氨基末端B型利钠肽原与B型利钠肽检测在急性脑梗死合并心力衰竭时的诊断价值研究

目的 探讨心衰标志物氨基末端B型利钠肽原(amino-terminal pro-brain natriuretic peptide,NT-proBNP)与B型利钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)在单纯心衰和急性脑梗死伴心衰患者血液水平的变化趋势及相关性,为临床医生选择合适的检测项目并科学分析检测结果提供客观依据.方法 采用美国临床与实验室标准化协会(Clinical and Llaboratory Standards Institute,CLSI)颁布的EP15-A2文件对电化学发光免疫检测系统罗氏Cobas E601和化学发光免疫检测系统西门子ADVIA Centaur检测NT-proBNP与BNP的精密度和准确度进行验证,并采用稀释回收试验确定高值标本的最大稀释倍数,保证试验数据符合要求;然后收集203例单纯心衰和急性脑梗死伴心衰患者与60例正常体检者标本,分析NT-proBNP与BNP结果的变化趋势与相关性;与此同时,检测急性脑梗死合并心衰患者同型半胱氨酸( homocysteine,Hcy)及NT-proBNP水平,分析二者相对于正常对照组的差异情况及相关性.结果 Cobas E601与ADVIA Centaur对NT-proBNP与BNP检测均具有良好的重复性,总不精密度分别小于2.93％与3.50％,与定值校准品的偏差分别小于3.60％与2.60％,符合临床检测要求;超出测量上限的样本可采用的最大稀释比例均为1:2;相对于单纯心衰患者,急性脑梗死伴心衰患者NT-proBNP水平会明显抬高(P=0.003),与BNP数值间相关性差,BNP仅在急性脑梗死合并Ⅲ级心衰患者体内明显升高(P＜0.001);急性脑梗死伴心衰患者Hcy与NT-proBNP测定结果均明显高于正常对照组(均P＜0.001),但二者无明显相关.结论 NT-proBNP与BNP均能够很好的反应单纯心衰的严重程度,但在评价急性脑梗死合并的心力衰竭时,NT-proBNP检测结果失去诊断价值,且不可通过Hcy进行校正.在急性脑梗死合并的心力衰竭的评价中,NT-proBNP不能准确反映心帅程度,且不可通过Hcy进行校正.     

两种凝血分析仪检测D二聚体结果的一致性分析

目的比较两种全自动血凝分析仪检测D二聚体结果的一致性。方法分别使用Sysmex CA7000全自动血凝分析仪和STA-R Evolution全自动凝血分析仪检测320例患者血浆D二聚体水平,对结果进行统计学分析。结果两种仪器检测D二聚体结果分别为(2.412±0.458)mg/L,(1.820±0.654)mg/L,差异有统计学意义(t=3.425,P0.05);两台仪器结果阳性率分别为76.6%,82.5%,差异显著(χ~2=68.757,P0.05);两者的阳性符合率为70.6%,阴性符合率为11.6%,总体符合率为82.2%。结论两种仪器检测D二聚体的阳性率不同,临床应针对不同检测系统制定不同的疾病判断临界值。     

甾醇类新药NSC67657诱导THP-1细胞分化及ICAT蛋白在细胞分化中的作用研究

目的 研究新的甲磺酸甾醇类药物NSC67657对白血病细胞的诱导分化作用及可能机制.方法 采用MTT法分析在不同浓度NSC67657作用下THP-1细胞的增殖水平,通过细胞表面分化抗原的检测,观察不同药物浓度、不同作用时间处理的THP-1细胞分化程度,并对完全分化细胞做形态学分析.通过RT-PCR和Western blot方法观察药物作用细胞前后β-catenin相关蛋白1(ICAT)基因和蛋白的表达情况;构建pDsRed-ICAT真核表达载体,测序后转染THP-1细胞,筛选阳性克隆,并做表达验证.采用流式细胞术,瑞特染色和超微结构观察,分析重组质粒转染细胞在药物处理前和处理24 h后THP-1细胞的分化情况.结果 通过比较可见药物处理后的THP-1细胞增殖明显受抑;细胞表面分化抗原CD14的表达水平随药物处理时间的延长和药物浓度的升高而增加,结合增殖分析,以10 μmol/L药物、连续诱导5 d为宜,细胞分化可达到90%以上.形态学观察验证了THP-1细胞在NSC67657的作用下向单核系分化.真核表达载体构建成功,电转后THP-1细胞ICAT基因和蛋白表达升高.药物作用前后,重组质粒转染THP-1细胞CD14的表达与对照组比较无明显差异;通过瑞特染色和超微结构观察,发现药物作用重组质粒转染THP-1细胞24 h后,细胞仍处初级分化阶段.结论 NSC67657可诱导THP-1细胞向单核系分化,并激活ICAT基因的表达,但仅是该基因的高表达并不 足以诱导THP-1细胞分化,也不会增加THP-1细胞对NSC67657 药物作用的敏感性.     

