二氢青蒿素对胰腺癌生长的抑制作用

Objective To investigate the anti-tumor activity of dihydroartemisinin in pancreatic cancer in vitro and in vivo. Methods For cultured cells,cell growth was determined by the MTT assay and apoptosis was evaluated by flow cytometry analysis stained with Annexin V-FITG/PI. The protein expression in BxPC-3 cells was analyzed by Western blot assay. BxPC-3 cells were injected subcutaneously into nude mice to establish pancreatic xenograft tumors and the tumor volume was monitored after exposure to dihydroartemisinin. Ki-67 staining and TUNEL assay were used to assess tumor cell proliferation and apoptosis in tumor tissue. Results After treatment by dihydroartemisinin in vitro, the proliferative inhibition rates of pancreatic cancer cells BxPC-3 and AsPC-1 reached up to (76.2 ± 3.5) % and (79.5 ± 2.9) %, and the apoptosis rates were up to (55.5 ± 3.2)% and (40.0 ± 3.5)%, the differences were significantly (P ＜ 0.01) compared with control [(2.0 ± 1.3) % and (0.9 ± 0.4) %]. Dihydroartemisinin inhibited the growth of pancreatic xenograft tumors in nude mice. The proliferation index and apoptusis index were (49.1 ± 3.9)% and (50.2 ± 4.4)% respectively in dihydroarternisinin 50 mg/kg treatment group, compared to those of (72.1 ± 3.3) % and (9.4 ± 2.9) % in control, the differences were significantly (P ＜0.01). Western blot assay indicated that dihydroartemisinin up-regulates expression of proliferation-associated protein p21WAF1 and down-regulates expression of PCNA, increases expression of apoptosis-associated protein Bax and decreases expression of Bcl-2 and activates caspase-9 in BxPC-3 cells. Conclusions Dihydroartemisinin exerts anti-tumor activity in pancreatic cancer both in vitro and in vivo by proliferation inhibition and apoptusis induction. Dihydroartemisinin can be used as a potential anti-tumor drug in pancreatic cancer.     

老年心肺疾病患者微循环与血液流变学检查的改变及关系

对２６例老年心血管病患者和２４例老年肺部疾病患者进行了甲襞微循环、血液流变学的检测，并对甲襞微循环和血液流变学改变及两者间的关系进行了分析。结果认为，老年心肺疾病患者的全血粘度、全血还原粘度、血浆粘度均明显增高，红细胞电泳时间缩短；甲襞微循环的清晰度、交叉、畸形、流速、红细胞聚集等也都有明显改变。说明这些疾病患者的血液处于高凝状态，进而引起微循环障碍，二者是相互影响的。     

中国汉族人群中白细胞介素-1β基因、载脂蛋白E基因多态与阿尔茨海默病的关联

目的:研究中国汉族人群中白细胞介素-1β基因(IL-1β)和载脂蛋白E(ApoE)基因多态在阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)患者中的分布情况。方法:随机选取76例AD患者和80例对照人群,用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性方法,分析受检者的IL-1β,ApoE基因型。结果:IL-1βB1基因型在两组中差异无显著性区别。占主导地位是IL-1βB1等位基因(80.3%)。ApoEε4等位基因(22.4%)在AD患者组中过表达。ApoEε4等位基因不影响IL-1β基因型或等位基因的分布频率。具有ApoEε4等位基因的AD患者的IL-1β基因型(B1/B1,B1/B2,B2/B2)分别为34,16,2例;具有ApoEε4等位基因的对照组人群的IL-1β基因型分别为38,18,4例;不具有ApoEε4等位基因的AD患者IL-1β基因型(B1/B1,B1/B2,B2/B2)分别为14,10,0例;不具有ApoEε4等位基因的对照组人群的IL-1β基因型分别为12,8,0例。结论:中国人AD与ApoEε4等位基因过表达密切相关,IL-1βB1等位基因的出现不能被用来作为区分AD和健康对照人群的标志。     

