利用CRISPR / Cas9 技术构建Fbxw7 敲低的Raw264-7 稳定细胞株及其生理功能检测

目的:应用CRISPR/Cas9技术构建Fbxw7表达抑制的Raw264.7稳定巨噬细胞株,并检测其生理功能。方法:转染Fbxw7_Cas9KO质粒到Raw264.7细胞,用含嘌呤霉素的培养基培养,挑取单克隆并筛选带荧光标记的细胞进一步培养;然后采用qRT-PCR和Western blot分别检测Fbxw7基因与蛋白表达水平;Confocal进一步检测Fbxw7蛋白表达分布;测序分析基因突变情况;CCK-8和流式细胞术分别检测Fbxw7基因敲低后Raw264.7细胞增殖能力与凋亡率。结果:Fbxw7敲低组的mRNA和蛋白表达水平较正常Raw264.7细胞显著降低,Confocal观察发现敲低组Raw264.7细胞中Fbxw7蛋白表达微弱;测序结果显示Fbxw7敲低组存在多位点突变;Fbxw7敲低后Raw264.7细胞增殖能力明显降低,凋亡率增加。结论:利用CRISPR/Cas9技术可以实现Fbxw7基因在Raw264.7细胞稳定低表达,所筛选出的稳定细胞株可用于后续细胞水平的实验研究。     

“三位一体”程序化模式治疗稳定胸腰段脊柱爆裂骨折的疗效分析

目的比较"三位一体"程序化模式与单纯腰椎后路椎弓根钉撑开内固定术治疗稳定胸腰段脊柱爆裂骨折的临床疗效。方法回顾性分析自2015-06—2018-06诊治的58例稳定胸腰段爆裂骨折,30例采用"三位一体"程序化模式治疗(观察组),28例单纯采用腰椎后路椎弓根钉撑开内固定术治疗(对照组),比较2组术后3周、术后6个月、术后15个月ODI指数、椎体前缘高度比值、伤椎Cobb角、椎管占位率,比较2组术后并发症情况以及末次随访时的疗效。结果 58例均顺利完成手术并获得至少15个月的随访。观察组并发症情况明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组术后6个月以及术后15个月ODI指数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),2组术后3周ODI指数比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组术后3周、术后6个月、术后15个月椎体前缘高度比值大于对照组,伤椎Cobb角与椎管占位率小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。末次随访时观察疗效优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 "三位一体"程序化模式治疗稳定胸腰段爆裂骨折在恢复伤椎高度,改善胸腰椎后凸畸形、改善腰椎功能活动方面优于单纯采用腰椎后路椎弓根钉撑开内固定术治疗。     

胸腰段脊柱脊髓损伤前路手术治疗

目的探讨胸腰段脊柱脊髓损伤前路手术适应证、手术时机。方法回顾性分析74例胸腰段脊柱脊髓损伤前路手术患者。随访时间7个月～11年6个月，平均4年2个月。结果完全性神经损伤患者随访时下肢运动评分平均提高0．86分，6例(27．2％)患者大小便功能好转；不完全性神经损伤患者随访时下肢运动评分平均提高13．00分，31例(59．6％)患者大小便功能好转，8例(15．4％)患者大小便功能恢复正常。52例不完全性神经损伤患者分为3组：Ⅰ组≤15d、15d＜Ⅱ组＜3个月、Ⅲ组＞3个月。Ⅰ、Ⅱ组患者大小便功能改善明显好于Ⅲ组；Ⅰ、Ⅱ组患者术后改善的ASIA评分明显好于Ⅲ组。结论正确选择适应证，胸腰椎骨折前路手术有较好的疗效。早期减压及早期康复，有助于下肢运动及大小便功能改善。     

360°植骨治疗胸腰椎爆裂型骨折

胸腰椎爆裂型骨折常发生终板骨折，椎间盘突入椎体内，椎体内骨小梁结构被挤压破坏，后路手术恢复椎体高度时，骨小梁系统不能同时恢复，产生椎体内空隙，即“蛋壳样”椎体。这种椎体其实已丧失了结构的完整性，不具有负重能力，常导致后期内固定物松动和矫正度丢失。本院2000年1月~2007年10月采用经椎弓根椎体前路植骨联合后外侧植骨（360°植骨）治疗胸腰椎爆裂型骨折，现总结如下。     

陈旧性胸腰段脊柱脊髓损伤前路手术治疗探讨

目的了解陈旧性胸腰段脊柱脊髓损伤前路手术疗效。方法对37例陈旧性胸腰段脊柱脊髓损伤患者经前路手术治疗的疗效进行回顾性分析。术后平均随访48．1个月。结果完全性神经损伤患者术后无明显感觉、肌力及膀胱功能恢复；不完全性神经损伤患者62．1％肌力改善，65．5％感觉改善，69．0％膀胱功能改善，92．1％植骨融合。单纯前路减压植骨难以矫正术后后凸畸形。结论陈旧性胸腰椎骨折不完全性脊髓损伤存在椎管内压迫的患者经前路减压术后仍可有神经功能恢复，ASLA运动评分可更好地评价神经损伤后神经功能改变；提高植骨质量及重建后柱功能有利于脊柱稳定；单纯前路植骨难以矫正陈旧性后凸畸形。     

