骨髓基质细胞促进人胚神经干细胞向神经元的分化

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对人胚神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法:采用机械法分离人胚NSCs,成球法进行传代培养,采用免疫荧光染色检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的表达鉴定NSCs。按培养方式不同,分为NSCs自然分化组、BMSCs和NSCs直接接触共培养组及Transwell共培养组,采用免疫细胞荧光法及免疫印迹法检测各组神经元和星形胶质细胞标志物的表达。结果:在直接接触共培养组和transwell共培养组中,免疫荧光染色显示神经元标志物NSE阳性细胞率明显高于自然分化组,而星形胶质细胞标志物GFAP阳性细胞率低于自然分化组。免疫印迹检测显示Transwell共培养组中NSE表达量显著高于自然分化组,而GFAP表达量低于自然分化组。结论:BMSCs具有促进NSCs向神经元分化的作用。     

吸入伤犬部分液体通气后血一氧化氮、超氧化物歧化酶及丙二醛的含量变化

目的：观察吸入性损伤及部分液体通气后血清一氧化氮（NO）,超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的变化情况,探讨部分液体通气对吸入性损伤的治疗作用。方法：制作8条犬吸入性损伤模型,将氟碳（FC－77）缓慢注入肺内,实施部分液体通气,然后分别于致伤前,致伤后2h及部分液体通气治疗90min后抽血测NO,SOD及MDA。结果：致伤后NO,MDA值明显升高而SOD值却明显下降,与致伤前相比,有显性差异（P＜0．05）;随着部分液体通气的进行,NO,SOD基本回复到致伤前的水平,与致伤前相比,差异不大（P＞0．05）;而MDA回复则较慢,虽比致伤后显下降（P＜0．05）,但仍高于致伤前水平（P＜0．05）。结论：部分液体通气可以通过抗脂质过氧化作用和减少体内一氧化氮同组织损伤,因而对吸入性损伤有一定的治疗作用。     

诱导性多能干细胞及其在脑血管病研究和治疗中的应用

诱导性多能干(induced pluripotent stem,iPS)细胞由已分化的体细胞重新编程而来,在生物学特性方面与胚胎干细胞极其相似.与胚胎干细胞相比,iPS细胞不受细胞来源、免疫排斥和伦理学等方面的限制,并具有保留特定个体基因等优势,为再生医学以及组织工程等领域提供了可能的细胞资源.文章主要介绍了iPS细胞及其在脑血管病研究和治疗中的应用.     

人诱导性多能干细胞向神经干细胞分化的方法探讨

目的:探讨人诱导性多能干细胞(iPS细胞)体外定向分化为神经干细胞(NSCs)的方法。方法:人iPS细胞悬浮培养4 d形成的拟胚体(EB)经维甲酸(RA)诱导4 d,诱导后的EB在无血清培养基中筛选并扩增培养。倒置显微镜下观察诱导后细胞的形态变化,RT-PCR检测iPS细胞多能性基因Nanog、Oct4和Sox2的表达,免疫荧光法检测NSCs特异性标志物Nestin、神经元标志物β-tubulinⅢ和神经胶质细胞标志物GFAP的表达。结果:(1)人iPS细胞在饲养层细胞上稳定传代,表达多能性基因Nanog、Oct4和Sox2,去除饲养层后悬浮培养能形成球形EB;(2)经RA诱导后的EB在无血清培养基中筛选培养第1 d贴壁生长,周围爬出细胞;第3 d,在高倍镜下可见中央聚集的细胞呈环形的rosette结构,rosette结构增多到第7 d达高峰。对照组未观察到rosette结构。随后大部分rosette细胞脱离瓶壁悬浮生长,形成神经球样克隆。免疫荧光显示神经球呈nestin阳性表达。贴壁培养的神经球能分化成β-tubulinШ和GFAP阳性细胞。结论:RA诱导结合无血清培养基筛选法能诱导iPS细胞高效分化为NSCs。     