经络学说与老年病的防治

人生步入老年,身体各方面都会发生较大变化,出现一系列衰败现象.尤其是肾气的虚衰比较明显,具体表现因人而异,或耳先失聪,或目先不明,或须发白堕,或牙齿脱落.这种因老而衰虽然是一种正常的自然规律,但是,由于这种衰退,削弱了机体对各种致病因素的免疫防卫机能.在外,对自然界的适应能力降低,对六淫之邪的抵抗力减退;在内,脏腑之间、经络之间、脏腑与经络之间由相对平衡趋向失衡,对七情之气的调节能力也大大减弱.因此,老年人就特别容易外感六淫之邪,内伤七情之气,发生各类疾病.其中,尤以慢性虚弱性疾病和各种组织结构的退行性病变居多.正所谓"邪之所凑,其气必虚”也.疾病的结果,又进一步加速机体各种功能的退化,加速衰老,形成一种由虚致病、因病更虚的恶性循环.     

基于ISO 15197:2003和2013标准的POCT血糖仪比对试验结果分析

近年来,即时检测(point-of-care testing, POCT)以其便携、即时的优点,越来越广泛地被应用于临床实践.随着我国糖尿病发病率的不断提高,相关血糖监测需求不断增加,各种品牌、方法学的POCT血糖仪被应用于临床,但操作人员质控意识不强,也导致其检测结果的质控工作不尽如人意. 本研究参照ISO 1519...     

全反式维甲酸诱导HL60细胞分化前后蛋白表达差异分析

目的:建立全反式维甲酸(All trans-retinoic acid,ATRA)诱导HL60细胞向粒系分化的模型,研究采用改良双向电泳条件对分化前后的细胞全蛋白进行分离分析,寻找差异表达蛋白.方法:采用全反式维甲酸对HL60细胞进行诱导分化.通过MTT、流式细胞技术分析细胞增殖情况和CD11b细胞表面分化抗原的表达,选择最适的药物浓度和诱导时间;再通过细胞化学染色对分化结果进行验证,构建分化模型.采用改良双向电泳分离技术对细胞全蛋白进行分离,运用PDQuest软件分析HL60细胞分化前后蛋白表达差异,并用基质辅助激光解吸-飞行时间质谱(MALDI-TOF)对差异蛋白点进行分析.结果:ATRA明显抑制HL60细胞增殖,并随药物浓度的增加,抑制效果也越显著;2 μmol/L的ATRA连续作用HL60细胞5 d即有90%以上的细胞有粒系分化标志抗原CD11b的表达.细胞化学染色结果亦表明诱导后的HL60细胞向粒系分化.将分化前后的HL60细胞全蛋白经过改良双向电泳技术分离,PDQuest软件比对,MAIDI-TOF分析,发现有25个蛋白点仅在未分化凝胶谱中找到,有15个蛋白点仅在分化细胞蛋白表达谱中找到.其中有的是癌基因表达蛋白,有的是抑癌基因表达蛋白,还有的则参与凋亡过程等.结论:在选定的药物浓度和作用时间下,ATRA可以诱导HL60细胞向粒系分化.改良双向电泳技术对药物作用前后细胞蛋白的分离,可发现不同于传统双向电泳分离所得的蛋白结果.     

