阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白表达的影响

目的探讨阿伐他汀对高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠肝脏骨桥蛋白(OPN)表达的影响。方法18只4周龄ApoE基因敲除小鼠,随机分为正常组、高胆固醇组、高胆固醇 阿伐他汀组。高胆固醇 阿伐他汀组给予阿伐他汀5mg/(kg·d),12周后获取血和肝脏。分析血清胆固醇和低密度脂蛋白浓度。肝脏组织切片用于HE染色以观察肝脏组织学病变;应用免疫组化PV法检测肝脏组织中OPN的表达;从冰冻肝脏组织中提取蛋白,用Western blot方法检测OPN变化。结果阿伐他汀有显著降血清胆固醇和抑制肝脏的脂肪病变的作用;免疫组织化学和Western blot检测结果显示,高胆固醇 阿伐他汀组OPN表达比高胆固醇组显著降低(P<0.05)。结论阿伐他汀可降低高胆固醇血症ApoE基因敲除小鼠血清胆固醇浓度,抑制肝脂肪变性,下调OPN的表达。     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对K562细胞分化和细胞周期的影响

目的本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(4-amino-2-trifluoromethyl-phenyl retinate,ATPR)对K562细胞株的抑制增殖和诱导分化活性并对其机制进行研究。方法ATPR作用于K562细胞3d后,通过MTT法检测细胞的增殖,NBT还原实验法分析细胞的分化指标,瑞氏染色法在油镜下观察加药前后细胞形态学变化,FCM检测分析细胞周期,RT-PCR法检测cyclinE、cyclinD1、CDK2、CDK4、CDK6、p21cip1、p27kip1、p57kip2和PCNA mRNA的变化情况。Western blot法检测cyclin D1和CDK4蛋白表达的改变。结果ATPR呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖的作用。ATPR诱导分化活性表现为NBT阳性细胞率增加,油镜下观察K562细胞有分化成熟的改变,G0/G1期细胞表达量增加,S期细胞表达量减少,呈G1期阻滞。RT-PCR检测发现cyclin E、cyclin D1、CDK2、CDK4、CDK6表达减少,PC-NA、P21cip1、P27kip1改变不明显,P57kip2表达增加。Western blot检测cyclin D1和CDK4蛋白表达减少。结论ATPR有较强的抑制K562细胞增殖并诱导其分化的活性,并通过上调P57kip2的表达,抑制Cyclin-CDK激酶复合物,发挥细胞周期阻滞的作用。     

顺铂诱导膀胱癌细胞凋亡及其与凋亡相关蛋白的关系

目的　探讨CDDP诱导Scaber凋亡特点和与凋亡相关蛋白表达的关系。方法　选用CDDP诱导膀胱癌细胞株Scaber凋亡 ,运用HE、TUNEL、透射电镜等方法分别检测细胞凋亡、观察凋亡的形态变化特点及应用S P免疫组化方法检测凋亡相关蛋白bcl 2、Bax、caspase 3表达的动态变化。结果　①顺铂可诱导Scaber细胞凋亡 ,其诱导凋亡作用在一定范围内具有时间及剂量依赖性 ;②CDDP诱导Scaber细胞凋亡时 ,bcl 2降低、Bax增加 ,同时出现了bcl 2的核周及核内移位 ;③不同浓度的CDDP可使Scaber细胞中caspase 3的表达增强 ,并具有时间及剂量的依赖性。结论　顺铂可诱导Scaber细胞凋亡 ,CDDP诱导Scaber细胞凋亡与bcl 2降低、Bax增加及bcl 2移位有关 ;CDDP诱导Scaber细胞凋亡是Caspase 3依赖性的。     

4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯诱导K562细胞分化的作用及细胞周期阻滞的作用机制

目的：本研究探讨新型维甲酸衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯（4-amino-2-trifluoromethyl—phenylretinate,ATPR）对K562细胞株的抑制增殖的和诱导分化活性并对其发生的细胞周期G1期阻滞的机制进行研究。方法：ATPR作用于K562细胞3d后,通过MTT法检测细胞的增殖,NBT还原实验法分析细胞的分化指标,FCM检测分析细胞周期和细胞表面分化抗原CD45、CD73、CD117变化。RT—PCR法检测细胞周期蛋白cyclinE、cyclinD1,细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2、CDK4、CDK6,周期蛋白抑制蛋白／激酶抑制蛋白（CIP／KIP）P21（cipl）、P27（kipl）、P57（kip2）mRNA的变化情况。WesternBlot法检测cyclinDl和CDK4蛋白表达的改变。结果：ATPR呈浓度依赖性抑制K562细胞增殖的作用。     

低氧降低肺癌A549细胞对培美曲塞的药物敏感性

目的研究低氧环境下非小细胞肺癌A549细胞对化疗药物培美曲塞(Pe)敏感性变化的影响。方法将A549细胞分组培养,分为常氧对照组、常氧溶剂组、常氧加药组、低氧细胞组、低氧溶剂组、低氧加药组。用MTT法检测Pe对A549细胞增殖能力的影响,并筛选出Pe的适宜实验浓度;用Hoechst染色观察6组细胞凋亡情况;用Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和p53的表达情况。结果 MTT结果显示,与常氧对照组相比,经Pe处理后的细胞抑制率逐渐升高(P<0.05),A549细胞的抑制率与Pe作用时间和浓度呈正比。Hochst染色结果显示,与常氧对照组相比,常氧加药组的细胞凋亡率增高(P<0.05);而与常氧加药组相比,低氧加药组的细胞凋亡率降低(P<0.05)。Western blot实验显示,与常氧对照组相比,常氧加药组的p53蛋白表达增加(P<0.05),Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05),低氧加药组的p53蛋白表达变化不明显,Bcl-2蛋白表达减少(P<0.05);与低氧对照组相比,低氧加药组的p53蛋白表达变化不明显,而Bcl-2...     

ATRA通过抑制铁死亡缓解脂多糖诱导的小鼠急性心肌损伤

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)对脂多糖(LPS)诱导C57BL/6小鼠急性心肌损伤的影响及机制。方法 20只C57BL/6雄性小鼠随机均分成正常组、模型组、ATRA组、ferrostatin-1组。ATRA组和ferrostatin-1组小鼠分别腹腔注射ATRA[15 mg/kg·d]、ferrostatin-1[2 mg/(kg·d)],正常组和模型组给予溶剂，持续给药一周后，模型组、ATRA组、ferrostatin-1组腹腔注射LPS (6 mg/kg), 6 h后处死所有小鼠。检测小鼠血清中丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量；qPCR检测心脏组织IL-6、TNF-α的mRNA水平；苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠心脏组织变化；透射电子显微镜(TEM)观察小鼠心肌线粒体的结构；蛋白质印迹法(Western blot)检测铁死亡标志物[谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)、铁蛋白重链1(FTH1)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)]以及相关调控蛋白[核因子E2相关因子2(NRF2)、kelch样ECH关联蛋白1(KEAP1)]...