率高于对照组(P<0.05),治疗期间无不良反应.认为芪参益气滴丸是治疗老年CHF安全、有效的辅助用药.     

日本血吸虫糖基诱导抗体类型与感染状态的关系研究

目的以日本血吸虫感染猪为模型,研究不同感染状态下针对糖基产生的抗体在宿主免疫应答中的作用。方法建立日本血吸虫感染猪模型,分别检测不同感染状态下猪血清中针对LNFPIII、N-糖苷水解酶F(PNGaseF)处理可溶性虫卵抗原(SEA)前后及过碘酸处理SEA前后的抗体水平。结果辐照致弱尾蚴单纯免疫组、正常尾蚴单纯感染组和免疫后予以感染的免疫攻击组的猪均针对LNFPIII产生了相应的IgM抗体应答。3组猪血清中针对PNGaseF处理SEA的特异性抗体IgG、IgM水平较未处理组略低,但抗体IgG和IgM水平差异均无统计学意义(P均0.05)。在单纯免疫组,猪血清中针对过碘酸处理SEA的特异性IgG、IgM、IgA抗体水平均较未处理组有所下降,差异有统计学意义(P均0.01),但辐照致弱日本血吸虫糖基成分所诱导的抗体水平均较低。在单纯感染组,猪血清中针对过碘酸处理SEA的抗体IgG、IgM水平在感染后第8周下降极为显著,抗体水平差异有统计学意义(P均0.01),其中糖基所诱导的抗体亚型以IgG1为主。此时,在虫负荷显著降低的免疫攻击组,日本血吸虫糖基成分能够显著增强IgG、IgM、IgA,特别是IgG2的表达。结论日本血吸虫糖基成分能够诱导宿主产生多种类型的抗体应答;且抗体亚型的表达与宿主的感染状态相关,即IgG1亚型的表达与日本血吸虫急性感染期的虫负荷和卵负荷一致;而具有免疫保护力的宿主能够针对日本血吸虫糖基成分产生IgG2应答。     

含不同剂量谷氨酰胺肠内营养对老年危重患者氧化应激状态的影响

目的探讨给予不同剂量谷氨酰胺的肠内营养对老年危重患者氧化应激状态的影响。方法将90例老年危重患者随机分成3组：不含谷氨酰胺的完全胃肠外营养组（A组）,低剂量谷氨酰胺（0．3g·kg-1·d-1）肠内营养组（B组）,高剂量谷氨酰胺（0．6g·kg-1·d-1）肠内营养组（C组）。于营养支持的第1天、第7天、第14天清晨采集空腹静脉血,测定血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）,观察患者氧化应激的水平变化,同时比较急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ（APAcHEII）和C-反应蛋白（CRP）的变化。结果含有谷氨酰胺的肠内营养组（B、C组）MDA于营养支持后的第7天均出现降低（P〈0．05）,第14天时高剂量的谷氨酰胺C组下降更明显（P〈0．05）。低剂量B组sOD于第7天就出现上升（P〈0．05）,高剂量C组于第14天时上升（P〈0．05）。GSH—PX在营养支持后有所上升,但未出现统计学上的差异俨〉0．05）。B、C组的APACHE1I评分和CRP均于营养支持后的第7天出现下降（P〈0．05）,第14天时,C组继续出现下降（P〈0．05）。结论含谷氨酰胺的肠内营养能改善老年危重患者的氧化应激状态,含高剂量的谷氨酰胺肠内营养改善的程度更为明显。     

日本血吸虫可溶性虫卵抗原诱导BIO细胞产生的研究

目的观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）与成虫抗原（SwAP）是否能够诱导小鼠调节性B细胞的产生。方法SEA、SWAP和脂多糖（LPS）分别体外刺激小鼠脾脏单个核细胞和磁珠分选后的脾脏CD19＋B细胞,72h后用流式细胞术分别检测CD19＋IL-10＋细胞比例,和细胞表面CD80、CD86及CD40的表达,用ELISA法检测培养上清中IL-10的水平。体内实验用SEA、SWAP、PBS分别和不完全弗氏佐剂混合免疫小鼠,1次／N,共3次,末次免疫后7d取小鼠脾脏,流式细胞术检测CD19＋IL-10＋细胞比例,用ELIsA法检测培养上清中IL-10的水平。结果LPS与SEA体外均能显著诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋IL-10＋细胞,两者无显著差异,而swAP组不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋II-10＋。细胞;SEA与LPS能够诱导脾脏CD19＋B细胞表面高表达CD80、CD86和CD40,而SwAP不能诱导脾脏CD19＋B细胞活化;SEA与LPS诱导脾脏CDt9＋B细胞分化为IL-10＋细胞的比例也显著升高,同时能刺激脾脏CD19＋B细胞分泌高水平的IL-10,两者无显著差异;而SwAP不能诱导小鼠脾脏CD19＋。B细胞分化为IL—10＋细胞并分泌IL-10。SEA体内免疫小鼠后,小鼠脾脏单个核细胞分化为CD19＋IL-10＋细胞比例显著升高,并且能够分泌高水平的IL-10,而swAP和PBS免疫组均不能诱导小鼠脾脏单个核细胞分化为CD-9＋IL-10＋细胞并分泌1L-10。结论SEA体外体内均能诱导小鼠产生分泌IL-10的B10细胞,并且在体外不依赖于脾脏其他免疫细胞的参与,而SwAP体外体内均不能诱导B10细胞的产生。     