运用IFCC模型评价中山地区23家临床实验室HbA1c检测系统的分析性能

目的评价中山地区23家临床实验室糖化血红蛋白(HbA1c)检测系统的分析性能,为全市医疗机构间该项目检测结果的互认奠定基础。方法收集参加2018年中山地区HbA1c检测结果一致性调查的23家代表性医疗机构的检测结果、近6个月两个水平室内质控累积变异系数(CV)、检测方法及检测系统品牌。剔除超出±3s的数据,然后取均值作为靶值,并将每家实验室的CV、偏倚(Bias)绘制在IFCC模型图上。结果 65%(15/23)的实验室两个水平均达到了IFCC所提出的总允许误差(TEa)5mmol/mol且2σ的质量目标要求;高效液相色谱(HPLC)法性能达到了IFCC最低可接受标准,而免疫比浊法性能欠佳;伯乐、东曹、普门达到了IFCC标准,创艺性能欠佳;三甲和二甲医院均达到了IFCC标准,一甲医院未达到IFCC标准。结论不同检测方法、不同检测系统甚至不同级别医院HbA1c检测结果的一致性有待进一步提高。     

血红蛋白双重杂合子对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响

目的观察Hb Q-H和Hb J-Bangkok合并β地中海贫血(简称"地贫")双重杂合子患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响。方法收集20例表观健康成年人和20例2型糖尿病(T2DM)患者标本,用于5个糖化血红蛋白检测系统间的结果比对。收集1例Hb Q-H患者标本和1例Hb J-Bangkok合并β地贫双重杂合子患者标本,用Capillarys2行血红蛋白毛细管电泳,用gap-PCR、PCR-RDB和基因测序方法鉴定2例异常标本的珠蛋白基因。同时用BioRad VARIANTⅡ(VⅡ)、BioRad VARIANTⅡTurbo2.0(VⅡ-T2.0)、Capillarys 2 Flex Piercing(C2FP)、Primus Ultra2(Ultra2)、Roche PPI 800(PPI 800)5个糖化血红蛋白检测系统检测所有标本的HbA1c结果,其中对于双重杂合子标本,每个检测系统检测3次,保存图谱和检测结果并对比分析。结果 Hb Q-H标本的基因型为--α~(QT)/--SEA;β~N/β~N,珠蛋白α1链发生HbA1 CD74GC突变,形成Hb Q-Thailand血红蛋白变异体,无正常的α珠蛋白肽链。Hb J-Bangkok合并β地贫的基因型为:αα/αα;β~(CD56)/β~(CD41-42),珠蛋白β链第56位密码子发生GGCGAC点突变,形成Hb J-Bangkok血红蛋白变异体,无正常的β珠蛋白肽链。对于Hb Q-H标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ和VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;C2FP系统图谱与正常图谱相似,HbA1c结果为3.7%;Ultra2系统和PPI系统报告了HbA1c结果,分别为5.3%和5.7%,不存在异常提示。对于Hb J-Bangkok合并β地贫标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在区别,存在84.9%的P4峰,报告了HbA1c结果为4.7%;C2FP系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果。Ultra2系统和PPI系统均报告了HbA1c结果,分别为4.7%和3.8%,不存在异常提示。结论 Hb Q-H患者与Hb J-Bangkok合并β地贫患者标本均不含正常的HbA,应无HbA1c结果。对于二者,VⅡ系统及VⅡ-T2.0系统的结果图谱存在明显异常,提示结果不可报告;Hb Q-H对C2FP系统存在明显干扰,报告了HbA1c结果,而Hb J-Bangkok合并β地贫标本C2FP系统未报告HbA1c结果;二者对PPI及Ultra2系统存在明显干扰。     

临床实验室信息管理系统仪器设备管理模块的建立

目的探讨建立临床实验室仪器设备管理系统的可行性方案。方法在实验室信息管理系统平台上,基于ISO15189认可准则和模块化设计,采用三层架构建立B/S模式的实验室设备管理系统。结果建立了仪器设备的档案、使用说明、人员授权、维护保养、质控报表、校准记录、故障管理、不良事件报告等的系列记录与管理路径。结论该系统的建立实现了临床实验室仪器设备全过程管理的实时记录、保存、监控与查询功能。