中国乙肝病毒B基因亚型的分布

目的调查乙肝病毒B基因亚型在我国的分布情况。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法并结合测序法,对来自全国7个中心的共511份B基因型感染血清样本进行了检测。结果511份B基因型样本经亚型分析,确定全部为Ba亚型,未发现Bj亚型的存在。结论流行于我国南方及北方地区的乙肝病毒B基因型毒株绝大部分为Ba亚型,Bj亚型非常罕见。     

BSA和胶原的竞争性吸附与细胞粘附

细胞在材料表面的粘附是贴壁依赖型细胞生长的前提,细胞只有在表面以一定的粘附力发生粘附并铺展后,细胞列哨B生长。当细胞与表面的粘附力较强时,有利于细胞生长,而当粘附力较弱时,则有利于细胞分化。现在普遍认为细胞粘附过程由细胞表面的受体对细胞外基质（ECM）蛋白的特异性识别所调节。胶原等细胞外基质影响细胞的形态和功能,并提供细胞分化和增殖的信号。而培养介质是复杂的溶液,它们中许多有血清或添加的蛋白和表面活性物质。因而细胞在材料表面的粘附受蛋白质竞争性吸附所调节,包括基底预处理、培养基以及细胞分泌等许多不…     

乙肝病毒基因型及病毒变异对慢性肝病进展的影响

目的进一步研究HBV基因型及病毒变异与慢性肝病进展的关系。方法用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）以及部分PCR产物测序的方法对401例慢性HBV感染者，包括112例HCC患者（HCC组）。129例无症状携带者（ASC组），70例肝硬化患者（LC组）和90例慢性肝炎患者（CH组）进行HBV基因分型以及BCP和PC变异检测。结果401例慢性HBV感染者中181例发生B基因型感染，220例发生C型感染。HCC组中C型分布高于其他3个疾病组；C基因型感染者BCP变异多于B基因型；B基因型感染者PC变异多于C基因型：同时BCP变异发生率随着病程进展而递增：在ASC组、CH组、LC组和HCC组里的BCP变异阳性率分别为22．4％、35．0％、50．0％、74．1％。C1与C2亚型相比，C1有较高BCP变异阳性率，而C2有较高PC变异发生率。结论BCP变异与肝病进程存在依从关系，因此BCP变异的检测对慢性HBV感染的疾病进展和临床结局的评估有重要意义。     

泛昔洛韦和胸腺肽联合治疗过程中乙肝病毒聚合酶基因突变谱 …

目的 探讨泛昔洛韦治疗过程中乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）耐药性的产生与多聚酶基因变异的可能关系。方法 慢性ＨＢＶ无症状携带者２９例，接受泛昔洛韦和胸腺肽联合治疗，１５例单用胸腺肽治疗。所有患者治疗时间为半年，随访半年，收集每位患者治疗前、治疗中和治疗后半年系列血清标本，进行血生化、ＨＢＶ ＤＮＡ定量和ＨＢＶ标志物等常规检测，同时应用ＰＣＲ的方法扩增ＨＢＶ聚合酶基因Ｂ区和Ｃ区序列，ＰＣＲ产物直接测序或克隆     

肾癌肿瘤相关抗原G250/MN/CAIX基因的克隆、表达及鉴定

目的 报道G250／MN／CA Ⅸ基因的克隆，蛋白表达及鉴定。方法 从肾癌组织中提取总RNA，采用RT—PCR法扩增G250／MN／CA Ⅸ全长cDNA，将获得的cDNA片段插入pET22b（＋）表达载体，转化BL-21大肠杆菌中，以IPTG诱导进行蛋白表达，SDS—PAGE凝胶电泳观察结果，实验验证。结果 克隆的G250／MN／CA Ⅸ基因经测序证实序列正确，构建重组质粒pET22b（＋）／G250并在原核系统中表达G250／MN／CA Ⅸ重组蛋白，该蛋白具有较好的抗原性和特异性。结论 成功完成G250基因克隆，为在G250蛋白纯化基础上进行抗体制备和G250功能研究提供了实验依据。     

