抗HIV-1核心抗原p24单克隆抗体的制备及特性的初步鉴定

目的 :建立分泌抗HIV 1p2 4单克隆抗体 (mAb)的杂交瘤细胞株 ,并对其特性进行初步鉴定。方法 :以纯化的基因工程制备的p2 4抗原免疫BALB/c小鼠 ,取免疫小鼠的脾细胞与Sp2 /0骨髓瘤细胞融合 ,经HAT、HT选择培养及有限稀释法进行克隆化后 ,用间接ELISA法及Dotblot对其进行筛选和特性鉴定。结果 :筛选到 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,其腹水效价为 1×10 -5,亲和力为 1.7× 10 4～ 1.8×10 4mol/L ,mAb的Ig亚类均为IgG1。两株mAb与HBcAg、HCVRNA阳性血清及HIVgp4 1等均无交叉反应 ,只与HIV 1p2 4抗原阳性血清产生特异反应。结论 :成功地建立了 2株可分泌抗HIV 1p2 4mAb的杂交瘤细胞 ,为进一步研制HIV 1p2 4抗原的ELISA检测试剂盒奠定了基础     

梅毒快速血浆反应素试剂(RPR)的研制和应用

1964年我国已基本上消灭性病,但近年来,随着对外交流的增加,性病又开始在我国蔓延。梅毒是主要的性传播疾病之一,其发病率正     

人工合成肽抗原检测戊型肝炎病毒IgM方法的建立与应用

本课题采用合成多肽抗原建立了检测抗戊型肝炎病毒(HEV)-IgM的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法,成本低、操作简便、快速、重复性好、特异性强。与抗甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)的IgM抗体无交叉反应,排除了RF的干扰,且可被β-     

检测抗丙型肝炎病毒总抗体的双抗原夹心法的建立

以丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）结构区和非结构区基因工程表达抗原及人工合成多肽包被酶标板，用辣根过氧化物酶标记抗原，建立了检测血清中抗－ＨＣＶ总抗体的双抗原夹心法。与普遍采用的检测抗－ＨＣＶＩｇＧ的间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）比较，其灵敏度（１∶１２８）稍高于间接法（１∶６４），特异性相同，均为１００％。该法可同时检测抗－ＨＣＶ各类抗体，使检出率提高１０％。     

人源抗HIV-1 gp120趋化蛋白受体结合位点Fab单克隆抗体基因的获得

目的：筛选人源抗HIV－1 gp120趋化蛋白受体结合位点噬菌体Fab单克隆抗体基因。方法：根据HIV－1 gp120趋化蛋白受体结合位点的氨基酸序列合成23肽，并以此为固相抗原从HIV－1噬菌体Fab抗体库筛选阳性克隆，并进行鉴定及序列测定。结果：获得了1株抗HIV－1 gp120趋化蛋白受体结合位点的人源Fab抗体克隆，具有较高的亲和力、特异性和抑制率，序列测定及分析显示该抗体属IgG I亚类，κ型，重、轻链可变区分别属VhⅢ和VκⅢ基因家族。结论：成功地获得了人源抗HIV－1 gp120趋化蛋白受体结合位点噬菌体Fab单克隆抗体基因。     

庚型肝炎病毒多聚蛋白的翻译及基因变异研究进展

庚型肝炎病毒(HGV)是单股正链RNA病毒,其基因结构及保守序列类似于黄病毒科的成员。HGV基因组全长约9400个核苷酸(nt),与HCV相似,在5’端和3’端各有一段非翻译区(UTR),一个大开放读码框架(ORF)编码约2900个氨基酸的多聚蛋白前体,其氨基端(N端)和羧基端(C端)分别为结构蛋白(C、E1、E2)和非结构蛋白(NS2、NS3、NS4a/b、NS5a/b)。NS3区编码丝蛋白酶、解旋酶,NS5区编码RNA聚合酶。HGV与HCV全序列氨     

庚型肝炎病毒感染的初步研究

1995年Simons和Yoshiba分别报道,在非A-E型肝炎患者血清中检测出一种与肝炎有关的新的病毒RNA序列,即GBV-C RNA。并经基因克隆和DNA测序确定了其核酸及蛋白质一级结构。该病毒与Simons等在实验感染肝炎病人血清的狨猴(tamarin)血液中分离出的二种新病毒GBV-A和GBV-B不同,但有     

HCV特异性IgM抗体与HCV RNA及其与肝病活动的相关性研究

丙型肝炎病毒 (ｈｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ)克隆的成功 ,使ＨＣＶ感染的实验室诊断得以迅速发展 ,临床多检测抗ＨＣＶ ＩｇＧ ,并将其作为献血员筛选的一个指标 ,但由于抗ＨＣＶ ＩｇＧ为非中和性抗体 ,它的存在仅反映有过ＨＣＶ的感染 ,与病毒复制及有无病毒血症无关 ,也不能反映肝病是否处于活动期。而ＩｇＭ抗体在慢性病毒感染中常持续阳性 ,并提示病毒存在且继续复制[1] 。为探讨ＨＣＶ ＩｇＭ抗体存在的意义 ,我们研究了抗ＨＣＶ ＩｇＭ抗体与ＨＣＶ存在及肝病活动的关系。1　材料与方法1.1　主要试剂逆转录酶 (ＡＭＶ )、Ｔａｑ…     

丙型肝炎病毒特异性核酶细胞内切割活性的研究

设计合成针对丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心区基因（第３８４－３８６ｎｔ）的锤头状核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅ,Ｒｚ）,从丙型肝炎病人的血清中提取ＨＣＶ ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ扩增ＨＣＶ基因片段（４１２ｂｐ）,作为核酶的靶序列,将核酶基因和ＨＣＶ靶基因片段分别克隆人反转录病毒载体ｐＬＸＮ中构建重组载体,并用电击法分别转入包装细胞ＲＡ３１７中,将上述两种细胞释放到培养液中的含Ｒｚ的假病毒颗粒和含ＨＣＶ靶基因的假     

15例庚型肝炎临床分析

本文分析15例(男性8例，女性7例，平均年龄44.53岁)庚型肝炎患者临床情况。临床分析表明，庚型肝炎临床可表现为急性肝炎、慢性肝炎、慢性重型肝炎及肝硬变。15例中4例有输血史，2例有手术史。临床分析提示。庚型肝炎在我国不少见；且可能是除HBV、HCV外引起慢性肝炎的又一重要病毒。