Preliminary Study on Biological Properties of Adult Human Bone Marrow-derived Mesenchymal Stem Cells

目的本研究拟建立成人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)体外培养和扩增的方法,探讨其生物学特性,为进一步将其应用于临床奠定理论和实验基础。方法取正常成人骨髓液5 mL,用Percoll分离液(密度1．073g/mL)经密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以2×108个细胞／cm2的密度接种于含10％新生牛血清的LG-DMEM培养液。经培养、扩增后,进行倒置相差显微镜观察其形态,MTT法测定生长曲线,流式细胞仪行细胞表面抗原及细胞周期的检测,并在透射电镜下观察其超微结构。MtT法观察MSCs的免疫调节功能,观察MSCs对K562细胞生长的影响。检测MSCs培养上清中HA、IV-C、LN浓度的动态变化。结果培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一,为梭形或纺锤形的成纤维细胞样外观,生长曲线示其增殖能力强。流式细胞仪检测显示有90％以上的细胞处于G0／G1期,表面标记物中CD4表达阳性,而造血细胞表面标志CD3、CD4、CD7、CD13、CD14、CD15、CD19、CD22、CD33、CD34、CD45和与移植排斥发生密切相关的HLA-DR表达阴性。超微结构显示细胞内有丰富的细胞器。成人骨髓MSCs抑制PHA诱导的异体淋巴细胞增殖转化,其增殖转化抑制率为60．68％(P<0．01)。抑制作用同样存在于培养上清中,其增殖转化抑制率为9．00％(P<0．05)。在有PHA刺激淋巴细胞增殖的情况下,培养上清中增殖转化抑制率达20．91％(P<0．01)。和单独的K562细胞生长曲线相比,与骨髓MSCs共孵育的K562细胞生长缓慢,无明显的指数生长期。由浓度变化曲线图可以看出,随着天数的延长,HA升高较迅速,而IV-C、LN则浓度变化不大。结论所建立的分离和培养方法可获取骨髓粘附细胞中一组独特的细胞群,具有MSCs的生物学特性。初步的生物学特性研究显示其具有免疫调节、抗肿瘤、造血支持等作用,可作为组织工程中的种子细胞。     

恶性血液病患者血清和骨髓透明质酸测定及其临床意义

应用放免法测定43例恶性血液病、37例良性血液病和23例健康人血清、骨髓液HA。结果表明：恶性血液病患者血清和骨髓液HA显著高于良性血液病（P＜0.01）及健康人（P＜0．01）。骨髓液HA分别是血清的2～2．5倍。若以血清HA＞185μg／L为标准，则血清HA对恶性血液病诊断的敏感性为81．6％。血清和骨髓液HA在急性白血病完全缓解时下降，复发时又升高。观察血清和骨髓液HA变化，对鉴别良、恶性血液病、判断急性白血病病情及估计预后有一定意义。     

鼻内窥镜在胸腔疾病检查及治疗中的应用

鼻内窥镜在胸腔疾病检查及治疗中的应用何冰★王景昌★罗莉★刘四海★关键词内窥镜胸腔疾病应用中国图书资料分类法分类号Ｒ４４３．８目前，胸腔镜仍是胸腔、胸膜疾病诊断及治疗的重要器械，但胸腔镜价格昂贵，基层单位购置困难。我们于１９９４年至１９９６年将鼻窦内窥...     

骨髓间充质干细胞及其在心血管疾病中的应用

骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells ,MSCs)是一群存在于骨髓中的非造血细胞,在体外不同的诱导条件下可分化为骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌腱、肌肉细胞、神经细胞等多种细胞[1],具有广泛的临床应用前景,故引起了人们对MSCs广泛而深入的研究.本文就MSCs的生物学特性及其在心血管疾病中的应用作一简要综述.     