血管紧张素Ⅱ受体1基因A1166C多态性对其拮抗剂干预糖尿病血管病变的影响

目的：研究2型糖尿病伴早期糖尿病肾病患者的血管紧张素Ⅱ受体1(angiotensin Ⅱ type 1 receptor，AT1R)基因A1166C多态性对血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂(angiotensin receptor antagonist，ATRA)临床疗效的影响，为糖尿病慢性并发症预防性干预措施介入提供理论依据。方法：2001-11／2002-01在哈尔滨医科大学附属第一医院内分泌科住院的2型糖尿病患者64例。符合纳入标准2型糖尿病患者58例(糖尿病组)，男30例，女28例；早期糖尿病肾病28例(早期糖尿病肾病组)，AT1RAA基因型患者19例，AT1RAC基因型患者9例；无糖尿病肾病30例(无糖尿病肾病组)。选择同期于本院进行健康体检的自愿者45例为对照组，男26例，女19例。通过聚合酶链反应限制性长度多态性技术(PCR-RFTLP)检测AT1R基因A1166C多态性。在分析基因型前给予早期糖尿病肾病组的患者口服ATRA(安博维)，4周后观察其疗效。结果：对照组AT1RAC基因型及c等位基因频率与糖尿病组比较，差异无显著性意义(P&;gt;0．05)；早期糖尿病肾病组AT1RAC基因型及C等位基因频率明显高于无糖尿病肾病组(P&;lt;0．05)。AT1RAA基因型患者ATRA治疗后尿白蛋白排出率[(163．83&;#177;18．67)mg／24h]明显好于治疗前[(234．66&;#177;21．81)mg／24h[(P&;lt;0．05)。AT1RAA型患者服用ATRA4周后尿白蛋白排出率下降程度明显好于ATlRAC基因型患者(P&;lt;0．05)。结论：AT1R 1166C等位基因可能是2型糖尿病肾病的易感基因；AT1R基因A1166C多态性可能对ATRA的疗效具有一定影响。     

血红素氧合酶-1/一氧化碳系统对老龄脓毒症小鼠蛋白C系统的影响

目的探讨血红素氧合酶-1/一氧化碳(HO-1/CO)系统对老龄脓毒症小鼠蛋白C系统的影响。方法采用改良盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症模型。将96只健康C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为假手术组、CLP组、CLP+HEMIN(HO-1激动剂)组及CLP+ZNPP(HO-1抑制剂)组,各组又按处死时间分为术后6、12、18和24 h亚组,每组6只小鼠。留取血浆检测血浆白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血栓调节蛋白(TM)、蛋白C(PC)、活化蛋白C(APC)水平;留取肝组织检查各组动物组织血栓形成情况并检测血栓调节蛋白(TM)、蛋白C(PC)表达情况。结果肝脏光镜下可见CLP组及CLP+ZNPP组相对于假手术组血栓形成明显增多,而CLP+HEMIN组较CLP组血栓形成明显减少;CLP组、CLP+HEMIN组及CLP+ZNPP组血浆PC、APC水平均较假手术组明显减少(P<0.05),但CLP+HEMIN组血浆PC、APC水平程度明显高于CLP组及CLP+ZNPP组两组;CLP组、CLP+HEMIN组及CLP+ZNPP组血浆TM水平均较假手术组增加,但CLP+HEMIN组血浆TM水平增加不明显,而CLP组及CLP+ZNPP组血浆TM水平增加显著(P<0.01);肝脏组织免疫荧光及WESTERNBLOT显示CLP+HEMIN组较CLP及CLP+ZNPP组PC及TM表达均有所增加。结论 HO-1/CO系统能够上调脓毒症小鼠的血栓调节蛋白(TM)、蛋白C(PC)表达,促进蛋白C活化,通过促进肝脏PC合成和PC向APC转化、上调TM三个环节减轻脓毒症时蛋白C途径受损,从而通过蛋白C系统途径改善脓毒症小鼠凝血功能障碍。     

完全动脉化辅助性肝移植治疗大鼠急性肝功能衰竭的实验研究

目的　探讨辅助性肝移植门静脉动脉化加肝动脉血供对急性肝功能衰竭治疗作用。方法　切除85 %肝脏诱导大鼠肝衰 ,将 30 %肝脏移植于残肝下方 ,通过右肾动脉行移植肝门静脉动脉化并建立肝动脉血供。观察肝衰组和移植组大鼠存活率、肝功能和结构改变。结果　移植组 2周存活率为 73 3% ,肝衰组 4 8h存活率 0 % (P <0 0 5 )。移植术后 14d残肝明显增生 ,肝功恢复正常 ,移植肝萎缩纤维化。结论　辅助性肝移植门静脉动脉化为急性肝功衰竭提供了有效的支持作用 ,使原肝再生功能恢复而移植肝萎缩     

