骨髓增生异常综合征患者Th1/Th2细胞平衡改变的临床意义

目的：探讨骨髓增生异常综合征（MDS）患者外周血CD4^＋、CD8^＋细胞亚群平衡的改变，以及与活化T细胞之间关系的临床意义。方法：选择14例难治性贫血患者（RA）和1例难治性贫血伴原始细胞增多患者（RAEB）的外周血，在PMA、Ionomycin、Monensin存在的条件下体外培养，进行细胞膜表面抗原和细胞内因子染色，并用流式细胞仪计数外周血表达CD3^＋ CD8^-IFN-γ^＋细胞（Th1）、CD3^＋CD8^-IL-4^＋细胞（Th2）、CD3^＋CD8^＋IF-γ^＋细胞（Tcl）、CD3^＋CD8^＋IL-4^＋细胞（Tc2）的百分率。结果与活化T细胞之间关系做相关性分析。结果：MDS组患者Th1细胞高于正常对照组（P〈0．05），体内的Th细胞向Th1细胞漂移，产生过多的造血抑制因子如IFN-γ，TNF-β等。Th2，Tc1，Tc2细胞与正常对照组相比无显著差异（P〉0．05）；CD4^＋CD45RO^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈正相关，相关系数为r=0．573（P〈0．05），CD4^＋CIN5RA^＋细胞的百分率和Th1细胞的百分率呈负相关，相关系数为r=-0．509（P=0．05），而和Th2，Tc1，Tc2的百分率无明显的相关性（P〉0．05）。结论：MDS患者存在有Th1／Th2细胞因子网络的失衡以及过多的造血抑制因子，且这些因子主要来源于T淋巴细胞。     

异基因造血干细胞移植患者侵袭性真菌病的诊治进展

侵袭性真菌病（IFD）在异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）受者中并不少见，尽管保护性环境及预防措施在一定程度上减少了移植后感染的发生率，同时新型抗真菌药的不断推出及经验性、抢先性治疗策略等已显著降低了某些严重感染的病死率，但至今IFD仍是关系到移植成败的主要因素之一。了解allo—HSCT后真菌感染的特点，采取早期诊断和选择合适的治疗策略对降低IFD的病死率和提高疗效至关重要。     

X连锁凋亡抑制蛋白在HL-60细胞耐药中的作用

目的 探讨X连锁凋亡抑制蛋白（XIAP）在纤维连接蛋白（Fn）黏附介导的HL-60细胞耐药中的作用。方法 用Fn包被培养板，以牛血清白蛋白（BSA）包被培养板作为对照。通过CCK-8实验检测Fn黏附对柔红霉素（DNR）敏感性的影响，流式细胞仪检测HL-60细胞内DNR浓度的变化，RT-PCR、Western blot检测XIAP、bcl-2、MRP和mdr1基因mRNA和蛋白表达变化。将XIAP反义寡核苷酸通过脂质体法转染Fn黏附培养的HL-60细胞，计算DNR对HL-60细胞的IC50值。结果 HL-60细胞与Fn黏附后，对DNR的敏感性下降，Fn组IC50值为0．526μmol／L，明显高于BSA组（0．132μmol／L）和悬浮培养组（0．123μmol／L）（P〈0．05）；Fn组XIAPmRNA和XIAP蛋白表达水平均较BSA组和悬浮培养组明显上调（P〈0．05）；Fn组细胞内的DNR浓度与BSA组和悬浮培养组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。XIAP反义寡核苷酸可使Fn黏附介导的耐药HL-60细胞XIAP表达明显下调，对DNR的敏感性增加。结论 XIAP可能参与了Fn黏附介导的HL-60细胞耐药，应用XIAP反义寡核苷酸能够逆转Fn黏附介导的HL-60细胞耐药。     