人诱导性多能干细胞定向分化为神经干细胞的实验研究

目的 观察人诱导性多能干细胞（iPS细胞）定向分化为神经干细胞（NSCs）的潜能。方法 用维甲酸（RA）诱导人iPS细胞向NSCs分化。倒置显微镜下观察iPS细胞的形态变化,RT-PCR检测NANOG, OCT4, SOX2的表达;免疫组织化学方法检测NESTIN、SOX2、β-TUBULIN Ш和GFAP的表达。结果RA诱导后第4天,贴壁的拟胚体出现了早期神经祖细胞特有的神经管样结构并不断增多,细胞表达神经巢蛋白NESTIN,而对照组未观察到神经管样结构。神经管样结构内的细胞能分化为β-TUBULIN Ш阳性的神经元,但GFAP阳性的星形胶质细胞少见。结论 人iPS细胞具有定向分化为NSCs的潜能,并能模拟神经发育过程。     

稀土铈盐中和内毒素作用的初步探讨

内毒素是存在于革兰氏阴性杆菌胞壁中的脂多糖成分 ,是引起休克、脓毒症、成人呼吸窘迫症、多器官功能衰竭等疾病或病理过程的重要因素。如何防治内毒素性疾病 ,清除内毒素污染 ,一直是医学科学的重要任务。但迄今尚无一种能有效拮抗内毒素并广泛应用于临床的药物〔1〕。既往研究证实硝酸铈具有抑菌、中和烧伤“毒素”、调节细胞免疫功能的作用〔2 - 4〕。但其详细机制尚不清楚 ,本实验对硝酸铈可能具有结合内毒素作用进行了初步探讨。1　材料和方法1.1　试剂　硝酸铈 (分析纯 )。醋酸铈 ,江西省稀土研究所提供 ,硝酸钠 (分析纯 )。以上试剂…     

经自身肿瘤细胞激活的脑胶质瘤特异性CTL表型变化研究

肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)在动物肿瘤模型和临床应用的初步研究都获得了肯定疗效,与其它恶性肿瘤相比,胶质瘤浸润淋巴细胞(GIL)数量较少,为了获取GIL类似的抗肿瘤活性淋巴细胞,我们将经丝裂霉素C处理过的胶质瘤细胞与自体血淋巴细胞按一定比例进行混合培养5天后,收集存     

呼吸重症监护病房鲍曼不动杆菌下呼吸道感染的临床特征及影响因素初步分析

目的 回顾性分析呼吸重症监护病房(RICU)的鲍曼不动杆菌下呼吸道感染(AB-LRTI)流行特征,为防治RICU的AB-LRTI提供临床依据.方法 收集苏州大学附属第一医院RICU的204例细菌学为鲍曼不动杆菌(AB)的患者临床资料.细菌学标本源自痰液、支气管镜气管内吸出物、支气管肺泡灌洗液、胸腔积液及血液.AB定植据...     

镧抑制内毒素/脂多糖激活NF-κB信号通路的分子机制探讨

目的 分析镧调控内毒素/脂多糖(LPS)激活巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)信号通路的分子机制.方法 体外培养RAW264.7小鼠巨噬细胞,随机分为:LaCl3 +LPS组、LPS对照组、LaCl3对照组和空白对照组.免疫细胞化学法分析p65蛋白核转位情况;分别提取细胞总蛋白或胞核胞质蛋白,ELISA法测胞核蛋白中p65蛋白与靶基因结合的活性;Western blot分析胞核蛋白中p65蛋白、胞质中核因子抑制蛋白α(IκBα)和磷酸化的核因子抑制蛋白α(p-IκBα)水平,及总蛋白IKK激酶的表达和磷酸化情况.结果 镧可阻断LPS诱导p65蛋白活化,如抑制其核转位、降低其在胞核中的表达并减弱其与靶基因结合活性.镧可抑制LPS诱导的IκBα降解,但LPS诱导IKKβ磷酸化不能为镧所阻断,且p-IKKβ磷酸化IκBα的能力亦未受到镧的影响.结论 镧可通过抑制LPS激活巨噬细胞IκBα蛋白降解、p65蛋白核易位及与靶基因结合,从而抑制LPS诱导NF-κB信号通路的活化,这可能是镧抑制LPS活化NF-κB通路分子机制之一.     

尿道修复材料的研究及应用进展

尿道修复材料是尿道修复重建成败的关键,将尿道的修复材料分为自体组织材料、人工合成材料及组织工程化材料,从实验室和临床2方面对尿道修复材料的研究及应用进展进行综述。