胶质细胞系源性神经营养因子促进大鼠中脑多巴胺能神经元存活与分化的机制

目的探讨胶质细胞系源性神经营养因子（GDNF）促进中脑多巴胺（DA）能神经元存活和分化过程中,磷脂酰肌醇3激酶（P13K）信号通路和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路的可能作用.方法生后大鼠中脑脑片培养,并依培养基内加入的不同物质分为空白对照组、GDNF组、PI3K通路阻断组、MAPK通路阻断组.培养6 d后,进行酪氨酸羟化酶（TH）免疫组织化学染色,光镜观察,计算机辅助图像分析,统计学处理;同时用Western blotting方法检测脑片中TH的表达.结果GDNF组TH表达阳性神经元的形状更趋向成熟,其TH表达阳性神经元的密度、胞体大小和TH的表达水平均显著高于空白对照组;P13K通路阻断组TH表达阳性神经元几乎消失,其TH表达水平显著低于GDNF组而与空白对照组无显著差别;MAPK通路阻断组TH表达阳性神经元的密度及TH表达水平与GDNF组无显著区别,但TH表达阳性神经元胞体显著小于GDNF组.结论P13K通路参与介导GDNF对DA能神经元的促存活作用,而MAPK通路参与介导其促形态学分化作用.     

帕金森病模型大鼠黑质内神经祖细胞的增殖

目的研究成年大鼠帕金森病（PD）时,黑质内是否存在神经祖细胞,并进一步观察其增殖和分化的情况.方法成年大鼠纹状体内立体定位注射6-羟多巴胺（6-OHDA）,并作行为学分析,筛选PD动物模型.取不同存活时间鼠脑黑质节段,用免疫组织化学染色方法,以抗巢蛋白（Nestin）抗体、抗增殖细胞核抗原（PCNA）抗体、抗Ⅲ型β-微管蛋白（Tuj1）抗体、抗酪氨酸羟化酶（TH）抗体分别显示神经祖细胞、分裂细胞、神经元前体细胞和多巴胺（DA）能神经元.光镜观察并细胞计数,统计学分析.结果PD模型大鼠右侧黑质内可见：1.Nestin反应阳性细胞：注射6-OHDA后第10 d,黑质致密部可见少量Nestin阳性细胞;第14 d时,出现大量Nestin阳性细胞;第17 d时开始减少;第21 d几乎检测不到.2.抗PCNA反应阳性细胞：注射6-OHDA后第7 d即可检测到较弱的PCNA阳性细胞;第14 d出现大量PCNA阳性细胞;至21 d开始减少、减弱;28 d时则检测到少量阳性细胞.3.抗Tuj1反应阳性细胞：注射后第10 d,开始出现少量Tuj1阳性细胞;第14 d出现大量Tuj1阳性细胞;第17 d开始减少,第21 d几乎检测不到.4.抗TH反应阳性神经元：注射6-OHDA后第7 d,黑质致密部抗TH反应阳性神经元数量显著少于对照组,且随注射时间延长而逐渐下降.结论成年大鼠纹状体内注射6-OHDA致黑质多巴胺能神经元变性、死亡,能诱导黑质内神经祖细胞在一段时期内大量增殖并向神经细胞方向分化（不包括多巴胺能神经元）.     

经纹状体注射胶质细胞系源性神经营养因子对帕金森病模型小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的实验研究

目的 研究经纹状体注射胶质细胞系源性神经营养因子（glial cell line-derived neumtrophic factor，GDNF）对帕金森病（Parklnson disease，PD）模型小鼠中脑黑质多巴胺能神经元的保护作用。方法 利用1-甲基-4-苯基1，2，3，6-四氢吡啶（1-methyl-4-phenyl-1，2，3，6-tetrahydropyridine，MPTP）制备成年小鼠PD模型，通过单侧纹状体定位注射GDNF，取中脑黑质节段，做连续冠状石蜡切片，结合免疫组织化学染色方法，观察各组酪氨酸羟化酶（tyrosine hydroxylase，TH）、钙结合蛋白（calbindin D28k，CB）的表达，光镜观察并细胞计数，统计学分析。结果 在模型制备的第4,6天，单侧纹状体定位注射GDNF后，小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量显著多于注射PBS组。结论 经纹状体注射GDNF对成年PD小鼠黑质多巴胺能神经元具有保护作用，且这种保护作用可能与细胞内CB表达增加有关。     

