人内皮细胞特异性分子-1表达载体的构建、体外表达及初步纯化

目的探讨人内皮细胞特异性分子-1(hESM-1)表达载体的构建、体外表达及表达产物的初步纯化.方法从人脐静脉内皮细胞中提取总RNA,用反转录-PCR扩增出hESM-1的cDNA.插人质粒pET-28b中构建成表达载体,转化人大肠杆菌BL-21,经IPTG诱导表达,表达产物用电洗脱的方法初步纯化.结果经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为含hESM-1的重组质粒,经SDS-PAGE分析证实获得产物为分子量23 808 u的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的24%.结论成功构建了重组hESM-1表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,为进一步研究及临床应用奠定了良好基础.     

克隆化基因的真核细胞转染

真核转染技术是将克隆化的外源基因通过某种特定的手段导入真核细胞的一种方法。可以用来导入高效表达的蛋白 ,研究其结构或生化特性 ,也可以用于研究基因表达调控的机制等。目前真核转染技术已经用于基因的结构与功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物等方面的研究。根据研究目的不同 ,基因转染有瞬时转染和稳定转染两种。瞬时转染是在转染后不对转移进去的目的基因进行筛选 ,被转染的群体细胞瞬时表达效率取决于细胞摄入转染DNA的数量、基因的拷贝数和每一基因的表达水平。稳定转染是在转染后进行选择 ,分离出外源基因稳定整…     

玻璃离子体水门汀与牙齿粘接机理的实验研究

采用红外光谱分析手段。研究玻璃离子体水门汀(GIC)与牙齿的粘接机理。实验结果证实,GIC对牙齿具有化学性粘接。GIC中的羧酸根离子可以与牙齿中的钙离子形成离子键结合,生成羧酸盐;与有机质中的氨基、羟基则以氢键结合。     

内皮细胞特异性分子-1在肺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨内皮细胞特异性分子1(endocan)的表达与肺癌临床病理特征的关系及其临床意义。方法用免疫组化S-P法检测62例肺癌组织、15例良性肺疾病和5例正常肺组织中endocan的表达。结果endocan在肺癌组织血管内皮细胞中的高表达率70.97%(44/62),良性肺疾病和正常肺组织中血管内皮细胞的高表达率5.00%(1/20),差异有显著性(P<0.05);在有淋巴结转移的非小细胞肺癌组织中血管内皮细胞endocan高表达率88.89%(32/36),明显高于无淋巴结转移组的高表达率35.29%(6/17)(P<0.05);非小细胞肺癌(NSCLC)细胞胞质中endocan的高表达率为62.26%(33/53),且随分化程度降低而增高,高、中分化非小细胞肺癌细胞胞质的高表达率11.11%(2/18),低于低分化非小细胞肺癌细胞胞质的高表达率88.57%(31/35)(P<0.05)。而在小细胞肺癌组织细胞胞质中无表达。结论肺癌组织血管内皮细胞endocan的表达增高与淋巴结转移有关;非小细胞肺癌细胞胞质endocan的表达与肿瘤细胞分化有关。     

高脂血症模型兔血清肌酸激酶活性和C反应蛋白含量的动态变化

目的分析兔饮食性高脂血症形成过程中血清肌酸激酶活性和C反应蛋白含量的动态变化。方法高胆固醇饮食诱发兔高脂血症,检测高胆固醇饮食7、14、17、21、25、28d兔血清总胆固醇(CHO)、甘油三酯(TG)及肌酸激酶(CK)和C反应蛋白(CRP)的变化。结果成功建立高脂血症兔模型,大耳白兔在喂食高胆固醇饲料7、14、17、21、25、28d后血液中CHO和TG浓度逐渐升高(P<0.05),CK活性和CRP含量随着高脂血症的进程而逐渐升高,变化有显著性差异(P<0.05)。结论提示兔血清CK活性和CRP含量与高脂血症的进程相关。     