成人骨髓间充质干细胞体外培养扩增的初步研究

目的:建立成人骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)体外培养和扩增的方法,探讨其生物学特性,建立稳定的MSCs体外培养扩增体系。方法:取正常成人骨髓,用含10%新生牛血清的LG-DMEM培养液培养、扩增后,进行倒置显微镜观察,测定生长曲线,流式细胞仪行细胞表面抗原检测。结果:培养扩增获取的成人骨髓MSCs形态均一,增殖能力强。所获得细胞CD44表达阳性,CD19、CD15、CD45、CD34、CD38、CD4、CD8表达阴性。结论:所建立的分离和培养方法可获取骨髓黏附细胞中一组独特的细胞群,具有MSCs的生物学特性。     

外周血造血干细胞移植治疗恶性血液病21例报告

目的：观察外周血造血干细胞移植（PBHSCT）治疗恶性血液病的疗效和并发症。方法：21例恶性血液病中8例行自体PBHSCT（auto-PBHSCT）,13例行异基因PBHSCT（allo-PBHSCT）。结果：21例全部获得造血重建,随访7～42月,10例（47.6%）存活,其中：auto-PBHSCT 5例,allo-PBHSCT5例。11例（52.4%）死亡,其中：auto-PBHSCT：3例复发死亡;allo-PBHSCT：5例复发死亡,2例移植相关死亡,1例死于第二肿瘤。结论：PBHSCT是治疗恶性血液病的有效方法,但如何有效减少复发、提高长期无病生存率需要进一步研究。     

131I治疗甲亢合并周期性麻痹疗效初步分析

评价131I治疗甲亢合并周期性麻痹(TPP)的疗效,对8例TPP患者用131I治疗,测定治疗前后血清指标.结果表明:血清钾降低,TT3、TT4、FT3、FT4均升高,131I治疗见效快,疗程短,治愈率高,治疗后6个月治愈率75%(6/8),12个月后治愈率100%(8/8),是TPP治疗的首选.     

造血干细胞移植后淋巴增殖性疾病2例

异基冈造血干细胞移植（allo-HSCT）后少数患者可继发淋巴增殖性疾病（PTLD）,淋巴细胞多为多克隆性增生,单克隆性增生患者极少见.现报道2例.例1,男,40岁.因急性淋巴细胞白血病（ALL）allo-HSCT后2年,外周血淋巴细胞进行增高1年余于2008-09-12入院.患者2006-07诊为ALL.经VDCP方案化疗后达CR,巩固、强化治疗后,于2006-11行allo-HSCT治疗.供者为患者胞兄,供受者间HLA6位点完全相合.预处理方案：CY＋TBI＋Arc-C;GVHD预防：ATG＋CSA＋MTX.＋15d中性粒细胞＞0.5×109/L,血小板＞20×109/L.2007-04患者因咳嗽、发热再次入院.胸部CT示两肺间质性炎症.     

造血干细胞移植术后淋巴细胞增殖性疾病1例

患者,男,36岁。因发现两侧颈部、颌下淋巴结肿大2月于2005—06—13入院。查体：轻度贫血貌,颈两侧和腹股沟可触及数个蚕豆大小的淋巴结,胸骨压痛（＋）,脾大,肋缘下6cm,触痛（＋）。WBC 224．2×10^9／L,HB81g／L,PLT211．2×10^9／L。骨髓细胞学检查：慢性粒细胞性白血病（CML）慢性期骨髓象;染色体检测：Ph^＋率92％。予羟基脲、小剂量高三尖彬酯碱治疗,2005—07—29骨髓缓解。8月初患者出现发热并游走性骨关节痛,WBC23．1×10^9／L,     

有机磷农药中毒并发低渗血症14例分析

我院自1986年以来，共收治有机磷农药中毒（OIP）139例，其中14例在救治过程中共发低渗血症，分析如下。1临床资料1．1一般情况本组14例，占同湖OIP10％。其中男3例，女11例；年龄15～65岁，平均27岁。均经口服中毒。农药种类：敌敌畏6例，乐果4例，敌百虫2例，对硫磷和甲胺磷各1例。中毒程度：中度6例，重度8例。临床表现缺乏特异性，易与中毒症状混淆，本级有7例出现意识由昏迷～清醒十昏迷，5例发生血红蛋R尿．并发肺水肿和呼吸衰竭各3例。1·2诊断根据临床表现只能帮助诊断，确诊需检测血浆渗透压。根据Grant－Kubo公式’‘川算：血…