MPTP致帕金森病小鼠黑质钙结合蛋白表达变化及氯化锂对其影响

目的观察氯化锂(LiCl)对1-甲基4-苯基-1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)致帕金森病(PD)小鼠模型钙结合蛋白D28K(CaBP)表达及保护作用的可能机制。方法实验小鼠随机分为正常对照(NS)组、MPTP组、LiCl组,采用腹腔注射MPTP制备模型,免疫组化与蛋白印迹技术观察中脑黑质CaBP表达的变化,以自主活动、滚轴、游泳实验对各组神经行为学评分。结果 MPTP组自主活动、滚轴、游泳评分均低于正常对照组,MPTP组CaBP阳性细胞数比正常对照组少,MPTP组CaBP蛋白表达较对照组表达少(P0.05)。与MPTP组比较,LiC l组各行为学指标明显改善,CaBP阳性细胞数与蛋白表达均升高(P0.05)。结论 LiCl可增加CaBP的表达,减轻细胞内钙超载,是其保护PD损伤的机制之一。     

氯化锂对PD小鼠黑质多巴胺能神经元保护作用的实验研究

目的研究氯化锂(LiCL)对KM小鼠中脑黑质受损伤的多巴胺能神经元的保护作用。方法利用1-甲基4-苯基1,2,3,6四氢吡啶(MPTP)腹腔注射以损伤小鼠中脑黑质多巴胺(DA)能神经元,再将实验动物分实验组,腹腔注射氯化锂;实验对照组,腹腔注射PBS;和空白对照组(MPTP注射后不再注射其他物质)。动物存活一周后,一部分取其中脑黑质节段,固定、包埋做连续冠状石蜡切片,以免疫组织化学染色方法,显示各组酪氨酸羟化酶(TH)和钙结合蛋白(CB)表达阳性细胞,光镜观察并细胞计数,统计学分析;另一部分取其中脑黑质组织匀浆,行TH、CB的Westernblot测量,用Labworks软件分析处理。结果免疫组织化学染色结果显示:实验组小鼠黑质致密部TH与CB阳性神经元数量显著多于实验对照组;Westernblot免疫印迹结果显示:实验组TH、CB蛋白含量表达水平显著多于实验对照组。结论氯化锂对成年PD小鼠黑质多巴胺能神经元具有保护作用,且这种保护作用可能与细胞内CB表达增加有关。     

类风湿关节炎患者IL-17水平的变化

目的探讨稳定期和活动期类风湿关节炎（RA）患者白细胞介素-17（IL-17）水平的变化。方法应用酶联免疫吸附技术（ELSIA）检测40例健康体检者和120例稳定期和活动期RA患者的IL-17水平，同时检测白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血小板计数（PLT）、血沉（ESR）、类风湿因子（RF）、C反应蛋白（CRP）等实验室指标。结果IL-17，PLT，ESR，RF，CRP等指标RA患者组均高于健康对照组（P〈0．05）。RA患者活动期PLT，ESR，RF，CRP，IL-17水平均显著高于稳定期（P〈0．05）。结论IL-17与RA免疫炎症有关，其水平高低可反映痛惜活动变化。     

抗CCP和抗RA33抗体检测在类风湿性关节炎中的应用

目的探讨环瓜氨酸多肽（CCP）抗体和RA33抗体对类风湿性关节炎（RA）的临床应用价值。方法47例RA患者、25例未分化关节炎患者,29例其他自身免疫病患者分别采用ELISA法检测CCP抗体、RA33抗体，速率散射比浊法检测CRP（C反应蛋白）、类风湿因子（RF）、抗链球菌溶血素O（ASO），魏氏法检测红细胞沉降率（ESR）观察各指标对RA的诊断及治疗价值。结果RA患者抗CCP抗体、抗RA33抗体以及RF的敏感性分别为63．8％，dd．7％和93．6％，特异性为93．1％，89．6％和68．9％；两种抗体对未分化关节炎诊断为RA的确诊率为63．6％，55．6％。CRP与ESR有良好的相关性，与ASO一起可作为RA患者病情监控的指标。结论CCP抗体、RA33抗体有助于RA的早期诊断特异性，而各项指标的联合检测有助于对RA早期诊断、治疗、病情预后的估计。     

