急性白血病骨髓基质细胞对HL-60细胞增殖、分化的影响

目的 为探讨急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的影响。方法 骨髓基质与白血病细胞共培养，采用MTT检测基质对白血病细胞的粘附，流式细胞仪检测粘附的HL-60细胞周期，非特异性酯酶及过氧化物酶染色观察白血病细胞分化及绘制白血病细胞生长曲线。结果 白血病骨髓基质对HL-60细胞的粘附率及粘附的白血病细胞处于G0／G1期比例均明显高于正常骨髓基质；正常骨髓基质对HL-60细胞的生长抑制作用及诱导分化作用均明显强于白血病基质。结论 急性白血病骨髓基质对HL-60细胞的增殖、分化作用均存在异常。     

自体外周血干细胞支持下CEAC方案治疗非霍杰金淋巴瘤的临床研究

目的　观察CEAC预处理方案的自体外周血干细胞移植治疗非霍杰金淋巴瘤病人的临床疗效。方法　对 1 0例中、高度恶性非霍杰金淋巴瘤病人进行自体外周血干细胞移植 (APBSCT) ,其中 5例 (5 0 % )病人为Ⅳ期 ,2例病人诊断为中线T细胞淋巴瘤 ,1 0例病人从确诊到移植的中位时间是 4 .5个月 ,以CEAC为预处理方案 :CCNU 0 .2m2 × 1d,Cy 1 .5g/m2 × 4d ,Vp 1 61 0 0mg/m2 × 4d ,Acr C 1 0 0mg/m2 1 2q× 4d。结果　预处理中 1 0例病人均出现Ⅰ～Ⅲ度的消化道反应 ,1例出现Ⅰ度心脏毒性 ,出现Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度肝功能损害各 1例 ,1 0例病人均有Ⅲ度脱发。所有患者移植后造血功能均快速重建 :中性粒细胞计数≥ 0 .5× 1 0 9/L中位时间 1 1 .5d ,血小板计数≥ 2 0× 1 0 9/L的中位时间 1 3d。中位随访时间 1 0 .5个月 (8～ 2 3个月 ) ,8例患者无病存活 ,2例死于疾病复发。结论　CEAC预处理方案的自体外周血干细胞移植治疗非霍杰金氏淋巴瘤病人的耐受性较好 ,毒副作用较轻 ,造血重建快 ,目前短期随访治疗效果较好     

胰、肾联合移植后并发纯红细胞再生障碍性贫血一例

我院于 1998年 12月成功地为 1例胰岛素依赖型糖尿病合并尿毒症患者施行了胰、肾联合移植术 ,但患者术后发生纯红细胞再生障碍性贫血 (ＰＲＣＡ) ,后治愈。现将病例报告如下。一、临床资料患者为女性 ,49岁。因口渴、多饮18年 ,恶心、乏力 2年 ,腹膜透析 1年余 ,于 1998年 11月 10日入我院。查尿糖 ,尿蛋白 ;血糖 12 .9ｍｍｏｌ/Ｌ ,血红蛋白 (Ｈｂ) 5 4ｇ/Ｌ ,血尿素氮 (ＢＵＮ ) 33.6 7ｍｍｏｌ/Ｌ ,血肌酐 (Ｃｒ)949.3μｍｏｌ/Ｌ ,诊断为胰岛素依赖型糖尿病、糖尿病性肾病、尿毒症。于 1998年 12月 15日在持续硬膜外麻醉 …     