联合应用白芨及硫代乙酰胺建立家兔门静脉高压症模型

目的探索一种快速而有效建立家兔门静脉高压症模型的方法。方法以3组共18只家兔为模型，第1组开腹经门静脉注入0．4％的白芨混悬液4ml，术后予以0．1％的硫代乙酰胺溶液饮水；第2组经门静脉注入白芨后予以正常饮水；第3组经门静脉注入4ml生理盐水，术后给予0．1％的硫代乙酰胺溶液饮水。手术前后行门静脉测压、血管造影及病理学检查。结果以0．4％浓度白芨溶液辅以硫代乙酰胺溶液饮水组建立门静脉高压症模型效果最佳，门静脉压力平均升高50％，病理呈坏死后肝硬化表现。结论以白芨粉为栓塞剂联合硫代乙酰胺溶液饮水建立家兔肝硬化门静脉高压症模型，方法简单，效果可靠且重复性好。     

病毒感染与北方低发区鼻咽癌发生关系的初探

目的 了解ＥＢ病毒、人乳头瘤病毒１６／１８型及人巨细胞病毒与北方低发区鼻咽癌病因的关系。方法 采用ＰＣＲ技术检测３７例石蜡包埋的鼻咽癌组织及２０例鼻咽慢性增生组织中３种病毒的特异性基因片段。结果 ＥＢ病毒基因阳性检出率为８３．７８％,其中Ａ型７５．６８％,Ｂ型８．１０％,无复合感染,两型比较有显著差异;ＨＰＶ－１６型基因检出率为８．１０％;但ＨＰＶ－１８型及ＨＣＭＶ基因均未检出。对照组中３种病毒的     

γ射线致Wistar大鼠脾细胞凋亡的实验研究

目的　研究体外分离大鼠脾细胞并应用γ射线诱导脾细胞凋亡的实验方法。方法　无菌条件下手术切除Wistar大鼠脾脏 ,制备脾细胞悬液 ,在RPMI 16 4 0培养基 (含 10 %小牛血清 )中培养 2 4～ 4 8h后 ,γ射线照射诱导脾细胞凋亡 ,通过细胞形态学观察、流式细胞术测定及DNALadder测定检测大鼠脾细胞生物学改变及凋亡率。结果　γ射线照射后 ,脾细胞出现形态学及分子生物学改变 ;通过流式细胞术测定辐射剂量分别为 5 0 0 0rad和 10 0 0 0rad的实验组脾细胞凋亡率分别为 76 .6 3%± 3.5 3%和 82 .99%± 2 .0 4 % ,与对照组 36 .0 4 %± 2 .98%相比较有显著性差异 (P <0 .0 0 5 )。结论　体外条件下γ射线可以高效诱导大鼠脾细胞凋亡 ,为进一步体内研究凋亡脾细胞对机体免疫应答和临床应用奠定了基础。     

低剂量化疗联合西妥昔单抗治疗结肠癌的实验研究

目的 观察5氟尿嘧啶(5-Fu)持续低剂量给药联合西妥昔单抗化疗对小鼠结肠癌皮下移植瘤血管生成的影响,并观察其抑瘤效果和毒副作用.方法 建立荷CT-26结肠癌Balb/c小鼠模型,分别给予持续低剂量5-Fu、常规大剂量5-Fu、西妥昔单抗、持续低剂量5-Fu联合西妥昔单抗治疗以及生理盐水,观察肿瘤体积、小鼠体重和外周血白细胞计数及小鼠生存期.治疗8周结束后取皮下肿瘤组织,以免疫荧光法测定肿瘤微血管密度(MVD),以TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡. 结果 与常规大剂量5-Fu治疗组比较,持续低剂量5-FU治疗组以及联合治疗组无明显体重减轻或外周血白细胞计数下降等毒性迹象,小鼠生存期显著延长(P＜0.05).持续低剂量5-Fu治疗组以及联合治疗组抑瘤率分别达到55%及71%;肿瘤MVD值分别为4.13±1.85和3.52 4±45,较对照组降低73%及77%,明显优于常规大剂量5-Fu治疗组及西妥昔单抗治疗组.此外,采用TUNEL法检测肿瘤组织的细胞凋亡水平,各组之间相比差异无统计学意义. 结论低剂量5-FU联合西妥昔单抗的给药方式靶向于结肠癌血管生成,不易产生耐药,增加了抑瘤效果,毒副作用小,动物生存期明显延长.