PRL-3在乳腺癌组织及细胞系中的表达

目的:研究乳腺浸润性导管癌组织及乳腺癌细胞系中PRL-3的表达,同时在乳腺癌细胞系中应用SOV抑制剂在不同时间点检测PRL-3的表达情况。方法:应用western blotting方法检测乳腺浸润性导管癌及乳腺癌细胞系中PRL-3的表达,且在乳腺癌细胞系中加入不同浓度的SOV抑制剂后在不同时间点检测PRL-3的表达情况。结果:在乳腺浸润性导管癌组织中PRL-3的表达明显高于其癌旁乳腺组织,统计学显示P<0.01,且有淋巴结转移组的表达也显著高于无淋巴结转移组(P<0.01)。应用不同终浓度的SOV(0、2、5、10μmol/L)处理BT549细胞24h、48h、96h、120h后,结果显示PRL-3的表达水平随着SOV浓度的增高表达逐渐下降,呈现出明显的时间-剂量效应关系。结论:PRL-3可能将作为乳腺癌的一种诊断和治疗的靶点,而且其表达的增高会加速乳腺癌的转移。     

类似卵巢性索肿瘤的子宫肿瘤4例及其临床病理特征

目的：类似卵巢性索肿瘤的子宫肿瘤(uterine tumor resembling ovarian sex cord tumor,UTROSCT)是发生于子宫体的罕见肿瘤。本研究旨在探讨UTROSCT的临床病理特点、诊断及鉴别诊断。方法：回顾性分析郑州大学第三附属医院2020年1月至2023年6月诊治的4例UTROSCT患者的临床病理资料、免疫组织化学及荧光原位杂交等检查结果,总结其病变特点。结果：4例患者年龄为44～59(中位数46.5)岁,3例因月经异常就诊,1例为体检发现。肿瘤直径为3.0～5.0(中位数4.1) cm,3例肿瘤位于黏膜下,1例位于肌壁间。彩色多普勒超声检查均提示不均质低回声,2例行宫腔镜下黏膜肌瘤电切术,1例行腹腔镜下全子宫加双侧输卵管切除术,1例行腹腔镜下全子宫加双附件切除术。4例患者随访2～42(中位数33.5)个月,均未见复发及转移。显微镜下肿瘤细胞呈片状、巢状、小梁状和条索状排列,3例肿瘤细胞由上皮样细胞构成,细胞中等大小,细胞质中等或稀少,部分细胞质透亮,1例肿瘤细胞由上皮样细胞和泡沫样细胞构成,其中泡沫样细胞大小较一致,胞质丰富,2种肿瘤细胞核呈圆形或卵圆形,染色质较细,可见核仁。4例肿瘤细胞均形态温和,未见明确坏死、脉管内瘤栓及病理性核分裂象。免疫组织化学显示肿瘤细胞表达波形蛋白(vimentin)(4/4)、细胞角蛋白(cytokeratins,CK)(3/4)、雌激素受体(estrogen receptor,ER)(4/4)、孕激素受体(progesterone receptor,PR)(4/4)、白细胞分化抗原10(cluster of differentiation 10,CD10)(3/4),并且至少表达2种以上性索源性标志[钙网蛋白(calretinin)(3/4)、类固醇生成因子-1(steroidogenic factor-1,SF-1)(2/4)、白细胞分化抗原99(cluster of differentiation 99,CD99)(4/4)、神经细胞黏附分子(cluster of differentiation 56,CD56)(4/4)、α-抑制素(α-inhibin)(2/4)、肾母细胞瘤基因1(Wilms’ tumor gene 1,WT-1)(3/4)]。4例肿瘤细胞均表达肌源性标志平滑肌肌动蛋白(smooth muscle actin,SMA)(4/4)及结蛋白(desmin)(4/4),均不表达上皮膜抗原(epithelial membrane antigen,EMA)(0/4),增殖指数Ki-67为5%～10%。荧光原位杂交检测结果显示病例3和病例4 NCOA3基因断裂(2/4),病例1和病例2未见断裂;病例2未见JAZF1基因断裂(0/1)。结论：UTROSCT是一种非常罕见的子宫肿瘤,常见于中年女性,具有低度恶性倾向,彩色多普勒超声检查表现为不均质低回声,组织学形态、免疫组织化学及分子改变相结合有助于其诊断与鉴别诊断。     

蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3在乳腺癌中表达及意义

目的探讨乳腺浸润性导管癌及乳腺不典型增生组织中蛋白酪氨酸磷酸酶PRL-3表达情况。方法采用SP法及RT-PCR方法检测60份乳腺癌组织及50份乳腺不典型增生组织标本中PRL-3表达情况,分析PRL-3与乳腺浸润性导管癌临床病理特征的关系。结果在乳腺癌癌变过程中PRL-3表达阳性率呈递增趋势;PRL-3表达与有无淋巴结转移有相关性（P=0.011）;PRL-3在乳腺癌中表达明显高于乳腺不典型增生组织（P〈0.05）。结论乳腺癌组织中PRL-3在蛋白及基因水平呈高表达,一定程度上提示PRL-3与乳腺癌发生密切相关。     

乳腺浸润性导管癌组织中CD147与基质金属蛋白酶-9表达

目的探讨CD147与基质金属蛋白酶（metalloprotease,MMP）-9在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测60份乳腺浸润性导管癌石蜡包埋组织中CD147与MMP-9的表达;采用Western blot方法检测28份乳腺浸润性导管癌及癌旁新鲜组织标本中CD147与MMP-9表达情况。结果免疫组织化学结果显示,CD147主要在癌细胞的胞膜及胞质中表达,在间质中不表达;MMP-9主要在癌细胞的胞质中表达,在间质中不表达;CD147与MMP-9表达在组织学分级及淋巴结转移上差异有统计学意义（P〈0.05）;在年龄、肿块大小及临床分期上差异无统计学意义（P〉0.05）;2种蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中表达有明显相关性（r=0.769,P〈0.05）。Western blot结果显示,乳腺浸润性导管癌组织中CD147与MMP-9表达高于癌旁乳腺组织（P〈0.05）,且有淋巴结转移者高于无淋巴结转移者（P〈0.05）。结论 CD147与MMP-9在乳腺浸润性导管癌组织中表达明显增高,可能在乳腺癌发生、发展中发挥重要作用。     

HPV L1衣壳蛋白在不同宫颈病变的表达及临床意义

目的 探讨人乳头状瘤病毒（human papillomavirus,HPV）L1衣壳蛋白在不同宫颈病变脱落细胞中的表达及临床意义.方法 收集2012年1月至2013年7月在我院经第二代杂交捕获法检测HPV DNA阳性患者的宫颈脱落细胞标本312份,采用CytoReact HPV L1试剂盒检测壳蛋白在宫颈脱落细胞中的表达,并追踪其组织病理结果.结果 HPV L1衣壳蛋白定位于细胞核,阳性细胞其细胞核着色为红褐色颗粒,位于鳞状细胞的表层,基底细胞无表达.312份宫颈液基细胞学标本中有105份HPV L1衣壳蛋白呈阳性表达,总阳性率为33.65％（105/312）,其中未见上皮内病变或恶性细胞（negative for intraepithelial lesion or malignancy,NILM）为27.33％ （47/172）;未明确意义的非典型鳞状上皮细胞（atypical squamous cell of undermined significance,ASC-US）为36.92％（24/65）;不排除高度鳞状上皮病变的非典型鳞状上皮细胞（ASC of can not exclude high-grade squamous intraepithelial lesion,ASC-H）为21.43％（3/14）;低度鳞状上皮内病变（low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL）为69.44％（25/36）;高度鳞状上皮内病变（high-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL）为28.57％（6/21）;鳞癌（squamous cell carcinoma,SCC）为0.00％ （0/4）.六组间HPV L1衣壳蛋白阳性表达率差异有统计学意义（P＜0.05）,其中LSIL与HSIL相比,ASC-US/LSIL与ASC-H/HSIL相比,LSIL与HSIL/SCC相比,LSIL/ASC-H与HSIL/SCC相比,NILM与LSIL相比,HPV L1衣壳蛋白阳性表达率差异均有统计学意义（P均＜ 0.05）,且随宫颈细胞学病变程度的加重,HPV L1衣壳蛋白表达呈下降趋势.312例患者中有143例追踪到组织学结果,其中HPV L1衣壳蛋白阳性表达的有46例,总阳性率为32.17％ （46/143）,其中慢性宫颈炎为27.08％（13/48）,宫颈上皮内瘤样病变Ⅰ级（cervical intraepithelial neoplasia Ⅰ,CIN Ⅰ）为48.84％（21/43）,CINⅡ为33.33％ （8/24）,CINⅢ为17.39％ （4/23）,SCC为0.00％（0/5）.五组间HPVL1衣壳蛋白阳性表达率差异有统计学意义（P＜0.05）.CIN Ⅰ与CINⅡ/CINⅢ相比,慢性宫颈炎与CIN Ⅰ相比HPV L1衣壳蛋白阳性率差异均有统计学意义（P均＜0.05）,且随宫颈组织学病变程度加重,HPVL1衣壳蛋白表达呈下降趋势.以30岁为界将患者分为两组,其中≤30岁组HPV L1衣壳蛋白阳性率为44.00％（44/100）;＞30岁组HPV L1衣壳蛋白阳性率为28.77％（61/212）,两组间差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 随宫颈病变程度加重,HPV L1衣壳蛋白表达呈下降趋势,HPV L1衣壳蛋白检测对宫颈鳞状上皮内病变有一定的预测作用.     