椭偏光蛋白芯片定量检测免疫球蛋白抗体

本实验利用椭偏光蛋白芯片检测系统，在光学硅片上装配人类免疫球蛋白G作为感应层，利用能与其抗体特异性结合的特性，对样品中人类免疫球蛋白G抗体进行定量检测，证实利用该系统具有对蛋白质进行定量检测的能力，探索该系统在临床检验方面应用的可行性。     

HBV信号肽区热点变异真核表达载体的构建及对HBeAg表达的影响

采用分子生物学方法,设计引入KpnⅠ和HindⅢ酶切位点的引物扩增HBV的Pre－C／C片段（1814－2452）,经酶切后连于EBO真核表达载体,利用定点突变技术分别对连接载体进行了T1862,A1896,A189,A1896＋A1899点的定点诱变。经错配PCR－RFLP和测序, 克隆。将突变前后的质粒以脂质体转染法转染HepG2细胞,检测不同点突变后HBeAg表达的改变,突变前后质粒转染HepG2细胞经稳定表达,结果未突变的EBO－PreC/C重组质粒HBeAg表达为强阳性,A1899突变的重组质粒HBeAg表达比未突变的重组质粒稍弱,而转染EBO空载体和T1862,A1896,A1986＋A1899重组质粒突变体的细胞培养上清HBeAg均为阴性,上述体的构建将为体外研究前C信号肽区热点变异对HBeAg在细胞中表达及对肝炎病毒基因组复制的影响奠定基础。     

乙型肝炎病毒基因型S基因PCR-RFLP分型方法的建立

目的 建立乙型肝炎病毒（HBV）S基因聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的基因型分型方法并验证其准确性。方法 比较GenBank中HBV223株各基因型全序列的S基因氨基酸及核苷酸序列,设计限制性内切酶BsrⅠ、StyⅠ、DpnⅠ和HpaⅡ鉴别HBVA-F基因型的方法,选择经前SPCR-PFLP的方法已鉴定出的HBVB、C和D基因型标本各30例,用此方法鉴定验证,并随机对HBVB、C和D基因型各3株标本进行S基因测序证实。结果 两种PCR-RFLP及S基因测序鉴定HBV基因型结果一致。结论 S基因PCR-RFLP的方法能够准确鉴定HBV基因型,此方法灵敏性高,特异性强,且酶切图谱简明单一,易于识别,适宜于HBＶ基因型的流行病学调查。     

乙型肝炎病毒基因型及e抗原状态对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)不同基因型及乙型肝炎e抗原(HBeAg)对聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎(CHB)应答率的影响。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP) 方法,分析42例用聚乙二醇干扰素治疗的CHB患者基因型及HBeAg不同状态时对抗病毒治疗的影响。结果不同基因型对聚乙二醇干扰素的应笞率不同,B基因型的持续应答率为66.7%(12/18),C基因型持续应答率为27.3%(3/11)。HBeAg阴性患者的持续应答率为87.5%(7/8),HBeAg阳性患者为38.1%(8/21), P<0.05。结论HBV基因型及HBeAg的不同状态是预测聚乙二醇干扰素疗效的重要因素,且后者比前者的意义更大。     

静脉血与末梢血常规生化检测结果的比较分析

目的：探讨CelercareM1分析仪检测静脉血与末梢血常规生化项目的结果可比性。方法取受试者的静脉血与末梢血在CelercareM1分析仪上平行测定Mg2＋、Cl－、tCO2、K＋、Na＋、Ca2＋、α‐HBDH、LDH、AST、CK、CK‐MB、TP、ALB、TBIL、ALT、GGT、ALP、UREA、GLU、UA、CHOL、HDL‐C等项目,并对结果进行比较。结果静脉血tCO2检测结果高于末梢血,差异有统计学意义（P＜0．05）。末梢血的α‐HBDH、LDH、CK、CK‐MB检测结果均高于静脉血,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论除了电解质和α‐HBDH、LDH、CK以及CK‐MB项目外,末梢血可以替代静脉血在CelercareM1分析仪上进行常规生化项目的检测。