羊栖菜多糖对S180荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究

 目的分析羊栖菜多糖对S₁₈₀荷瘤小鼠红细胞相关生化功能影响的研究。方法建立肿瘤动物模型,分高、中、低剂量腹腔给予羊栖菜多糖7 d,采集红细胞,制备红细胞悬液,运用激光共聚焦扫描技术测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca²⁺]的变化;运用相关试剂盒测定红细胞膜表面唾液酸含量和Na⁺,K⁺-ATPase及Ca²⁺,Mg²⁺-ATPase活性的变化;用流式细胞仪分析红细胞膜电位水平的变化;采用高效毛细管电泳法测定红细胞电泳合淌度的变化。结果羊栖菜多糖能降低荷瘤小鼠红细胞内[Ca²⁺],升高膜表面唾液酸的含量,增强膜表面Na⁺,K⁺-ATPase及Ca²⁺,Mg²⁺-ATPase的活性,提高红细胞膜电位水平,提高红细胞的电泳合淌度。结论羊栖菜多糖可调节或恢复S₁₈₀荷瘤小鼠红细胞多种生理生化功能。     

抗结核骨组织工程复合体局部治疗兔脊柱结核的对比研究

目的探讨以羟基磷灰石与/β-磷酸三钙(hydroxyapatite and/β-tricalcium phosphate,HA/β-TCP)复合体材料及同种异体骨为支架材料构建的抗结核性骨组织工程复合体,评价两种不同抗结核骨组织复合体治疗兔脊柱结核的效果。方法取3月龄经造模成功后的新西兰大白兔36只,行病灶清除术,随机分为3组,每组12只,A组于骨缺损处植入利福喷丁微球-rADSCs/HA/β-TCP抗结核骨组织工程复合体,B组于骨缺损处植入利福喷丁微球-rADSCs/同种异体骨抗结核骨组织工程复合体,C组清创后未做任何处理。术后4、8、12周行影像学(DR)检查,术后第12周将实验动物处死,取标本,行大体观察、组织病理学观察骨缺损修复情况。结果大体观察发现A组骨缺损区被新生骨组织取代;B组骨缺损基本修复,周边可见大量骨组织形成;C组骨缺损处有少量骨组织形成,可见大量纤维组织覆盖。X线观察发现:4周时,A组骨缺损区可见少量骨痂形成,材料与周围骨组织紧密接触。B组骨缺损区可见骨痂形成,C组骨缺损区界限清晰,可见片状低密度影。8周时,A组骨缺损区明显缩小,材料吸收,边界稍模糊。B组骨缺损区可见片絮状高密度影,C组骨缺损区可见点状钙化影。12周时,A组骨缺损区材料基本吸收,B组骨缺损材料部分吸收,椎间隙部分融合,C组骨缺损区界线尚清,椎间隙破坏缺损。组织病理学检查发现:术后12周,A组材料吸收明显,可见大量纤维骨痂组织生成骨组织。B组可见部分同种异体骨残留,周边可见大量纤维骨痂组织生成骨组织。C组可见大量纤维组织形成。结论利福喷丁微球-rADSCs/HA/β-TCP构建的抗结核骨组织工程复合体具有良好的生物相容性,能够有效填充兔腰椎结核病灶清除术后的骨缺损。     