促血小板生成素途径在人脐血源基质细胞促进巨核细胞增殖中的作用

目的探讨促血小板生成素(TPO)途径在人脐血源基质细胞(hUCBDSCs)促进巨核细胞增殖中的作用。方法以巨核细胞系(HEL细胞)作为研究对象,实验分HEL/hUCBDSCs组、HEL/人骨髓基质细胞(hBMSCs)组和HEL悬浮培养组。ELISA法检测hUCBDSCs和hBMSCs培养上清中TPO水平,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪检测HEL细胞c-Mpl蛋白表达,RT-PCR检测c-Mpl mRNA表达。结果hUCBDSCs高分泌表达TPO,其分泌高峰在培养第8天,稍迟于hBMSCs;与hUCBDSCs共培养的HEL细胞经流式细胞仪和激光共聚焦检测,均显示其c-Mpl蛋白的表达明显增强(P<0.05),但RT-PCR检测结果显示不同培养条件下HEL细胞c-MplmRNA表达无显著性差异(P>0.05)。结论TPO途径可能是hUCBDSCs促进巨核细胞增殖的重要中间环节,部分机制可能是在翻译或翻译后修饰水平,通过上调TPO受体c-Mpl的表达来实现的。     

自体外周血造血干细胞移植治疗恶性淋巴瘤

目的 :报告 7例恶性淋巴瘤在自体外周血造血干细胞移植 (APBSCT)支持下接受超大剂量放、化疗的治疗经验 ,评价所用外周血造血干细胞 (PBSC)动员方案的动员效果 ,预处理方案的疗效和耐受性 ,以及移植后造血重建情况。方法 :7例淋巴瘤患者中 ,1例霍奇金病 ,6例非霍奇金淋巴瘤。动员方案为MOEP/CMOP化疗联合rhG -CSF ,预处理采用经典的超大剂量环磷酰胺 (CTX)化疗联合全身放疗 (TBI)。结果 :APBSCT动员后获得到单个核细胞 4.2 (2 .7～ 6 .1)× 10 8/kg,回输单个核细胞 3.7(2 .5～ 5 .3)× 10 8/kg ,中性粒细胞计数恢复到 >0 .5× 10 9/L的时间和血小板 >5 0× 10 9/L的时间分别平均为第 11.6天和第 14.6天。毒副作用主要为消化道反应。结论 :APBSCT治疗恶性淋巴瘤效果肯定 ,采用MOEP/CMOP联合rhG -CSF动员以及经典CTX加TBI方案预处理 ,安全可靠 ,治疗效果良好。     

自体外周血造血干细胞移植术后并发毛细胆管炎性病毒性肝炎1例

近期 ,我科 1例非霍奇金淋巴瘤患者行自体外周血造血干细胞移植术后并发毛细胆管性病毒性肝炎。国内鲜见报道此种病例。现将其报告如下。患者 ,女 ,年龄 48岁。因“确诊非霍奇金淋巴瘤 5个月 ,拟行自体外周血造血干细胞移植”于2 0 0 1年 5月 2 1日再次入院。患者于 2 0 0 0年 7月无明显诱因发现左侧腹股沟有一蚕豆大小肿块 ,无压痛、红肿 ,与皮肤无粘连 ,未予重视。之后包块逐渐长大。至 2 0 0 1年 1月 ,患者又出现潮热、盗汗、纳差 ,头昏、乏力、活动后心悸 ,并伴有咳嗽、咯痰 ,抗感染治疗后 ,上述症状无缓解。 2月 2 1日在我院行腹股沟淋…     

人脐血源基质细胞分离培养条件的优化

目的探索人脐血源基质细胞(hUCBOSCs)的分离扩增条件,并观察其生物学特性。方法取产科胎儿脐带血,比较不同的分离方法、首次换液时间及培养体系对人脐血源基质细胞原代培养的影响。倒置显微镜动态观察细胞生长情况,瑞氏染色观察细胞形态特征,并采用细胞化学和免疫细胞化学方法对获得的细胞进行鉴定。结果明胶沉淀法优于其他分离方法,首次换液时间为第4天、改良Dexter培养体系培养效果最好。原代培养9~14d(平均12.1d)时贴壁细胞开始形成集落,15~21d(平均19.4d)时集落数量最多,培养28d贴壁细胞铺满培养皿底,细胞类型以"成纤维样"细胞、"巨噬样"细胞、"小圆"类细胞为主。细胞化学染色显示非特异性酯酶(NSE)染色阳性率100%,糖原染色(PAS)阳性率为100%,碱性磷酸酶(ALP)染色阳性率26%,过氧化物酶(POX)染色阴性;免疫细胞化学染色显示CD31阳性率96%,CD68阳性率95%,Fn阳性率94%,CD45阴性。结论在体外可以成功培养人脐血源基质细胞,为进一步的基础及临床研究提供了基础。     