疏肝益气消脂汤治疗非酒精性脂肪性肝病肝郁脾虚证的临床疗效观察

目的:观察自拟疏肝益气消脂汤治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)肝郁脾虚证的临床疗效.方法:64例NAFLD肝郁脾虚证患者随机分为多烯磷脂酰胆碱治疗对照组和加用疏肝益气消脂汤治疗观察组,每组32例,两组均接受治疗8周后评定治疗效果.治疗前后检测血ALT、GGT、TC、TG变化并采用Fibrotouch检测肝脂肪受控衰减...     

可溶性HLA-A2-IgGFc融合蛋白在昆虫细胞的表达及鉴定

目的利用杆状病毒-昆虫细胞表达体系制备可溶性HLA-A2与免疫球蛋白IgGFc段的融合蛋白。方法首先将可溶性HLA-A*0201和IgG3分子Fc段的cDNA基因插入杆状病毒表达载体pFastHTa,形成重组载体pFHT-sHLA-A*0201-IgGFc。将该重组载体转化DH10Bac大肠杆菌,sHLA-A*0201-IgGFc基因同源重组入菌体内杆粒(Bacmid)中。抽提阳性杆粒,转染昆虫细胞Sf9,72 h收集病毒上清。再将病毒上清感染Sf9细胞,96 h收集细胞并裂解,SDS-PAGE观察其表达。细胞裂解液经Ni+-NTA树脂纯化Western-blot法鉴定其蛋白质序列,间接ELISA法鉴定是否形成正确构象。结果融合蛋白不仅与HLAⅠ类分子的构象特异性抗体(W6/32)结合,还与羊抗人IgG抗体结合。结论所制备可溶性HLA-A2-IgGFc融合蛋白序列正确,并在体外形成正确空间构象。     

胫骨疲劳性骨折X线及CT诊断

骨骼是一个动力性组织，它随应力改变而增强和改造，应力不良会使其破骨活动超过成骨活动，引起局部骨质变弱，进一步可以骨折，出现临床症状。胫骨疲劳性骨折是骨骼某一部位由于受到持续外力或长期积累损伤而引起的慢性骨折。产生原因认为是由于小腿肌肉紧张淤血，肌肉附着处骨骼被牵引后经刺激骨膜而发生浆液性反应；也可能是由于机械负重而引起的骨抵抗不均衡，     

HABP1基因慢病毒干扰和表达载体的构建及表达

摘要：目的：构建慢病毒介导的透明质酸结合蛋白1基因（HABP1）干扰载体及表达载体,建立HABP1降表达及过表达的稳定肾癌细胞系786-0。 方法：合成人HABP1基因短发夹RNA(shRNA)干扰序列,与慢病毒载体pLKO.1-TRC连接产生重组质粒pLKO.1-shHABP1;双酶切质粒pCDNA3.1(-)-HABP1-Flag,将目的基因片段连接到pCDH-CMV-MCS-EF1-Puro载体上,组成重组表达载体pCDH-HABP1;酶切鉴定及DNA测序后,转染293T细胞,收集慢病毒颗粒感染786-0细胞,嘌呤霉素筛选稳定细胞系,western blot验证HABP1蛋白的表达水平。 结果：构建成干扰载体pLKO.1-shHABP1及表达载体pCDH-HABP1;与随机序列对照组比较pLKO.1-shHABP1转染的786-0细胞HABP1表达水平(0.30±0.01)明显降低(t=25.98,P<0.05),pCDH-HABP1转染786-0细胞后,HABP1的表达水平（3.20±0.40）明显升高(t=10.34,P<0.05)。 结论：成功构建HABP1基因的干扰载体及表达载体,且786-0细胞可稳定降表达及过表达HABP1。     

p65 siRNA联合顺铂对宫颈癌HeLa229细胞增殖及侵袭力的影响

目的 通过RNA干扰(RNAi)阻断宫颈癌细胞HeLa229中核因子(NF)-kB信号通路,观察其单独或与顺铂(DDP)联合对HeLa229增殖、耐药性和侵袭力的影响.方法 利用RNAi技术,将HeLa229分为未转染组(A组)和转染p65小干扰RNA(siRNA)组(B组),用MTT法检测转染p65 siRNA 24、48、72 h时HeLa229的增殖情况;加入不同浓度DDP,观察其对HeLa229细胞增殖的影响.用Boyden chamber体外侵袭实验检测A、B组及p65siRNA与DDP(8.6 mg/L)联合组(C组)细胞侵袭力的变化.结果 B组细胞存活率较A组明显下降;加入DDP后,A、B组细胞的存活率均随DDP浓度的增加而下降.siRNA与DDP联合应用可明显提高HeLa229对DDP的敏感性.与A组相比,B、C组穿越Matrigel胶的细胞数明显减少(P<0.05).结论 应用RNAi技术可有效阻断HeLz229内NF-KB信号通路,抑制其增殖和体外侵袭力,增强其对DDP的敏感性.