OX40-OX40L信号对ApoE－/－小鼠颈动脉斑块中亲环素A表达的影响

目的 观察OX40-OX40L信号对载脂蛋白E基因敲除（ApoE^-/-）小鼠颈动脉粥样硬化斑块内亲环素A（CyPA）表达的影响。方法 采用颈动脉硅胶圈植入法快速诱导ApoE^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成,48只雄性ApoE^-/-小鼠随机分成抑制组、刺激组、对照组,刺激组腹腔注射鼠抗OX40 200 μg,抑制组腹腔注射鼠抗OX40L 200 μg,对照组腹腔注射IgG2b 200 μg,均每周一次,连续6周。分别采用免疫组织化学、Western blot 和qRT-PCR检测小鼠颈动脉斑块内CyPA蛋白和mRNA的表达。结果 ApoE^-/-小鼠颈动脉置管并6周高脂饮食后,对照组可见斑块形成,部分内膜和中膜增厚,弹力板变形,刺激组颈动脉斑块面积与对照组相比显著增加,而抑制组颈动脉斑块面积明显减少。与对照组相比,刺激组颈动脉斑块内CyPA蛋白和mRNA表达明显增强,而抑制组颈动脉斑块内CyPA蛋白和mRNA表达明显减弱。结论 OX40-OX40L信号能调控ApoE^-/-小鼠颈动脉斑块中CyPA的表达。     

可溶性ST2与冠脉复杂病变及其严重程度的相关性

目的:探讨血清可溶性生长刺激表达基因2蛋白(soluble growth stimulation expressed gene 2 protein,sST2)水平与冠状动脉复杂病变及其严重程度之间的关系。方法:纳入连续住院的择期行选择性冠状动脉造影的患者共430名,依据冠状动脉造影结果分为对照组(非冠心病组,136例)、冠心病简单病变组(86例)、冠心病复杂病变组(根据Syntax评分进一步分为低危组139例、中危组36例和高危组33例)。留取空腹外周静脉血标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别测定上述各组患者血清可溶性ST2水平,Spearman相关性分析显示可溶性ST2水平与冠状动脉复杂病变严重程度之间的相关性。结果:在430例研究对象中,全部冠心病患者(含简单病变和复杂病变)的可溶性ST2水平明显高于对照组[(3449±1250)vs.(2743±961)pg/mL,P<0.001];冠状动脉简单病变组、复杂病变低危组、中危组、高危组患者sST2水平分别为(3200±1406)、(3338±1064)、(3728±1228)和(4261±1235)pg/mL,sST2组间差异有统计学意义(P<0.001)。Logistic回归分析显示,sST2与冠心病独立相关(OR为1.001,P<0.001),sST2与冠状动脉复杂病变的严重程度也独立相关(OR为1.001,P<0.001)。Spearman相关性分析显示:sST2表达水平与冠状动脉病变严重程度呈正相关(rs:0.543,P<0.001)。ROC曲线显示:sST2对冠状动脉复杂病变曲线下面积AUC为0.726。结论:血清可溶性ST2水平可能是冠状动脉复杂病变的重要预测指标。     

关注血管钙化的起源、演进与转归研究

血管钙化是动脉壁间叶细胞尤其是平滑肌细胞在各种病理因素作用下转分化为成骨成软骨细胞表型,介导钙盐异常沉积在血管壁的过程,包括内膜钙化、中膜钙化及瓣膜钙化等多种病理类型。随着我国老龄化趋势的不断加剧,尤其是糖尿病、动脉粥样硬化及慢性肾脏病等的患病率持续走高,由其衍生的血管钙化正在逐渐演变为影响我国人民健康的一个关键疾病谱。为此,本文从血管钙化的起源、演进及转归,尤其是转归过程中的骨与血管、主动与被动、内膜钙化与中膜钙化、微钙化与大钙化以及自噬、内质网应激和非编码RNA等争议和热点问题入手,进行了系统阐述,希冀通过本文和专栏内多位专家以及一直奋战在钙化领域内广大同道的共同努力,一起推动血管钙化基础与临床研究的前行。     

