骨髓间充质干细胞移植显著促进急性心肌梗死大鼠的心功能恢复

目的通过横向比较乳鼠心肌细胞、骨髓单个核细胞（BMMNCs）、骨髓间充质干细胞（BMMSCs）移植治疗大鼠急性心肌梗死（MI）的疗效,确定更优异的移植细胞。方法以结扎法建立大鼠急性MI模型,分离培养乳鼠心肌细胞、BMMNCs、BMMSCs,体外进行DAPI标记后,直视下分别植入急性MI 1周后的大鼠MI中心及边缘区,移植的细胞数为2×106/只。移植后4周,进行后心功能检测,并处死动物以免疫组化染色法检测移植细胞的分化及血管新生。结果LSD法检测显示,大鼠的左室射血分数（LVEF）,BMMSCs移植组为（61.00±2.21）%、乳鼠心肌细胞移植组为（58.74±2.21）%、BMMNCs移植组为（59.87±3.05）%较对照组[为（55.45±3.05）%]大鼠的心功能均有显著提高（P值依次为<0.05、<0.05、<0.01）其中BMMSCs组优于其他处理组,BMMSCs能表达血管平滑肌肌动蛋白,促进血管新生,但未见其表达心肌细胞的特异抗原。结论在分别以乳鼠心肌细胞、BMMNCs和BMMSCs移植治疗大鼠的急性MI的比较中,BMMSCs对心功能的保护效果最显著,保护机制与其血管新生等有关。     

冠心病患者介入治疗后氯吡格雷抵抗的发生率及相关因素

目的观察冠心病介入治疗患者的氯吡格雷抵抗的发生率及相关因素。方法利用比浊法测定5μmol/L二磷酸腺苷（adenosine diphosphate,ADP）诱导的血小板聚集率（platelet aggregation rate,PAR）来判定是否发生氯吡格雷抵抗,并将研究对象按是否发生抵抗分组,按病例对照研究方法分析相关因素。结果冠心病患者介入治疗后氯吡格雷抵抗的发生率为24.3%。抵抗组与非抵抗组比较发现胰岛素抵抗指数（HOMA-IR,5.3±3.3vs3.5±2.9,P<0.01）、总胆固醇[（5.3±1.6）mmol/Lvs（4.7±1.0）mmol/L,P<0.05)]及冠脉病变程度[（65±53）分vs（31±29）分,P<0.01)]有统计学意义。结论氯吡格雷抵抗的发生率24.3%,胰岛素抵抗、总胆固醇和冠脉病变程度可能是其相关因素。     

血栓抽吸对急性ST段抬高心肌梗死患者的疗效

目的：探讨急性 ST 段抬高心肌梗死（STEMI）患者行急诊冠脉介入治疗（PCI）中使用血栓抽吸的临床疗效及对预后的影响。方法：STEMI 患者105例,其中应用血栓抽吸＋PCI 治疗34例（血栓抽吸＋PCI 组）,接受常规 PCI 治疗71例（常规 PCI 组）,比较两组患者术后血流恢复及心功能指标的变化以及术后1年内主要不良心血管事件（MACE）及再入院情况。结果：与常规 PCI 治疗组相比,血栓抽吸＋PCI 组血流恢复后的肌酸激酶同工酶[CK-MB,（236.62±133.00）ng/ml 比（186.47±69.20）ng/ml]、肌酸激酶（CK）[（2833.39±198.70）ng/ml 比（2129.59±199.40）ng/ml]峰值及 CK-MB [（12.38±6.70）h 比（9.65±3.90）h],CK [（12.80±8.10）h 比（9.68±3.50）h]峰值时间均显著降低（P 均＜0.05）;随访1年 MACE 事件发生率（19.7％比8.8％）及再入院率（66.2％比50.0％）有下降趋势,但无统计学意义（P ＞0.05）。两组血流恢复与心功能的差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论：急诊 PCI 术中血栓抽吸有助于减轻病情,使酶学水平显著下降,可能还改善预后。     

中药复方制剂干预动脉粥样硬化的实验研究

目的:探究以白藜芦醇、小檗碱、姜黄素和青蒿琥酯单体组合为基础,以合理的剂量配比达到对动脉粥样硬化干预最有效和安全的复方制剂,以期对他汀不耐受患者提供一种干预动脉粥样硬化的方案.方法:通过高脂饲料法建立载脂蛋白E敲除(apolipoprotein E-knockout,ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化模型.选择白藜芦醇、...     

多种细胞移植治疗心肌梗死的比较

目的通过横向比较乳鼠心肌细胞、骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞及诱导后的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠急性心肌梗死的疗效,确定更优异的移植细胞。方法分离培养和鉴定新生心肌细胞、骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞,并在体外用5-氮杂胞苷诱导骨髓间充质干细胞向心肌细胞分化。二脒苯基吲哚(DAPI)标记移植细胞,5组(包括4组细胞处理组和对照组)大鼠急性心肌梗死后一周,可直视下在梗死中央区和周边区注射同等数量级细胞(2×106／只),4周后行心功能检测。处死动物,免疫荧光法检测移植细胞缝隙连接蛋白(connexin-43)、横纹肌肌动蛋白、血管平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅷ因子相关抗原(vWF)以确定移植细胞的分化情况,免疫组化法检测心肌组织中血管平滑肌肌动蛋白和vD因子相关抗原以确定血管新生情况。结果体外实验显示经5-氮杂胞苷诱导的骨髓间充质干细胞能部分表达横纹肌肌动蛋白:体内试验,移植4周后,间充质干细胞组、乳鼠心肌细胞组、骨髓单个核细胞组大鼠心功能均较对照组大鼠心功能明显提高,其中间充质干细胞组优于其他处理组,间充质干细胞,能表达血管平滑肌肌动蛋白,促进血管新生,但未见其表达心肌细胞特异抗原,而诱导后骨髓间充质干细胞对心功能无显著作用。结论在乳鼠心肌细胞、骨髓单个核细胞、骨髓间充质干细胞、诱导后的骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠的急性心肌梗死的比较中,间充质干细胞对心功能的保护效果最显著,其机制与血管新生等有关。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与冠心病临床类型的关系

