医学生物化学实验课程改革探讨

生物化学实验是生化课程教学的重要组成部分,如何深化实验教学改革,适应现代生物学科的快速发展和社会对高素质医学人才的需求是高等医学院校共同面临的课题.本文从改革生化实验课程教学观念、教学方式、教学内容、教学时间四个方面进行了探讨,旨在为医学院校生化实验教学改革探索有效的解决途径.     

恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1mRNA及其蛋白的表达

目的探讨恶性淋巴瘤组织中内皮细胞特异性分子-1(ESM-1)mRNA和蛋白的表达及其与临床病理特征的关系.方法采用免疫组化S-P法、原位杂交方法对58例淋巴瘤组织和10例正常淋巴结的ESM-1蛋白及mRNA进行检测.结果 ESM-1蛋白及 mRNA 在淋巴瘤组织中均有表达,在血管中较少表达.结论 ESM-1分子可能参与了淋巴瘤的发生发展过程.     

糖尿病大鼠海马CA1区超微结构观察

目的 观察链脲佐菌素（streptozotocin,STZ）糖尿病大鼠海马CA1区超微结构变化。方法 SD雄性大鼠18只随机分为实验组、治疗组及对照组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测血糖,并进行灌注固定,应用透射电镜观察海马CA1区超微结构。结果 电镜下可见糖尿病大鼠海马CA1区神经元细胞核出现核沟,染色质浓缩并聚集;粗面内质网扩张、排列紊乱和脱颗粒;线粒体肿胀,部分空泡变性;髓鞘板层排列疏松,间隙加大．内部轴突砷经丝松解、弯曲;突触结构分界不清,突触小泡稀疏衙疗组超微结构与对照组比较无明显病变,结论 糖尿病时海马组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨海马结构与糖尿病引发学习和记忆功能障碍的关系提供了形态学依据。     

链脲佐菌素糖尿病大鼠下颌下腺超微结构观察

目的　观察链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠下颌下腺超微结构变化。方法　SD雄性大鼠18只,随机分为对照组、实验组及治疗组,用STZ复制糖尿病动物模型,饲养12周后测体重和血糖,取材制片应用透射电镜观察其超微结构变化。结果　与对照组体重[ ( 367 .33±26. 73 )g]和血糖[ (6 .49±0 .79 ) mmol/L]比较:实验组体重[ ( 156. 50±10 .13)g]减轻、血糖[ (27 .79±9 .28)mmol/L]升高,有显著性差异(P<0 .01);治疗组体重[ (354 .67±31 .94)g]、血糖[ (8. 75±2 .56)mmol/L]无显著性差异(P>0 .05)。与对照组比较,实验组下颌下腺电镜下主要变化为为:细胞核固缩,染色质致密;线粒体肿胀或空泡变性、嵴断裂;粗面内质网囊状扩张,断裂成短棒状,脱颗粒等。治疗组无明显改变。结论　糖尿病可导致下颌下腺组织出现一系列超微病理改变,为进一步探讨糖尿病发生机制提供了形态学依据。     

核酸探针的制备

本实验室用地高辛-dUTP随机引物方法标记人内皮细胞特异性分子(human endothelial specific molecular-1,hESM-1)cDNA探针,并应用于ESM-1基因在肾癌中mRNA转录的检测。现报道如下。     

CD44v6在原发性肝癌中的表达及其意义

目的探讨CD44v6在肝癌中的表达及其在肝癌转移中的作用.方法采用免疫组织化学技术(S-P)检测69例肝癌组织中CD44v6的表达情况.结果①CD44v6主要定位于癌细胞的胞膜,部分胞质同时出现阳性表达;CD44v6在69例肝癌组织中阳性表达率为59.4%(41/69);②在发生转移的肝癌组织中CD44v6阳性表达率为76.3%(29/38),高于无转移的肝癌组织中CD44v6(38.7%,12/31)阳性表达率,差异具有显著性意义,P＜0.05;③CD44v6的表达与肿瘤的大小、AFP水平、有无HBV感染、肿瘤分化、性别及年龄等均无相关性,但和肿瘤侵袭转移的发生有相关性(P＜0.005).结论 CD44v6的表达与肝癌侵袭转移的发生有密切关系,其阳性表达对预测肝癌是否发生转移具有临床意义.     

