原位杂交技术在辐射诱导骨髓细胞凋亡及修复时bcl-2基因表达检测中的应用

细胞凋亡是生物体增殖、分化和发育过程中的自然规律,是基因控制下的细胞自杀活动。近年来实验研究表明：在细胞凋亡过程中,有新的基因转录和蛋白质合成,是机体对外界刺激进行主动应答的过程［１］。本文作者对已有的原位杂交方法进行改进,并成功地应用到辐射诱导骨髓...     

小果菝葜化学成分的研究

目的 研究小果菝葜Smilax davidiana的化学成分.方法 采用60%乙醇回流提取,大孔吸附树脂SP825、Sephadex LH-20、硅胶和ODS柱色谱,以及制备HPLC等方法进行分离纯化,并根据化合物的光谱数据鉴定其结构.结果 从小果菝葜中分离得到12个化合物,分别鉴定为白藜芦醇(Ⅰ)、反式白藜芦醇-3-O-β-D吡哺葡萄糖苷(Ⅱ)、顺式白藜芦醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅳ)、3'-甲氧基一槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(Ⅴ)、儿茶素(Ⅵ)、表儿茶素(Ⅶ)、1'-O-苄基-α-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅶ)、1'-O-苯乙基-α-L-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅸ)、1'-O-苯乙基-β-D-呋哺芹菜糖基-(1-2)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅹ)、2,4.6-三羟基苯乙酮-2,4-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅺ)、3-甲基-正丁醇-1-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1-6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(Ⅻ).结论 化合物Ⅴ、Ⅶ～Ⅹ和Ⅻ为首次从菝葜属植物中分离得到,化合物Ⅰ～Ⅳ、Ⅵ、Ⅶ和Ⅺ为首次从该植物中分离得到.     

热休克蛋白70在正常和放射复合伤口愈合血管再生过程中表达及意义研究

目的：探讨HSP70在正常和放射复合伤口愈合过程中表达变化规律及其意义。方法：72只Wistar二级大鼠背部皮肤制作圆形伤口后以25Gy^60Coγ射线局部照射，于伤后2、5、10、15、21、和28d活杀取材，采用LSAB免疫组织化学技术研究HSP70基因表达及意义。结果：单纯创伤组于伤后2d见新生血管内皮细胞浆内15d后，HSP70逐渐减少。创伤＋照射组伤后5d始见血管内皮细胞浆内弱阳性，10－15d时阳性，21天阴性。结论：HSP70参与伤口愈合血管再生的过程，可能对血管再生起促进作用，辐射使血管内皮细胞表达HSP70减少可能是辐射延迟伤口愈合的原因之一。     

白介素-1对正常和受照射的NIH/3T3成纤维细胞增殖的影响

目的　观察ＩＬ１ 对成纤维细胞生长的影响及其作用机理,为从细胞因子角度开展抗纤维化研究提供依据。方法　用ＭＴＴ比色、ＡｇＮＯＲＳ 银染和免疫组化技术,观察正常和受照ＮＩＨ／３Ｔ３ 成纤维细胞（６０Ｃｏγ源一次照射,吸收剂量３０ Ｇｙ）生长增殖活性、ＡｇＮＯＲＳ 和ＤＮＡ合成以及Ⅲ型胶原表达。结果　ＩＬ１ 浓度为１００ ×１０３Ｕ／Ｌ,培养第３ 天时,成纤维细胞数量和增殖活性（Ａ 值） 为对照值的１－４ 和１－３ 倍（照射组Ａ值为对照的１－１ 倍）;ＡｇＮＯＲＳ 颗粒数和Ｓ期细胞比例分别升高至对照值的２－９ 和２－０ 倍;而Ⅲ型胶原表达阳性细胞数为对照值的１－９ 倍。结论　在一定浓度范围内,ＩＬ１ 能促进成纤维细胞的增殖活性,ＤＮＡ 合成和Ⅲ型胶原表达。     

人放射性皮肤溃疡MDM2，p53蛋白高表达研究

我们使用ＭＤＭ２和ｐ５３单克隆抗体和免疫组化方法，研究了２５例人慢性放射性皮肤溃疡，发现ＭＤＭ２高表达阳性率为３６％（９／２５），ｐ５３高表达阳性率仅为８％（２／２５）。结果表明ＭＤＭ２，ｐ５３，基因和蛋白质的分子病理变化可能参与人放射性皮肤溃疡的癌前病变。     

