心房颤动犬心房肌肾素-血管紧张素系统改变

目的探讨慢性心房快速起搏诱发心房颤动(房颤)犬心房肌肾素血管紧张素系统(RAS)的改变。方法13只犬随机分为假手术组(n=6)和起搏组(n=7)。起搏组犬无菌开胸后在右心房缝植5对心外膜记录电极,电极尾端经皮下由犬背部穿出;在右心耳缝植螺旋型起搏电极,连接实验用AOO高频起搏器(400次/min),心房快速起搏6周,建立房颤犬模型;假手术组犬仅缝植心外膜记录电极和起搏电极而不起搏。经心外膜电极记录各组犬房颤诱发情况;采用放射免疫方法检测两组犬左心房及右心房组织血管紧张素Ⅰ(AngⅠ)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)含量及肾素活性;采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测两组犬心房肌肾素、血管紧张素原和血管紧张素转换酶mRNA表达水平改变。结果(1)起搏组7只犬均经短阵快速刺激(burstpacing)诱发出房颤,房颤诱发率和平均持续时间较假手术组显著增加(P<0.01);(2)起搏组犬心房肌AngⅠ、AngⅡ含量较假手术组犬心房肌明显升高(P<0.01),肾素活性亦显著增加(P<0.01);同一组犬左心房与右心房组织AngⅠ、AngⅡ含量及肾素活性差异无统计学意义(P>0.05);(3)起搏组犬心房肌肾素、血管紧张素原和血管紧张素转换酶mRNA表达较假手术组犬心房肌显著上调(P<0.01)。结论慢性心房快速起搏诱发房颤犬心房肌AngⅠ、AngⅡ含量及肾素活性显著增加,可能是局部RAS基因表达上调的结果,提示房颤伴随心房肌RAS激活。     

人肝再生增强因子基因转导对大鼠肝硬化的保护作用

目的 探讨人肝再生增强因子(augmenter of liverregeneration，ALR)基因转导对肝硬化的保护作用。方法 构建hALR真核表达载体，并以肌肉注射方式转导至硫代乙酰胺诱导的大鼠肝硬化模型中，观察对肝硬化大鼠的代谢支持作用。结果 构建的hALR真核表达载体pchALR肌肉注射后显著降低了血清AST、ALT、ADH水平，延长了生存时间，提高了存活率。结论 人肝再生增强因子基因转导对肝硬化大鼠具有预防和治疗作用，可显著降低血清AST、ALT、ADH水平，延长生存时间，提高存活率。     

青蒿素诱导急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的实验研究

目的探讨青蒿素（artemisinin）对急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并了解是否减轻急性胰腺炎严重程度。方法腹腔内注射雨蛙素（cerulein）诱导大鼠胰腺炎模型建立,设正常对照组、胰腺炎组及青蒿素组,通过原位末端标记（TUNEL）法检测各组胰腺组织中腺泡细胞的凋亡指数,并用分光光度法检测髓过氧化物酶（MPO）活性。采用两步酶消化法分离正常大鼠胰腺腺泡细胞,离体分组培养,采用丫碇橙（AO）染色及caspase-3活性的检测,评估青蒿素对胰腺腺泡细胞凋亡的影响,并检测各组培养液中的乳酸脱氢酶（LDH）及淀粉酶（AMS）活性,评估胰腺腺泡细胞酶的释放。结果在体实验中,青蒿素组与胰腺炎组比较,胰腺腺泡细胞凋亡指数明显增高（P〈0.05）,MPO活性明显减低（P〈0.05）。体外实验中,青蒿素组胰腺腺泡细胞凋亡指数及caspase-3活性较胰腺炎组明显增高（P〈0.05）,培养液中的LDH和AMS活性也明显降低（P〈0.05）。结论青蒿素可促进大鼠急性胰腺炎胰腺腺泡细胞凋亡,减少胰酶释放及中性粒细胞激活,可减轻急性胰腺炎严重程度。     

白介素-1α基因多态与阿尔茨海默病及血管性痴呆的关系

目的 研究中国汉族人群中白介素-1α基因(IL-1α多态与阿尔茨海默病及血管性痴呆的关系。方法 随机选取125名阿尔茨海默病患者、70名血管性痴呆患者和93名对照人群，用PCR(聚合酶链式反应)和RFLP(限制性片段长度多态性1方法，分析受检者的IL-1α、载脂蛋白E(APOE)基因型。结果 IL-1α等位基因在三组中差异无显著性区别。占主导地位是IL-1α等位基因(约90％)。APOE4等位基因在AD患者组中过表达。APOE4等位基因不影响IL1-1αd基因型或等位基因的分布频率。IL-1α等位基因，特别是TT纯合子，低于白种人，或许可解释白介素-1α基因(IL-1α多态与汉族AD无关。结论 IL-1α等位基因的出现不能被用来作为区分AD、VD和健康对照人群的标识。     