目的 探讨基质金属蛋白酶（MMPs）上游调控因子细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）与动脉粥样硬化形成及冠心病临床类型的关系。方法 根据临床表现和冠状动脉造影结果,223例患者分成ST段抬高心肌梗死（STEMI）组（n=65）、非ST段抬高急性冠状动脉综合征（NSTE ACS）组（n=42）、稳定型心绞痛（SAP）组（n=75）、冠状动脉造影正常组（正常对照组,n=41）。使用流式细胞仪检测患者外周血单核细胞（PBMCs）表面EMMPRIN的平均荧光强度（MFI）;ELISA法测定血清中MMP-9的质量浓度;免疫速率法检测血清高敏C反应蛋白（hs-CRP）的质量浓度。结果 SAP组、STEMI组及NSTEACS组PBMCs表面EMMPRIN MFI均高于正常对照组（P<0.05或P<0.01）;而STEMI组和NSTE ACS组又高于SAP组（P<0.05或P<0.01）。各组中PBMCs表面EMMPRIN的表达特点与hs-CRP和MMP-9的表达特征一致。相关性分析显示,PBMCs表面的EMMPRIN MFI 与血清MMP-9、hs-CRP质量浓度呈正相关（r=0.168,P<0.05;r=0.305,P<0.01）。结论 EMMPRIN作为MMPs上游调控因子可能对动脉粥样硬化形成和冠心病的不稳定有促进作用。     

细胞移植在缺血性心脏病血管新生中的应用

作为弥补传统内外科治疗缺血性心脏病的不足，治疗性血管新生已成为挽救缺血性心肌组织的重要方法：通过对外周及造血干细胞中内皮祖细胞(EPC)表面抗原KDR、CD34的识别，对EPC分化和扩增，使其增加血管新生。该文着重就缺血心肌血管的再生机制、内皮祖细胞的来源、体外扩增及靶向定位、细胞表型作了归纳。对于细胞移植用于严重缺血性心脏病患者的临床试验初步显示患者临床症状减轻，MRI显示心肌灌注和心肌功能均有改善，但该研究仍处于Ⅰ期临床阶段，进一步大规模随机双盲试验有待明确细胞移植的长期疗效、靶向性和安全性。     

PPARγ激动剂筛选模型的建立及其应用

目的建立一种简便实用的细胞模型,用于筛选过氧化物酶增殖剂激活受体γ(PPARγ)的新配体激动剂.方法在U937细胞中,共转染PPARγ表达和报告质粒,构建PPARγ激动剂筛选模型,单独转染PPARγ报告质粒作为阴性对照.转染细胞中加入候选药物,24 h后裂解细胞,测定细胞内报告质粒所表达虫荧光素酶的活性,该活性大小即代表药物激动PPARγ的能力. 结果已知的PPARγ配体激动剂吡格列酮使虫荧光素酶活性增强了4.48倍(P<0.001),验证了模型的有效性.高密度脂蛋白(HDL)不能激动PPARγ,而氧化后随剂量增加,使虫荧光素酶活性增强1.33倍(25 μg/mL)和1.78倍(50 μg/mL),但没有达到统计学差异(P=0.058,P=0.054);白藜芦醇使虫荧光素酶强度增加了1.78倍和2.47倍(P=0.033, P=0.01).结论通过细胞共转染PPARγ表达质粒和编码虫荧光素酶的报告质粒,可以建立简便的PPARγ激动剂筛选模型.HDL氧化后可能会产生激动PPARγ的成份,而白藜芦醇具有较强的PPARγ激动能力.     

双源螺旋CT在心脏冠脉成像中的作用

上海交通大学医学院附属新华医院2007年引进世界首款双源螺旋CT（DSCT）。成为上海首家拥有此设备的医院。     

pcDNA3-TIMP-2的构建与表达

目的构建TIMP-2基因的真核表达载体pcDNA3-TIMP-2，并探讨其体外表达效果。方法应用已克隆得到的人TIMP-2基因和分子克隆技术构建pcDNA3-TIMP-2，酶切鉴定，并用体外培养人THP-1细胞，电穿孔转入pcDNA3-TIMP-2，RT-PCR和Western blotting分别检测外源基因转染效果，Zymography检测培养上清MMPs活性。结果构建pcDNA3-TIMP-2经酶切和测序鉴定正确，电穿孔法导入体外培养人THP-1细胞后，TIMP-2mRNA约增加2．8倍，TIMP-2蛋白表达增加约2．7倍，MMP-2和MMP．9的活性分别约为对照组的32％和28％。结论成功构建了pcDNA3-TIMP-2，且证实有良好的体外转染和表达效果，为进行转移TIMPs基因抑制MMPs及探讨其与动脉粥样硬化等多种病理过程的关系奠定基础。