原位末端标记方法的改进及其在检测骨髓造血细胞凋亡中 …

细胞凋亡是细胞死亡的一种形式,又称程序性细胞死亡。在实际研究工作中,特别是检测骨髓和含血细胞较多的组织过程中,由于内源性过氧化物酶含量较多,使用ＤＡＢ底物显色将会产物不可避免的背景着色,影响检测效果。因此,为了不影响检测结果（防止假阳性）,探索性地将亲和素－辣根过氧化物酶改为碱性酸酶标记的抗生蛋白链菌素（ＡＰ－ＳＡ）;显色剂由ＤＡＢ改为坚固红。阳性结果为玫瑰红色,核复染后呈蓝色,反差明显,背景清晰     

甾体皂苷9714的肠吸收研究

甾体皂苷9714是一含有两个糖链的水溶性甾体皂苷类化合物，具有扩张血管、增加脑血流量、显著上调N受体数量、消除自由基以及促进胚胎大鼠神经细胞增殖等活性。目前正在进行新药开发的临床前研究。本品能否通过人体的膜体系(脂质双层膜)，可否顺利地被人体吸收，是值得关注的问题，作者利用大鼠在体肠吸收法，观察其在肠管各区段的吸收情况，旨在为药代动力学研究提供依据。     

大鼠放射复合伤伤口中血管再生及内皮细胞凋亡研究

我院自 1997年 6月至 1999年 6月对 6 7例颅内肿瘤病人行Ｘ 刀治疗 ,其中 14例出现颅神经损伤 ,报道如下。一、临床资料14例病人中 ,男 8例 ,女 6例。平均年龄 46 3岁 (12～ 74岁 )。全部为脑底肿瘤 ,与邻近颅神经关系密切者分别为 :垂体瘤 4例 ,颅咽管瘤 3例 ,听神经瘤 2例 ,海绵窦脑膜瘤 2例 ,中颅凹脑转移瘤 3例 ,脑瘤直径≥ 35ｍｍ者 8例 ,2 5～ 34ｍｍ 4例 ,18～ 2 4ｍｍ 2例 ,分别占同等大小病灶的 31%(8 2 6 ) ,18%(4 2 2 )和 11%(2 19)。 11例行一次性单靶点Ｘ 刀治疗 ,3例行单靶点分次治疗 ,用 2 0～ 40ｍｍ限光筒 ,采用4～ 6个…     

电磁脉冲对犬淋巴细胞损伤及其机制的实验研究

目的 研究电磁脉冲（ＥＭＰ）对犬淋巴细胞的损伤效应及其机制。方法 用细胞化学,原位末端标记和免疫细胞化学技术,分析Ｔ淋巴细胞亚群、淋巴细胞凋亡以及ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的改变。结果 （１）２～１２万Ｖ／ｍ的场强能使外周血Ｔ细胞及其亚群出现不同程度的下降,其中以６万Ｖ／ｍ照射后２４ｈ最为明显,Ｔ细胞及Ｔｕ,Ｔｓ细胞数分别降低至对照值的７７％,８１％和６３％;（２）在上述场强范围内,凋亡淋巴细胞随照射     

蒺藜全草中甾体皂苷类化学成分研究

[目的]对蒺藜全草化学成分进行研究。[方法]采用大孔吸附树脂柱色谱、硅胶柱色谱、ODS柱色谱及制备高效液相色谱法(PHPLC)对蒺藜70%乙醇提取液进行分离纯化,并利用理化数据测定和光谱数据分析等方法对所得单体进行了结构鉴定。[结果]分离鉴定了5个甾体皂苷:1)uttroside B;2)polianthoside D;3)替告皂苷元-3-O-β-D-吡喃木糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡糖基(1→4)-[α-L-鼠李糖基(1→2)]-β-D-吡喃半乳糖苷;4)(25R)-26-O-β-D-吡喃葡糖基-5α-呋甾-3β,22α,26-三醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基(1→4)-吡喃半乳糖苷;5)海柯皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→2)-[β-D-吡喃木糖基-(1→3)]-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-β-D-吡喃半乳糖苷。[结论]化合物1和2为首次从蒺藜中分离获得。