4-HPR体外诱导A549细胞凋亡与Bcl-2家族蛋白相关性研究

目的研究4-HPR对肺腺癌细胞A549体外生长的影响及机制的初步探讨。方法MTT法观察4-HPR对肺腺癌细胞株A549的生长抑制作用,流式细胞术观察4-HPR诱导A549细胞凋亡作用和对细胞周期的影响,Western blot分析凋亡相关蛋白表达。结果4-HPR抑制A549的增殖呈剂量依赖性;4-HPR诱导A549细胞凋亡,凋亡过程伴随Bcl-2、Bcl-xS/L表达下降,而Caspase-3、Caspase-9的表达无明显变化。结论4-HPR可明显抑制肺腺癌细胞的增殖,通过降低Bcl-2和Bcl-xS/L促进A549细胞凋亡,为进一步探讨4-HPR治疗肺腺癌的机制提供实验依据。     

糖尿病大鼠下颌下腺内水通道蛋白-1和5表达变化及意义

目的:观察水通道蛋白-1(AQP1)和水通道蛋白-5(AQP5)在糖尿病大鼠下颌下腺内表达变化,探讨糖尿病患者口渴症状的发生机制.方法:SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组、治疗组.取大鼠下颌下腺,分别进行H-E染色、免疫组织化学显色(SP法)和计算机图像分析.结果:对照组和治疗组的血糖分别与糖尿病组血糖比较,均有差异;与...     

食管鳞状细胞癌中紧密连接蛋白occludin、ZO-1的表达及其临床意义

目的探讨紧密连接蛋白occludin及ZO-1在食管鳞状细胞癌及手术切缘正常食管黏膜组织中的表达及其临床意义。方法采用组织芯片和免疫组化法检测49例食管鳞状细胞癌患者的癌组织及手术切缘正常食管黏膜组织(距肿瘤组织>5 cm)中occludin和ZO-1的表达,分析食管鳞状细胞癌癌组织中occludin、ZO-1表达与肿瘤的增殖、侵袭和转移之间的关系。结果食管鳞状细胞癌组织中occludin及ZO-1的阳性表达明显低于手术切缘正常食管粘膜组织(P<0.01),且癌组织中occludin、ZO-1的表达与其分化程度及淋巴结转移有关(P<0.05)。结论食管鳞状细胞癌的occludin和ZO-1的表达下调或缺失与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关,在食管癌的进展中起重要作用。     

褪黑素对高脂饮食小鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨高脂血症对小鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响及褪黑素(MT)的干预机制。方法将12只载脂蛋白E(ApoE)基因敲除的C57BL/6J雄性小鼠随机均分成高脂血症组、MT处理组,另以6只野生型C57BL/6J雄性小鼠作为对照组。12周后摘除眼球取血,测量血清胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c);免疫组化法检测Bcl-2和Bax在睾丸组织的表达。结果①高脂血症组血清CHO和LDL-c均明显高于对照组(P<0.01),高脂血症模型构建成功;与高脂血症组相比,MT处理组血清LDL-c明显降低(P<0.05),CHO无明显变化。②Bcl-2和Bax在3组小鼠睾丸组织中均有表达。与对照组相比,高脂血症组Bcl-2表达下调,Bax表达上调;与高脂血症组相比,MT处理组Bcl-2表达上调,Bax表达下调(P<0.01)。结论 Bcl-2和Bax参与高脂血症引起的睾丸细胞凋亡的调控。MT可以促进Bcl-2表达,抑制Bax表达,对高脂血症引起的睾丸损伤有一定的保护作用。     

胺碘酮治疗严重心律失常28例

目的探讨胺碘酮治疗严重心律失常的疗效及副作用。方法 28例各种类型的严重室性心律失常患者给予胺碘酮治疗,观察心室率变化。结果 28例患者中23例心室率得以有效治疗或转为窦性心律,有效率82.1%。其中3例出现严重窦性心动过缓(心率<50次/分)。结论胺碘酮治疗各种类型的严重室性心律失常疗效好,副作用小,安全性高。