靶向调控AQP4对非小细胞肺癌细胞化疗敏感性的调控作用

摘要：目的 探讨靶向沉默水通道蛋白4（AQP4）基因对非小细胞肺癌细胞化疗敏感性影响,并研究其分子作用 机制。方法 实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）和 Western blot 分别检测非小细胞肺癌 A549 细胞以及顺铂耐药菌株 A549/DDP中AQP4 mRNA和蛋白的表达。设计靶向AQP4的siRNA-1和siRNA-2,采用siRNA抑制A549/DDP细胞 中AQP4的表达,筛选出最优siRNA,将其转染A549/DDP细胞,设立siRNA-NC组和空白对照组。CCK-8法检测细胞 增殖能力并计算各组细胞的半数抑制浓度（IC50）;流式细胞术检测细胞凋亡。Western blot检测P53和Bcl-2蛋白的 表达。结果 AQP4 mRNA和蛋白在A549/DDP细胞中的表达水平显著高于A549细胞,AQP4表达沉默后A549/DDP 细胞增殖抑制,细胞凋亡增加,对顺铂的敏感性增加,凋亡相关蛋白P53表达增加,而Bcl-2蛋白表达降低。结论 通 过靶向调控AQP4的表达可以增加非小细胞肺癌细胞对化疗药物的敏感性。     

雌激素受体α基因shRNAi慢病毒载体的构建与滴度测定

目的:构建雌激素受体(ER)α基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,检测病毒感染细胞的滴度.方法:针对已经筛选确定的ERα基因RNAi有效靶序列,合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双链DNA,与经AgeⅠ和EcoR Ⅰ酶切后的pGCsil-GFP载体[含U6启动子和绿色荧光蛋白(GFP)]连接产生 shERα-LV慢病毒载体,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定.用shERα-LV载体、pHelper 1.0载体和pHelper 2.0质粒共转染包装293T细胞,包装产生慢病毒,以293T细胞GFP蛋白的表达水平测定病毒滴度.结果:PCR和测序证实,成功构建ERα shRNA的慢病毒载体shERα-LV.包装慢病毒,浓缩病毒悬液的滴度为2×108 TU/mL.结论:成功构建人ERα基因RNAi慢病毒载体,为ERα在乳腺癌发生发展中的研究提供了基础.     

p-BAD及p-AKT蛋白在宫颈癌癌变过程中的表达及意义

目的探讨P—BAD、p-AKT蛋白在宫颈癌组织中的表达及与临床病理特征的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测100例宫颈石蜡包埋组织、WesternBlotting法检测30例宫颈癌及癌旁宫颈组织中P—BAD、P—AKT的表达情况。分析两种蛋白在宫颈组织中表达的意义及其与临床病理特征的关系。结果免疫组化结果显示在宫颈癌癌变过程中这两种蛋白表达阳性率呈递增趋势（P值分别为0．001、0．003）;p—BAD、P—AKT蛋白在CINIn级及原位癌组与宫颈癌组间差异有明显统计学意义（P=0．036、0．048）。两种蛋白与宫颈癌患者的年龄无明显关系,但均与临床分期、组织学分级相关（P值分别为0．037、0．018;0．001、0．002）。p-AKT蛋白的表达与盆腔淋巴结转移有关（P=0．023）。WesternBlotting结果显示,宫颈癌组织中两种蛋白含量明显高于癌旁组织（P值分别为0．002、0．003）。结论本试验提示两种蛋白表达水平在一定程度上可能揭示了宫颈上皮内瘤变向宫颈癌的转化的潜能。