褪黑素对肝癌细胞系HepG2的增殖抑制作用及其与G蛋白-cAMP信号途径的关系

目的研究褪黑素(melatonin,MT)对肝癌细胞系HepG2细胞的增殖抑制作用以及其对G蛋白-cAMP通路的影响。方法采用MTT法检测MT对HepG2细胞生长的影响,放免法检测细胞内cAMP水平,Westernblot法检测抑制型G蛋白α1(Gαi1)、抑制型G蛋白α2(Gαi2)、抑制型G蛋白α3(Gαi3)、刺激型G蛋白(Gαs)表达水平。结果MTT检测结果表明,MT在10-8～10-5mol.L-1的浓度范围内,72h共培养后,可有效抑制HepG2细胞增殖,且呈一定的时间浓度依赖关系。为进一步研究MT细胞增殖抑制作用与G蛋白-cAMP信号通路的关系,检测浓度为10-5mol.L-1的MT作用HepG2细胞后0、15、30、45、60、90、120min后Gαi1、Gαi2、Gαi3和Gαs和细胞内cAMP水平变化,结果发现MT作用HepG2细胞30min后可明显下调Gαi1、Gαi2、Gαi3的表达水平,但对Gαs表达无明显影响,同时发现MT处理后cAMP水平有下降的趋势,但是没有统计学意义。结论MT呈时间浓度依赖性的抑制体外培养的HepG2细胞生长,其机制可能与影响G蛋白-cAMP信号通路有关。     

胃肠富集Krüppel样因子在人结直肠肿瘤中的表达

目的探讨人结直肠肿瘤组织中胃肠富集Kriippel样因子（KLF4）的表达及其意义。方法采用组织微阵列结合免疫组织化学染色和Western blot检测经病理专家确认40例癌旁正常结直肠黏膜、7例腺瘤和77例结直肠癌组织中KLF4蛋白的表达，分析KLF4表达与临床病理因素间的关系。结果KLF4在结直肠肿瘤组织中的表达率为76．62％（59／77），其中弱阳性率53．25％（41／77），强阳性率为23．38％（18／77），癌旁形态学正常的结直肠黏膜可见KLF4高表达；强阳性率在正常黏膜、腺瘤、高分化、中分化癌中分别为57．5％、57．14％、37．5％、21．4％，低分化癌无强阳性表达，其表达率与肿瘤分化程度显著相关（P〈0．01）。此外，KLF4表达与患者性别、年龄、肿瘤位置、浸润深度、是否转移、大体类型以及临床Dukes分期无显著相关（P〉0．05）。结论KLF4在结直肠肿瘤中表达下调。与其病理分级呈负相关，提示KLF4可能参与了结直肠肿瘤的发生及发展过程。     

载脂蛋白对某些中、老年心血管疾病的诊断价值

用单向免疫扩散法测定正常人96例和冠心病、高血压病、老年性主动脉瓣钙化及慢性胆囊炎患者共85例的血清载脂蛋白、TC、TG.HDL—C、LDL—C、VLDL—C。结果表明apo—AI的降低及apo—B值的升高不单是预测冠心病的指标,而且是预测动脉硬化的指标。apo—AI/apo—B比值的下降,与脂代谢紊乱有关或由其引起的疾病均可出现,因而血清载脂蛋白不能作为诊断冠心病的最好指标。     

骨桥蛋白与肿瘤发生及转移的关系研究进展

骨桥蛋白(OPN)是一种具有分泌性、粘附性、糖基化磷酸化蛋白，包含精氨酸一甘氨酸一天冬氨酸(RGD)的细胞结合序列，在许多细胞外基质蛋白能发现此序列。自1979以来OPN被认为是恶性转化的分泌性蛋白，与许多肿瘤的发生、转移、预后相关。对OPN结构和功能以及参与细胞信号转导机制的进一步认识，为肿瘤的诊断和治疗提供了新思路。