Cbfal对骨髓间充质干细胞分化的定向调控研究

目的 研究Cbfal调控间充质干细胞(MSCs)分化为成骨细胞的分子机制。方法 用Percoll密度梯度离心法分离获得人、大鼠和小鼠的MSCs，通过苏木精-伊红染色、细胞化学、免疫细胞化学、免疫荧光及透射电镜等方法进行鉴定。传代培养后的MSCs分别用重组真核表达载体pcD-NA3．1( )／Cbfal-Ⅱ通过脂质体系统转染，用Northern Blot检测三种成骨细胞特异性细胞外基质蛋白mRNA的表达情况。结果 转染后人、大鼠和小鼠的MSCs都有骨钙素、骨桥接蛋白和Ⅰ型胶原的表达，三间无明显差别。结论 Cbfal在转录水平定向调控间充质干细胞分化为成骨细胞．可应用于骨科疾患的基因治疗。     

高浓度胰岛素对兔视网膜Müller细胞表达血管内皮生长因子的影响

目的探讨高浓度胰岛素对体外培养的视网膜Müller细胞表达血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法采用免疫细胞化学法、原位杂交法及ELISA法,定性、定量测定在不同浓度胰岛素条件下,体外培养的兔视网膜Müller细胞表达VEGF的变化.结果胰岛素能明显增强VEGF的表达,并通过转录水平调节.结论高浓度胰岛素可能通过刺激Müller细胞编码VEGF基因的转录,增强VEGF蛋白的表达,从而加速糖尿病视网膜病变的新生血管形成.     

高糖对视网膜Müller细胞bFGF表达及钠离子通道的影响

目的观察在高浓度葡萄糖条件下,体外培养兔视网膜Müller细胞碱性成纤维生长因子(basic fibroblastgrowth factor;bFGF)的表达及其钠(Na+)通道的变化。方法采用免疫细胞化学,透射电镜方法鉴定体外培养的兔视网膜Müller细胞;应用免疫细胞化学方法定性观察高糖条件下视网膜Müller细胞bFGF表达的变化;利用膜片钳技术观察高糖条件下Müller细胞Na+通道的变化。结果高糖可以刺激视网膜Müller细胞表达bFGF,使Na+通道的开放概率降低。结论高糖刺激Müller细胞bFGF的表达,而发挥促血管生成的作用,在此过程中Na+通道的开放概率降低。