GDNF激活星形胶质细胞保护PD模型大鼠黑质多巴胺能神经元

探索在胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)保护受损多巴胺(DA)能神经元过程中,星形胶质细胞的可能作用。成年大鼠右侧纹状体内注射6-羟多巴胺(6-OHDA)制备Parkinson病(PD)模型。动物模型右侧黑质内注射GDNF,于注射后第7、14和21d进行动物行为学分析,行黑质节段连续冠状石蜡切片,以抗酪氨酸羟化酶(TH)、胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)抗体免疫组化染色,分别显示DA能神经元和激活的星形胶质细胞,光镜观察并进行细胞计数。用免疫印迹法分析注射后第21d黑质内TH、GFAP蛋白表达量,蛋白条带用图像处理仪扫描,LabWorks软件分析处理。结果显示:动物在注射GDNF后第21d,行为学功能出现显著性恢复;TH阳性神经元数量显著增加;在检测的各时间点均可观察到大量的GFAP阳性细胞;TH、GFAP的蛋白表达量显著高于对照组。以上结果提示,黑质内注射GDNF可能通过激活了的星形胶质细胞保护PD模型大鼠黑质DA能神经元。     

菏泽市某乡镇居民对缺血性卒中危险因素、预警症状知晓情况的调查研究

目的调查菏泽市某乡镇居民对缺血性卒中危险因素、预警症状的知晓情况。方法2018年7—9月,首先采用便利抽样法选取菏泽市东明县三春集镇3个村庄作为调查点,然后采用随机抽样法选取3个村庄共3163例居民作为调查对象。自制基本资料调查表、缺血性卒中认识调查表、缺血性卒中救治方法调查表、缺血性卒中预警症状调查表及缺血性卒中危险因素调查表,所有乡镇居民自行填写调查表。结果(1)本次调查共发放3163份问卷,有效回收率为100%。3163例乡镇居民中共1254例(占39.65%)主要通过医务人员了解或认识缺血性卒中,但知道缺血性卒中后最佳治疗时间窗为3~6 h者仅136例(占4.30%)。(2)3163例乡镇居民中认为缺血性卒中后应拨打120送医院者所占比例最高,为1500例(占47.42%),其次为叫邻居或村医帮忙764例(占24.15%)。(3)3163例乡镇居民对缺血性卒中预警症状知晓率最高的为肢体麻木无力和瘫痪,为1582例(占50.02%),其次为言语不利或听不懂他人讲话1254例(占39.65%)、面部麻木或口角歪斜或口角流涎1118例(占35.35%);3163例乡镇居民对缺血性卒中危险因素知晓率最高的为高血压1200例(占37.94%),其次为吸烟1091例(占34.49%)、高脂血症981例(占31.01%)。3163例乡镇居民知晓2或3个预警症状者较多,为1867例(占59.03%),知晓0或1个预警症状者954例(占30.16%);知晓2或3个危险因素者较多,为2424例(占76.64%),知晓0或1个危险因素者336例(占10.62%)。结论菏泽市某乡镇居民对缺血性卒中预警症状、危险因素的知晓率较低,迫切需要提高该乡镇居民对缺血性卒中的认知水平,以有效降低缺血性卒中发生率并最大限度地改善患者预后。     

原发性小血管炎肺脏受累临床特点分析

目的:探讨原发性小血管炎(PSV)肺脏受累临床特点、实验室检查及治疗与预后情况.方法:回顾性分析26例PSV患者的临床资料,对肺脏受累的特点进行分析.结果:肺脏受累80.8％,有症状者57.7％,咳嗽咳痰84.6％、咯血/痰中带血34.6％、气促53.8％、呼吸困难30.8％;有体征者42.3％,肺部爆裂音19.2％.影像学表现肺纹理多粗乱,肺部阴影,肺间质纤维化.实验室检查血气异常11例(11/13),肺动脉高压4例(4/10),限制性通气功能障碍5例(5/8),支气管镜镜检异常2例(2/3).激素、环磷酰胺联合治疗为主,诱导缓解率80.8％,死亡率26.9％.结论:PSV肺部受累临床表现各异,无明显特异性,以肺浸润、间质纤维化表现突出.早期诊断,及时正确干预是改善预后的关键.