蛋白激酶C活性与糖尿病足截肢患者胫前动脉钙化积分的相关性

目的探讨蛋白激酶C(PKC)活性与糖尿病足截肢患者胫前动脉钙化之间的相关性。方法选取2012年10月至2016年1月在江苏大学附属医院骨科行糖尿病足大截肢住院治疗的患者共60例,根据CT对胫前动脉钙化程度的检测将患者分为轻度钙化组(n=20)、中度钙化组(n=20)及重度钙化组(n=20)。通过患者临床基线资料的采集以及胫前动脉组织连续石蜡切片Von Kossa染色观察钙化演进,通过PepTag~Assay法检测组织细胞膜PKC活性,通过Western blot检测对PKCα亚型进行半定量分析。结果糖尿病足截肢患者胫前动脉Von Kossa染色与相应的动脉CT扫描结果一致:胫前动脉斑块内的钙盐沉积呈点灶状分布,而且随着胫前动脉内斑块的不断扩大乃至管腔闭塞,钙颗粒的密度也有不同程度的增加,但始终呈点灶状分布的微钙化。定量检测及Pearson相关性分析显示PKC活性与糖尿病足胫前动脉钙化积分正相关(r=0.931,P0.001),进一步分析显示可能是PKCα亚型发挥了促进钙化演进的作用。结论 PKCα亚型的活化可能与糖尿病动脉斑块内钙化的演进存在正相关,其水平可能对针对性干预血管钙化有着一定的价值。     

重视糖尿病大血管并发症的发病、机制、评估与防治研究

糖尿病大血管并发症引起的高致死高致残严重影响国计民生的多个方面。如何积极高效地开展糖尿病大血管并发症包括脑卒中、冠心病及外周血管病等的评估和防治,是医学界迫切需要解决的问题。有鉴于此,特组织本领域相关专家结合各自的工作基础阐述糖尿病大血管并发症的发病、机制、评估与防治,组成“糖尿病大血管并发症专栏”,希冀为奋战在该领域的广大基础、转化与临床专家梳理出解决问题的新思路。     

t-PA负向调控p75NRT改变血管外膜自主神经重构参与动脉粥样硬化

目的 研究组织型纤溶酶原激活物(t-PA)对p75NTR、炎性反应、免疫调节、氧化应激的作用,以及对内膜增生的影响.方法 对糖尿病兔给予颈动脉外膜剥除建立动物模型,然后进行血管损伤处理,同时给予t-PA控释微球后,免疫荧光染色分别观察对照组和处理组神经重构的变化情况,同时检测给予t-PA控释微球对乙酰胆碱和去甲肾上腺素释放的影响.RT-PCR检测t-PA释控微球对局部血管组织的炎症、免疫反应和氧化应激的影响.采用交感神经元与平滑肌细胞共培养,之后给予乙二醛进行处理作为动脉粥样硬化细胞模型,以t-PA处理组作为干预组,观察t-PA对胆碱能神经元数目,与平滑肌细胞之间的突触连接数目、乙酰胆碱分泌的影响.RT-PCR检测t-PA-MMP-p75NTR-NF-κB信号通路的改变.结果 给予t-PA控释微球能明显增加胆碱能神经元数目和神经纤维(P<0.05)而不影响去甲肾上腺素能神经元数目和神经纤维(P>0.05),并且导致乙酰胆碱释放增多(P<0.05),最终抑制内膜增生(P<0.05).离体交感神经元与平滑肌细胞共培养,之后给予乙二醛处理作为动脉粥样硬化细胞模型中t-PA促进胆碱能神经元增殖、增加乙酰胆碱的分泌和促进胆碱能神经纤维的数目增多(P<0.05).RT-PCR检测发现t-PA能够激活MMPs,抑制p75NTR-NF-κB信号通路(P<0.05).结论 t-PA激活MMPs反馈抑制p75NTR-NF-κB信号通路增加血管外膜自主神经重构延缓动脉粥样硬化疾病的发生发展.     