骨髓增生异常综合征del（20q）异常细胞克隆在骨髓细胞系列和凋亡细胞中的分布

为了探讨20号染色体长臂部分缺失[del（20q）]的1例骨髓增生异常综合征（MDS—RAEB-1）患者异常细胞克隆在骨髓各细胞系列和凋亡细胞中的分布，应用单克隆抗体通过流式细胞分选（FACS）del（20q）的MDS患者骨髓CD15^＋、GPA^＋、CD3^＋CD56^-CD16^-、CD19^＋、CD3^-CD56^＋CD16^＋细胞，应用Annexin V—FITC和PI通过FACS分选该患者骨髓Annexin V^＋PI^-（凋亡细胞）和Annexin V^-PI^-细胞（活细胞），然后应用LSID20S108探针和Telvysion^TM 20p探针对分选细胞分别进行间期双色荧光原位杂交（D—FISH）检测。同时选取4例核型正常者作为对照组进行相应检测。结果显示。该MDSRAEB-1患者的骨髓CD15^＋细胞和GPA^＋细胞中MDS克隆百分比分别为70．50％和93．33％，明显高于对照组（5．39％和6．17％）；而在CD3^＋CD56^-1CD16^-1，CD19^＋，CD3^-CD56^＋CD16^＋细胞中分别为3．23％、4．32％、5．77％，低于对照组（5．76％、4．85％、6．36％）。该患者骨髓有核细胞凋亡率为16．09％。MDS细胞克隆在凋亡细胞和活细胞中的比例分别为32．48％和70．11％。结论：MDS患者del（20q）异常克隆主要分布于粒系与红系细胞，以及一小部分凋亡细胞     

53例老年急性髓细胞白血病的疗效观察

目的：分析老年急性髓细胞白血病（AML）的临床特点和不同治疗方案的疗效。材料和方法：年龄≥60岁的老年AML患者53例，原发性AML44例和继发性AML9例，AML分别采用亚常规标准剂量蒽环类药物或高三尖杉酯碱联合阿糖胞苷（Ara-C)或小剂量的高三尖杉酯碱和Ara-C作为诱导方案，结果：发病时以发热和贫血症状最多见，以M5亚型常见，颅内出血是导致老年AML早期死亡的最常见的原因。急性髓细胞白血病（AML）总的完全缓解（CR）率43.4%，亚标准剂量方案治疗AML的CR率明显高于小剂量HA的疗效，但继发性AML患者无1例获CR。结论：对原发性AML老年患者尽可能地采用亚标准剂量的诱导治疗方案。     

减低剂量预处理的异基因造血干细胞移植治疗难治性白血病20例分析

目的 观察减低剂量预处理的异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)对难治性白血病未缓解期的疗效.方法 20例未缓解期难治性白血病患者,采用以氟达拉滨(Flud)联合小到中等剂量的全身照射(TBI)治疗为基础的减低剂量的预处理方案行allo-HSCT.采用环孢素A加霉酚酸酯或短程甲氨蝶呤,或三种药物联合应用预防移植物抗宿主病(GVHD),部分患者还加用了CD52单抗、CD25单抗或抗胸腺细胞球蛋白.结果 17例患者造血细胞成功植入,中性粒细胞＞0.5 × 109 /L的中位时间为13(11～17)d,血小板＞50×109 /L的中位时间为19(11～42)d.外周血T细胞短串联重复序列PCR检测,16例达到完全供者嵌合,中位时间为14(7～42)d.急性GVHD发生率为47.1%(17例中8例),慢性GVHD的发生率为38.5%(13例中5例).移植相关死亡率25.0%(20例中5例),死亡原因主要为植入失败、颅内出血和严重感染.7例血液学复发,目前无病存活9例,Kaplan-Meier法分析全组患者2年总体生存率为(35.3±14.2)%;而其巾急性非淋巴细胞白血病患者2年总体生存率为(52.5±18.6)%.结论 以Flud联合TBI为基础的减低剂量的allo-HSCT预处理方案,耐受性好,移植相关死亡率低,能够用于治疗难治性白血病,并有可能通过降低移植相关死亡率提高总体生存率,急性非淋巴细胞白血病预后优于急性淋巴细胞白血病患者.     

