4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对肝癌细胞株HepG2增殖凋亡分化的影响

目的 研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物(4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯)对人肝癌细胞株HepG2体外增殖、凋亡及分化情况的影响.方法 3种浓度(1、5、10 μmol/L)的ATRA衍生物分别处理HepG2细胞,1、2、3、7d后用MTT法检测4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对HepG2细胞增殖的影响;酶动力学法检测γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)比活性和甲胎蛋白(AFP)分泌量变化;流式细胞术分析细胞周期及凋亡情况;Western blot检测HepG2细胞中凋亡相关蛋白的表达量.结果 10 μmol/L的4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯可明显诱导HepG2细胞凋亡,凋亡率达到49%,并且使代表肝细胞恶变的γ-GT比活性、AFP分泌量明显下降,Western blot显示4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯显著抑制Bcl-2、Bcl-xS/L和p-Erk表达.结论 4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯是肝癌细胞HepG2有效的分化诱导剂,并明显促进肝癌细胞凋亡.     

维甲酸类衍生物诱导K562细胞分化的活性筛选

目的 探讨维甲酸类衍生物对白血病细胞株K562细胞的抑制增殖和诱导分化活性,以寻找新的具有抗瘤活性的药物.方法 在体外通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)试验法检测其对细胞生长抑制的作用;瑞氏染色法观察细胞形态学改变;硝基四唑氮蓝(NBT)还原实验法分析细胞的分化指标;利用流式细胞术检测细胞表面分化抗原及细胞周期的变化情况.结果 维甲酸类衍生物作用3 d后,细胞增殖抑制率最高可达到 57.74%,IC50为2.82E-05 ;油镜下观察发现细胞形态学趋向成熟,NBT还原实验也表明维甲酸类衍生物具有诱导K562细胞株分化成熟的作用;细胞周期分析显示细胞表面分化抗原CD11b表达量增加,G0/G1期细胞增加,而S期减少.结论维甲酸类衍生物对K562细胞具有诱导分化并对其克隆生长有抑制作用,其中以2a-03、4a-01、4a-02和5a-02的作用较为突出,进一步研究开发有一定的价值.     

p16／MTSI基因缺失在骨髓增生异常综合征发病中作用的研究

目的 探讨多肿瘤抑制基因(p16／MTSI)缺失与骨髓增生异常综合征(MDS)发病的关系。方法 采用PCR技术．对30例MDS的p16／MTSI基因缺失情况进行了分析。结果 30例MDS患者未见有p16基因缺失。结论 提示p16基因缺失和MDS的发病关系不大。     

全反式维甲酸及其衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯对A549细胞增殖和OPN表达的影响

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)及其新型衍生物4-氨基-2-三氟甲基苯基维甲酸酯(ATPR)对人肺腺癌细胞株A549增殖和骨桥蛋白(OPN)表达的影响及其相关性.方法 以A549细胞株为研究对象,分别予以不同浓度的ATRA及ATPR进行干预,应用四甲基偶氮唑蓝比色(MTT)法测定A549细胞的增殖情况;Western...     

限制性内切酶酶切及限制性内切酶酶切图谱分析

限制性核酸内切酶(restriction endonuclease)是一类能够识别DNA的特异序列并在识别位点剪切双链DNA的核酸内切酶。主要存在于原核生物中，大多数来自于细菌体内，与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制一修饰体系，限制外源DNA、保护内源DNA。1970年Smith等分离到第一种限     

血管新生与骨肿瘤发生及其治疗的分子机制

血管新生 (ａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓ)是指活体组织在已存在的微血管床上芽生 (ｓｐｒｏｕｔ ｉｎｇ)出新的以毛细血管为主的血管系统的过程。这是体内最为基本和重要的生理过程 ,也是维持机体稳定与完整性及组织和器官功能的重要方式。对血管新生的重要性的认识始于 2 0世纪 70年代初Ｆｏｌｋｍａｎ教授对肿瘤的研究。近年来 ,人们对血管新生调控因子如血管内皮细胞生长因子 (ｖａｓｃｕｌａｒｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ ,ＶＥＧＦ)家族、成纤维细胞生长因子 (ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＦＧＦ)…     