病毒感染与北方低发区鼻咽癌发生关系的初探

目的 了解ＥＢ病毒、人乳头瘤病毒１６／１８型及人巨细胞病毒与北方低发区鼻咽癌病因的关系。方法 采用ＰＣＲ技术检测３７例石蜡包埋的鼻咽癌组织及２０例鼻咽慢性增生组织中３种病毒的特异性基因片段。结果 ＥＢ病毒基因阳性检出率为８３．７８％,其中Ａ型７５．６８％,Ｂ型８．１０％,无复合感染,两型比较有显著差异;ＨＰＶ－１６型基因检出率为８．１０％;但ＨＰＶ－１８型及ＨＣＭＶ基因均未检出。对照组中３种病毒的     

聚合酶链反应检测三种病毒感染的回顾性分析

人乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒(ＨＳＶ2)、巨细胞病毒(ＣＭＶ)是3种常见的引起性传播疾病的病原,临床表现为尖锐湿疣、生殖器疱疹、人工流产及其后遗症。近年来这3种病毒在我国人群中的感染率不断增加。我们用聚合酶链反应(ＰＣＲ)筛查了100例妇科门诊的病人,分析病毒感染与宫颈及卵巢肿瘤的关系。全部病例选自1998年3月至12月间来哈医大附属一院妇科门诊就医的100名患者,年龄18～50岁,平均28岁。以无菌棉拭在宫颈口或外阴患处涂取少量分泌物,洗脱于1ｍｌ生理盐水中,15000ｒ/ｍｉｎ离心10ｍｉｎ,向沉淀中加入100μｌ裂解液(10ｍｍｏｌ/ＬＴｉ…     

二氢青蒿素对胰腺癌生长的抑制作用

Objective To investigate the anti-tumor activity of dihydroartemisinin in pancreatic cancer in vitro and in vivo. Methods For cultured cells,cell growth was determined by the MTT assay and apoptosis was evaluated by flow cytometry analysis stained with Annexin V-FITG/PI. The protein expression in BxPC-3 cells was analyzed by Western blot assay. BxPC-3 cells were injected subcutaneously into nude mice to establish pancreatic xenograft tumors and the tumor volume was monitored after exposure to dihydroartemisinin. Ki-67 staining and TUNEL assay were used to assess tumor cell proliferation and apoptosis in tumor tissue. Results After treatment by dihydroartemisinin in vitro, the proliferative inhibition rates of pancreatic cancer cells BxPC-3 and AsPC-1 reached up to (76.2 ± 3.5) % and (79.5 ± 2.9) %, and the apoptosis rates were up to (55.5 ± 3.2)% and (40.0 ± 3.5)%, the differences were significantly (P ＜ 0.01) compared with control [(2.0 ± 1.3) % and (0.9 ± 0.4) %]. Dihydroartemisinin inhibited the growth of pancreatic xenograft tumors in nude mice. The proliferation index and apoptusis index were (49.1 ± 3.9)% and (50.2 ± 4.4)% respectively in dihydroarternisinin 50 mg/kg treatment group, compared to those of (72.1 ± 3.3) % and (9.4 ± 2.9) % in control, the differences were significantly (P ＜0.01). Western blot assay indicated that dihydroartemisinin up-regulates expression of proliferation-associated protein p21WAF1 and down-regulates expression of PCNA, increases expression of apoptosis-associated protein Bax and decreases expression of Bcl-2 and activates caspase-9 in BxPC-3 cells. Conclusions Dihydroartemisinin exerts anti-tumor activity in pancreatic cancer both in vitro and in vivo by proliferation inhibition and apoptusis induction. Dihydroartemisinin can be used as a potential anti-tumor drug in pancreatic cancer.     

人白细胞介素-10/人肝再生增强因子融合基因的构建及在肝细胞中的表达

目的 利用人自细胞介索(IL)-10和肝再生增强因子(ALP)构建融合基因hIL-10／ALR和真核表达载体,验证其在肝细胞中的表达。方法 以富含疏水氨基酸(Gly-Ser)n的相应寡核苷酸接头序列为媒介,通过hIL-10和hALR克隆载体构建真核质粒表达载体pcDNA3hIL-10／ALR,纯化后转染L02肝细胞,并以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测其表达。结果 成功构建hIL-10／ALR融合基因,其真核表达载体pcDNA3hIL-10／ALR可在L02肝细胞中有效表达。结论通过融合基因转导方法可能实现IL-10和ALR的各自功能,为肝纤维化、肝硬变的基因治疗探索有效手段。