聚丙烯人工补片在骨恶性肿瘤关节置换中的应用

目的探讨骨恶性肿瘤关节置换患者术中应用聚丙烯人工补片修复关节囊及软组织的方法及其价值。方法2014年3月至2017年1月,回顾性分析12例接受肩关节及髋关节周围非病理性骨折的骨恶性肿瘤关节置换手术患者,男7例,女5例;年龄5~74岁,平均42岁。肩关节置换4例,髋关节置换8例。骨转移癌7例,骨原发性恶性肿瘤5例。所有患者均行广泛切除+假体置换术,并用聚丙烯人工补片修复关节囊。患者术前、术后的关节功能用美国骨与软组织肿瘤协会(musculoskeletal tumor society,MSTS)功能评价系统进行评估。结果本组患者均获随访,随访时间6~20个月,平均10.5个月。术后平均5d拔除术区引流管,伤口均I期愈合,术后功能恢复良好,均无术后并发症,伤口渗液无明显增多。术前MSTS关节功能评定,良4例,可8例;术后MSTS关节功能评定,良10例,可2例。随访期间,所有患者对诊疗效果满意。结论聚丙烯人工补片对骨恶性肿瘤广泛切除后软组织缺损的修复及关节假体置换后关节的稳定性和动力重建起到了重要的作用,近期疗效满意。     

ISSR-PCR鉴别绞股蓝属7种植物

目的 采用ISSR-PCR技术对绞股蓝属(Gynostemma BI.)绞股蓝G.pentaphyllum、五柱绞股蓝G.pentagynum、心籽绞股蓝G.cardiospermum、长梗绞股蓝G.longipes、喙果绞股蓝G.yixingense、疏花绞股蓝G.laxiflorum、广西绞股蓝G.guangxiense 7种药用植物进行DNA分子水平鉴定.方法 CTAB法提取绞股蓝属植物总DNA,以57条ISSR引物进行PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳分析.结果 筛选出产物清晰稳定的14条引物,其中引物UBC-873与UBC-895具有较高的多态性条带比率,均可独立区分7种绞股蓝属植物.结论 ISSR-PCR分析可有效区分鉴别常见绞股蓝属植物.     

绞股蓝属植物及其混淆品乌蔹莓的PCR-RFLP鉴别研究

目的：寻找简便、可重复的分子标记方法对绞股蓝属Gynostemma植物及其混淆品乌蔹莓Cayratia japonica进行鉴别。方法：对7种常见药用绞股蓝属植物及其混淆品乌蔹莓的6个cpDNA片段进行PCR 扩增，再利用TaqⅠ，HpaⅡ，EcoRⅠ，RsaⅠ，HhaⅠ，HindⅢ等6种限制性内切酶分别对扩增片段进行消化。结果：36种DNA片段/内切酶组合中，trnK1f -trnK2r片段与RsaⅠ组合可将乌蔹莓从绞股蓝属植物中区分出来，产物清晰、结果稳定。结论：PCR-RFLP分析方法可有效区分常见绞股蓝属植物与其混淆品乌蔹莓。     

羊栖菜多糖通过Ca^2＋影响S180荷瘤小鼠红细胞膜功能的研究

目的：从红细胞膜功能角度探讨羊栖菜多糖抗肿瘤作用机制，特别是红细胞内[Ca^2＋]的变化、膜电荷密度和膜电位变化。方法：实验共设6组。体内抑瘤实验和生命延长实验；激光共聚焦测定荷瘤小鼠红细胞内[Ca^2＋]的变化，分光光度法对荷瘤小鼠红细胞脆性的变化和唾液酸含量进行测定，结合高效毛细管电泳法对荷瘤小鼠红细胞电泳淌度的测定结果，探讨荷瘤小鼠红细胞膜表面电荷密度的变化情况；用荧光偏振法测定荧光偏振度值和微粘度研究细胞膜脂的流动性；按Zamudio法进行NADH-细胞色素C氧化还原酶活性的测定，计算荷瘤小鼠红细胞的封闭度；测定荷瘤小鼠红细胞膜Na＋，K＋-ATPase及Ca2＋，Mg2＋-ATPase活性，用流式细胞仪测量荷瘤小鼠红细胞膜膜电位的变化趋势。结果：（1）羊栖菜多糖能够抑制S180荷瘤小鼠的肿瘤生长和延长H22荷瘤小鼠的生存时间；（2）羊栖菜多糖能够降低S180荷瘤小鼠红细胞内[Ca2＋]、红细胞脆性，提高S180荷瘤小鼠红细胞膜流动性和封闭度；（3）羊栖菜多糖能够提高S180荷瘤小鼠红细胞膜表面的唾液酸含量、Na＋，K＋-ATPase及ca2＋，Mg2＋-ATPase活性；（4）羊栖菜多糖能够提高S180荷瘤小鼠红细胞膜膜电位水平和红细胞表面的电泳淌度，即增加表面的电荷密度。结论：羊栖菜多糖能提高荷瘤小鼠红细胞膜功能，增强红细胞免疫功能，通过对体内循环复合物的免疫粘附作用，达到抗肿瘤效果，这可能是羊栖菜多糖抗肿瘤作用机制之一。     