外周血干细胞移植后造血重建的规律及相关因素分析

目的了解外周血干细胞移植(PBSCT)后造血重建的规律及其影响因素。方法对24例自体和18例异体PBSCT患者移植后的血常规和骨髓变化进行动态观察及分析。结果PBSCT后患者造血重建有一定的规律性。外周血白细胞、血小板先后降至最低点,以中位时间计,中性粒细胞(ANC)计数在11d时恢复至>0.5×109/L,血小板计数在17d时恢复至>50×109/L,骨髓第28天恢复至增生活跃。两组移植后造血重建时间的差异无显著性(P>0.05)。67%(28/42例)的患者造血重建恢复迅速,33%(14/42例)有不同程度的造血延迟。在造血重建恢复迅速和延迟的患者中分别有3/28例和10/14例在半年内复发或死亡。多因素逐步回归分析结果表明,患者移植前状况、输入的CD34+细胞数量和病种3个因素对造血重建有显著影响(P<0.05)。结论PBSCT后造血重建的动态观察可以指导临床在不同时期及时给予对症治疗,还可以对植入失败作出早期预测。     

同种异基因造血干细胞移植后基于血细胞嵌合状态的个体化免疫治疗

目的:研究同种异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后血细胞嵌合率变化与复发的关系;观察根据血细胞嵌合率变化给予个体化免疫抑制剂治疗和供者淋巴细胞输注(DLI)的疗效。方法:106例供者细胞顺利植入的allo-HSCT患者,采用聚合酶链反应(PCR)扩增短串联重复序列的方法,动态检测移植后T淋巴细胞、B淋巴细胞、自然杀伤(NK)细胞的嵌合率。根据血细胞嵌合率的变化调整免疫抑制剂剂量和DLI的使用。结果:6例患者在移植后2个月,供者T细胞嵌合状态一直为混合嵌合(MC),将免疫抑制剂减量后均达到完全供者嵌合(FDC)。12例患者在移植后1～5个月,发生供者T细胞嵌合率下降,予免疫抑制剂减量后转为FDC。24例患者血液学复发或髓外复发(进展),有6例在复发前共发生10例次血细胞嵌合率下降,经免疫抑制剂减量或停药后一度回升至FDC,但最终血液学或髓外复发。12例患者在复发或疾病进展后停用免疫抑制剂,共给予DLI23例次,其中8例在DLI前或后给予化疗,最终5例再次达到完全缓解,其余患者最终均因疾病复发死亡。Ⅱ度及Ⅱ度以上急性移植物抗宿主病(GVHD)发生率为28.3%。慢性GVHD发生率为55.7%。中位随访期为17(1.5～90.0)个月,无病生存65例,死亡41例。67例标危患者预期3年生存率为59.0%;39例高危患者预期3年生存率为44.7%。结论:T淋巴细胞、NK细胞和B淋巴细胞的嵌合状态可作为血液恶性肿瘤复发的预测指标;基于血细胞嵌合率的个体化免疫治疗可以推迟甚至避免临床复发,且不增加急性GVHD的发生。     

骨髓增生异常综合征异常克隆起源、分布与疾病进展

 骨髓增生异常综合征（MDS）是一组异质性克隆性疾病,主要特征为骨髓衰竭和发展为急性白血病（AL）。MDS异常克隆起源于多向祖细胞或其以上的干细胞。新近研究发现某些类型的MDS干细胞来源于正常的干细胞。对于不同染色体异常的患者,异常克隆在各细胞系列的分布不同。随着异常克隆比例的增加疾病恶化。MDS异常克隆的研究,对于了解MDS发病机制,进行临床诊断、治疗和判断预后有很大的帮助。     

单纯性肥胖患者氧化应激与内皮依赖性血管舒张功能的关系

目的研究单纯肥胖患者血清氧化物和抗氧化物水平与内皮依赖性血管舒张功能（EDV）的关系，探讨氧化应激在肥胖患者大血管病变发病机制中的作用。方法采用正常血糖高胰岛素钳夹试验评价受试者外周组织对胰岛素的敏感性，多普勒超声评价EDV，并测定血活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、谷胱甘肽（GSH）及血游离脂肪酸（FFA）水平。结果肥胖组血ROS、MDA、FFA水平较对照组明显增高，GSH-PX、GSH下降，外周组织葡萄糖利用率明显降低，EDV受损；肥胖患者血清ROS、MDA、FFA水平与EDV显著负相关，GSH-PX、GSH水平与EDV显著正相关。结论不伴有传统心血管危险因素的肥胖患者血清中氧化物水平升高，抗氧化物水平下降，EDV受损，提示血FFA水平升高所导致的氧化应激可能参与肥胖患者大血管病变的发生发展。