基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用

目的探讨基因芯片技术在分枝杆菌菌种鉴定和耐药性分析中的应用价值。方法收集2014年1月—2016年12月宜昌市第三人民医院抗酸染色镜检阳性的肺结核患者痰样本680例,同时采用基因芯片法和培养法进行菌种鉴定,对被鉴定为结核分枝杆菌(MTB)复合群的样本分别再采用以上2种方法检测MTB对利福平和异烟肼的耐药性。以培养法作为参考方法,评价基因芯片法菌种鉴定的符合率。以药物敏感性试验结果为金标准,计算基因芯片法MTB耐药检测的敏感性、特异性和符合率,并比较其与金标准的一致性。结果基因芯片法检出31例非结核分枝杆菌(NTM),培养法检出32例NTM,符合率为96.88%。与药物敏感性试验相比,基因芯片法检测MTB对利福平耐药性的敏感性为89.81%,特异性为93.55%,符合率为92.80%,Kappa值为0.82,P0.05;检测MTB对异烟肼耐药性的敏感性为83.06%,特异性为91.39%,符合率为89.48%,Kappa值为0.73,P0.05。结论基因芯片法能够准确地筛选出NTM,在结核病诊断和耐药监测中敏感性和特异性较高,与传统培养法及药物敏感性试验有很好的一致性,且更高效、快捷、安全,具有较大的应用价值。     

改良跗骨窦切口解剖型锁定钢板内固定治疗Sanders Ⅲ-Ⅳ型跟骨骨折

目的:探讨改良跗骨窦切口解剖型锁定钢板内固定治疗SandersⅢ-Ⅳ型跟骨骨折临床疗效。方法:2015年2月至2016年10月采用改良跗骨窦切口解剖型锁定钢板内固定治疗SandersⅢ-Ⅳ型跟骨骨折35例,其中男22例,女13例;年龄22～68(42.3±12.7)岁;根据Sanders分型,Ⅲ型23例,Ⅳ型12例。观察术后并发症情况,比较手术前后跟骨B?hler角、Gissane角改变情况,并于术后12个月时采用Maryland足功能评分标准评价患足功能恢复情况。结果:35例患者获得随访,时间12～20(14.5±2.0)个月。切口长度4.0～5.5(4.7±0.4)cm。1例切口浅表感染,2例切口延迟愈合,腓肠神经损伤1例,随访无钢板外露、松动,无骨折复位丢失并发症。切口愈合时间14～28(15.4±4.7)d,骨折愈合时间8～14(9.8±1.9)周。B?hler角由术前的(9.81±14.28)°恢复至术后3 d的(26.35±11.04)°、术后12个月的(25.96±10.79)°,差异有统计学意义(P0.05)。Gissane角由术前的(122.54±16.79)°恢复至术后3 d的(120.85±11.88)°、术后12个月的(120.62±11.44)°,差异有统计学意义。Maryland评分由术前的12.66±4.10提高至术后12个月的92.20±7.82,其中优32例,良2例,可1例。结论 :改良跗骨窦切口解剖型锁定钢板内固定治疗SandersⅢ-Ⅳ型跟骨骨折,切口小,软组织损伤程度低,并可获得良好的骨折复位与固定,是SandersⅢ-Ⅳ型跟骨骨折有效的微创治疗方法。     

2003年《中国实用内科杂志》读者问卷调查统计分析

为坚持办刊宗旨 ,《中国实用内科杂志》编委会、编辑部于 2 0 0 3- 0 6进行了问卷活动。现对回收的《读者问卷调查表》(以下简称问卷 )反馈信息进行统计分析并报道如下。1　统计材料及分析问卷包括调查对象个人资料、订阅期刊情况、杂志内容评价、电子期刊预测、印刷质量和其它     

肝豆状核变性三次误诊肾炎一例

肝豆状核变性(HLD)临床表现多样,常易误诊。现将我院收治一例 HLD 患儿三次误诊肾炎报告如下。病儿男,12岁,因血尿5天,全身浮肿伴尿少1天,诊断急性肾炎伴肾功衰竭入院。检查:面部及四肢浮肿,心肺叩听正常,轻度腹水。尿镜检红细胞++,管型查见。血尿素氮32. 2mmol/L,肌酐442μmol/L。入院后经对症治疗,住院2月浮肿消退,肾、功、尿常规恢复正常出院。出院后7天,又     

急诊科为主导的多学科协作成功抢救爆炸伤致股动静脉破裂1例

<正>爆炸伤因致伤机制复杂多变,若不能及时诊断治疗,常危及患者生命,而延误诊疗常造成生还者截肢率显著提高,因此,早期诊断和治疗对拯救患者生命、降低残疾率极其重要。本文报告1例以急诊科为主导的多学科协作(multi-disciplinary team,MDT),在腹主动脉球囊阻断术保驾护航下成功抢救爆炸伤致股动静脉破裂致失血性休克的患者,以期提高MDT、腹主动脉球囊阻断术在股动脉损伤救治中作用的认识,引起广大医务人员对爆炸伤的重视,为爆炸伤致股动脉损伤救治提供参考。