地塞米松衍生物对K562细胞增殖的抑制作用及机制

目的：研究地塞米松衍生物对K562细胞的增殖抑制作用，并对其作用机制进行初步的探讨。方法：以地塞米松为原料合成并纯化得到新的衍生物。用不同浓度的地塞米松衍生物对K562细胞进行处理，通过MTT比色法检测细胞增殖抑制率，电镜法观察细胞凋亡的形态学变化，免疫细胞化学法测定细胞Bcl-2，Fas表达，比色法检测Caspase-3的活性变化。结果：地基米松衍生物能抑制K562细胞的增殖，使Bcl-2表达降低，Fas表达上调，Caspase-3活性增强，诱导K562细胞凋亡。结论：地塞米松衍生物可能通过诱导K562细胞凋亡而抑制细胞增殖。其诱导细胞凋亡的机制可能与抑制Bcl-2蛋白的表达，上调Fas受体，进而激活细胞内的Caspase-3有关。     

弥漫性脑损伤大鼠脑组织细胞间粘附分子-1的表达与神经元损伤

目的观察细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在大鼠弥漫性脑损伤不同时程的表达与脑组织神经元损伤。方法荧光实时定量RT-PCR和免疫组化分别测定ICAM-1mRNA和蛋白在大鼠弥漫性脑损伤不同时程的表达,光镜和电镜观察神经元的变化。结果外伤后6h脑组织中ICAM-1蛋白的表达开始升高(阳性微血管数4.8±0.8),72h达高峰(17.2±2.4),高于假手术对照组(0.4±0.5)(P<0.05)。ICAM-1mRNA表达3h即明显升高(△Ct:13.48±3.93),72h达最高(20.59±0.97),7d(15.60±0.01)仍高于假手术对照组(4.66±1.11)(P<0.01)。光镜及电镜下可见弥漫性神经元变性水肿和坏死,72h损伤最重。结论大鼠脑外伤后ICAM-1表达升高,介导了粒细胞与脑血管内皮黏附增强,ICAM-1可能参与了外伤后炎症反应和神经元损伤的病理过程。     

3-脱克拉定糖-3-酮基-6-O-甲基-10,11-脱氢-12-O-咪唑酰基-2′-苯甲酰基红霉素A的合成

目的合成制备泰利霉素的关键中间体。方法以3-脱克拉定糖-3-酮基-6-O-甲基-2′-苯甲酰基红霉素A为起始原料,经过甲磺酯化、碱消除、咪唑酰基化三步成功地合成关键中间体3-脱克拉定糖-3-酮基-6-O-甲基-10,11-脱氢-12-O-咪酰基-2′-苯甲酰基红霉素A,并进行了工艺改进。结果与结论新的合成工艺与未改进时相比,总收率提高10%,为科研和工业化生产奠定基础。     

外伤后弥漫性脑肿胀致脑疝的围手术期治疗

目的总结与探讨外伤后弥漫性脑肿胀致脑疝的围手术期治疗方法，进一步提高本病的治疗效果。方法回顾分析70例外伤后弥漫性脑损伤致脑疝的围手术期相关治疗和预后。结果根据GOS评估，70例患者中44例预后较好，其中良好37例，中度致残7例；26例预后较差，重度致残6例，植物生存5例，死亡15例。结论对外伤后弥漫性脑肿胀致脑疝患者采用围手术期的综合治疗，提高了治疗效果，是值得推广应用的较好方法。