VCAM-1和EGFP双基因共表达重组腺病毒的构建

目的 构建VCAM-1和EGFP双基因共表达重组腺病毒载体.方法 采用DNA重组技术,将目的 基因VCAM-1克隆至含有报告基因EGFP的穿梭质粒;在BJ5183细胞中与pAdeasy-l质粒进行同源重组,产生重组腺病毒载体.结果 (1)VCAM-1基因与pAdTrack-CMV载体成功连接,经NotⅠ/XhoⅠ双酶切后电泳可见2个大小约为9kb和2kb左右条带,经PCR法扩增后电泳可见一个600bp左右条带,证明pAdTrack-CMV-VCAM-1重组质粒构建成功;(2)pAdTrack-CMV-VCAM-1质粒与pAdeasy-l质粒同源重组后,产物经PacⅠ酶切后电泳可观察到2个大小约为31kb和4kb左右条带,与预期结果相符.结论 Ad-VCAM-1-EGFP重组腺病毒载体构建成功.     

环孢菌素A联合长春新碱治疗难治性ITP的临床观察

我院自 1996年 8月～ 2 0 0 0年 3月采用环孢菌素Ａ联合长春新碱治疗难治性血小板减少性紫癜 (ＲＩＴＰ) 2 6例 ,取得较好疗效 ,现报道如下。1　资料与方法1 1　病例选择　 2 6例ＲＩＴＰ住院病人 ,均符合国内诊断标准[1] ,其中男 8例 ,女 18例 ,年龄 16～ 5 3岁 (平均 30 5岁 ) ,病程5～ 2 3月 (平均 11 6月 ) ;治疗前血小板计数 (5～ 32 )× 10 9/Ｌ(平均 15 5× 10 9/Ｌ) ;每例病人既往均接受过正规激素治疗 ,其中 4例使用过环磷酰胺 ,2例使用过硫唑嘌呤 ;2例行脾切除治疗后病情反复。 2 6例患者均有不同程度的皮肤瘀点、瘀斑 ;鼻及牙…     

外周血干细胞移植治疗恶性血液病及实体瘤的临床观察

目的　观察外周血干细胞移植 (PBSCT)治疗恶性血液病及实体瘤的初期疗效。方法　自 2 0 0 1年 3月至 2 0 0 2年 3月 ,用PBSCT治疗恶性血液病及实体瘤患者共 2 1例 (含儿童患者 10例 ) ,其中 :急性淋巴细胞白血病 (ALL) 8例 ;急性非淋巴细胞白血病 (ANLL) 1例 ;非霍奇金淋巴病 (NHL) 8例 ;霍奇金淋巴瘤 (HD) 2例 ;多发性骨髓瘤 (MM ) 1例 ;小细胞肿癌 (SCLC) 1例。除 1例异基因和 1例同基因移植患者采用G CSF对供者进行动员外 ,其他病例均为自体外周血干细胞移植 ,动员方案为化疗 +G CSF。经 2～ 4次采集 ,获得MNC中位数为 5 2× 10 8 kg ,CD3 4+ 细胞为 6 4× 10 6 kg ,CFU GM为 3 6× 10 5 kg。预处理方案 :17例患者采用Cy TBI,4例患者采用高剂量化疗方案。结果　所有患者移植后均重建造血。外周血WBC于移植后 4 4± 2 5d降至 0。PLT于 7 6±2 2d降至 10× 10 9 L以下。WBC >1 0× 10 9 L、中性粒细胞 >0 5× 10 9 L、PLT >2 0× 10 9 L ,分别为 10± 3d、11± 3d、15± 7d。 5例患者于移植后 1～ 6个月死于感染或病情复发 ,其余患者均无病存活 2～ 11个月 ,疗效仍在近一步随访中。结论　PBSCT对儿童及成人恶性血液病、实体肿瘤都是一种安全有效的治疗方法。