CML促进高脂诱导糖尿病ApoE－/－小鼠非酒性脂肪肝进展的研究

研究 Nε-羧甲基赖氨酸(CML)对非酒精性脂肪肝(NAFLD)的影响并探索其作用机制。首先通过体外实验,观察不同浓度CML对HepG2细胞脂质蓄积的影响。以6周龄雄性ApoE－/－小鼠腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg/day连续五天,2周后将血糖水平≥300 mg/dL的小鼠纳入实验研究;用免疫组化染色法检测CML的表达,HE染色观察肝脏形态以及检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的变化。结果显示,不同浓度CML处理后,上调肝组织中CML表达。CML浓度依赖性升高小鼠血清TC、TG、AST、ALT、MDA 的含量,降低血清中 SOD、GSH-Px含量,加重肝脏脂肪变性,并增加HepG2细胞内脂质蓄积。结果表明CML促进高脂诱导糖尿病ApoE－/－小鼠非酒性脂肪肝进展。     

临床医学生毕业实习的现状分析与对策

临床医学毕业实习是关乎医学后备人才培养的百年大计。近年来,随着医患矛盾发生率的居高不下、医疗事故责任法等相关政策的出台实施以及重临床轻教学、重辅助检查轻物理诊断思想的蔓延等,本科毕业生临床动手能力出现下滑态势。新形势下,医学生临床能力究竟该如何培养成为一个无法回避且事关今后医疗系统能否健康发展的关键课题。为此,本人结合在本院科教科管理岗位上工作多年的经验,对当前医学生临床毕业实习中存在的各种问题进行分析,并提出一些建议,希冀为解决当前医学本科生临床能力培养的困局提供参考意见。     

二十二碳六烯酸对肺动脉高压大鼠活化T细胞核因子c1表达的影响

目的观察二十二碳六烯酸(DHA)对野百合碱(MCT)致肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构及活化T细胞核因子c1(NFATc1)表达的影响。方法 24只SD大鼠随机分为正常对照组(n=7)、DHA干预组(n=7)及MCT模型组(n=10)。肺动脉高压模型采用MCT诱导法,HE染色观察大鼠肺小动脉形态学改变,免疫组织化学、Western blot和qRT-PCR检测大鼠肺动脉NFATc1蛋白和mRNA的表达。结果 DHA能明显减轻模型大鼠的肺血管重构;与正常对照组相比,MCT模型组肺动脉NFATc1蛋白和mRNA的表达明显增强(P0.05);与MCT模型组相比,DHA干预组肺动脉NFATc1蛋白和mRNA的表达减弱(P0.05)。结论 DHA对MCT所致肺动脉高压具有较好的抑制作用,其作用机制可能与其抑制NFATc1表达有关。     

急性冠状动脉综合征患者CD137水平的变化

目的探讨急性冠状动脉综合征(ACS)患者CD137水平的变化。方法分别应用流式细胞术和ELISA对急性冠状动脉综合征(n=80)、稳定型心绞痛(n=40)和正常对照者(n=40)血单核细胞表达CD137及血清CD137水平进行检测。结果 ACS患者血单核细胞表达CD137(70.3±11.3 MFI)及血清CD137水平(30.2±8.1 ng/L)明显高于稳定型心绞痛患者(20.1±5.1 MFI和13.1±4.3 ng/L)和正常对照者(20.9±7.2 MFI和12.6±5.9 ng/L)。ACS患者治疗后血清CD137水平显著降低。而稳定型心绞痛患者PTCA后血清CD137水平明显高于PTCA前,但单核细胞CD137表达无显著差异。结论 CD137水平升高可作为冠心病病情演变的一个警示指标。