自血光量子疗法治疗兔脊髓损伤的脂质过氧化变化

在不同时间测定34只兔的脊髓和血液MDA,研究脊髓损伤和UBI治疗的脂质过氧化变化。结果发现,脊髓MDA是血液MDA的8倍,正常情况下脊髓MDA不受UBI影响。脊髓损伤后2h～2d骤然升高,3d～12d降低,但仍高于正常。UBI疗效非常显著,3d～12d已经正常或接近正常。血液MDA脊髓损伤后上升,但其升降幅度远不如脊髓MDA,UBI也未使其下降。实验提示,脊髓MDA能比较客观地反映脊髓局部的脂质过氧化,而血液MDA只能作为参数。UBI可以减轻继发性损伤中自由基介导的脂质过氧化,保护脊髓细胞和亚细胞的膜脂结构,达到恢复功能的目的。     

高脂血症大鼠下丘脑的超微结构变化

目的观察高脂血症大鼠下丘脑超微结构变化,为进一步探讨血脂代谢异常与中枢神经的内分泌关系提供形态学依据。方法实验组高脂饲料饲养6周测血脂,透射电镜观察下丘脑超微结构。结果实验组血清总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇升高明显(P<0.01),下丘脑粗面内质网囊状扩张、脱颗粒,高尔基复合体肿胀,极性消失。髓鞘板层松散,突触结构模糊,毛细血管内皮中细胞器改变等。尤以神经元内出现大量脂滴最为显著。结论高脂血症可诱导下丘脑超微结构改变。     

全反式维甲酸对早期动脉粥样硬化大鼠模型外周调节性T细胞与辅助性T细胞17平衡的影响

目的 建立早期动脉粥样硬化大鼠模型,并探讨其外周CD4+ CD25+调节性T细胞(Treg)与辅助性T细胞17(Th17)平衡变化及全反式维甲酸对平衡的影响.方法 50只8周龄SD大鼠,随机分为对照组、高脂组、免疫组、免疫高脂组以及全反式维甲酸组,对照组、免疫组予正常饲料,其他三组予高脂饲料,免疫组、免疫高脂组以及全反式维甲酸组注射卵清白蛋白进行初始免疫和强化免疫.全反式维甲酸组同时予以全反式维甲酸灌胃,16周后获取血和动脉.检测血清脂质变化,主动脉HE染色以观察动脉病变;流式细胞术检测各组大鼠外周血Treg和Th17细胞表达率,酶联免疫吸附法检测血清相关细胞因子水平.结果 成功建立早期动脉粥样硬化大鼠模型.组织形态学显示免疫高脂组内膜增生;与免疫高脂组比较,免疫组及全反式维甲酸组程度较轻,对照组及高脂组动脉完好.高脂组及免疫高脂组血清胆固醇和低密度脂蛋白较对照组、免疫组有显著增加(均P＜ 0.05),而全反式维甲酸组与其他各组比较无统计学差异.与对照组及高脂组相比,免疫组及免疫高脂组大鼠Treg细胞表达及白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β水平显著降低,而Th17细胞表达及IL-17、IL-6水平明显增高(均P＜0.05),全反式维甲酸组Treg表达及相关细胞因子水平与免疫高脂组比较显著升高,而Th17表达及相关因子水平明显降低(均P＜ 0.05).结论 免疫损伤结合高脂喂养可形成早期动脉粥样硬化大鼠模型,该模型存在Treg与Th17细胞平衡失调,全反式维甲酸可通过影响Th17/Treg平衡发挥抗动脉粥样硬化效应.     

乙型肝炎病毒前C区1896位点突变的PCR分析法

目的 分析乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）前Ｃ区突变与ＨＢＶ感染患者肝脏病变的关系，建立ＨＢＶ前Ｃ区１９８６位点突变的ＰＣＲ分析方法。方法 根据ＨＢＶ前Ｃ区ＤＮＡ序列，采用３′－碱基特异性聚合酶链反应分析ＨＢＶ第１８９６位核苷酸的突变，并检测了１２６例临床血清标本。结果 成功分析了ＨＢＶ前Ｃ区１８９６位点突变，１２６例临床标本突变株检出率为４７．２％。结论 本法操作简单，重复性好，为临床ＨＢＶ的研究和病情分