稀土化合物氯化镧影响神经干细胞增殖的探讨

目的初步探讨稀土化合物氯化镧（Lanthanum chloride，LaCl3）对体外培养的NSCs增殖状况的影响。方法采用成球悬浮法分离培养小鼠神经干细胞（mNSCs）；将生长状态良好的第3代mNSCs分为空白对照组、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）组、LaCl3组，分别采用常规NSCs培养液、含10ng／ml TNF-α的NSCs培养液、含2.5μmol／L LaCl3的NSCs培养液培养NSCs 1-3天。采用神经球计数、神经球体积测量方法以及采用免疫荧光细胞化学方法检测与细胞增殖相关的指标（CyclinD1）来观察NSCs的增殖状况。结果神经球计数和神经球体积测量结果显示，TNF-α组和LaCl3组神经球数量分别为[（74.56±2.6）个／瓶]和[（62.32±2.8）个／瓶]，较空白对照组[（42.28±3.5）个／瓶]明显增多，P〈0.05；神经球体积分别为[（0.82±0.16）×10^6（μm^3）]和[（0.66±0.12）×10^6（μm^3）]，较对照组[（0.26±0.0.08）×10^6（μm^3）]明显增大，P〈0.05。免疫细胞荧光检测细胞增殖结果显示，TNF-α组和LaCl3组中，Cyclin D1阳性细胞率分别为（68.6±4.2）％和（51.2±2.8）％，明显高于空白对照组的（35.6±2.6）％，P〈0.01。结论一定浓度的Lacl3具有促进NSCs增殖的作用。     

Neogenin调控成骨分化机制的研究进展

再生蛋白neogenin属于结直肠癌缺失蛋白（DCC）家族成员,通过结合不同的配体如神经导向因子netrin和排斥性导向分子（RGM）参与机体内稳态的维持、组织生成、血管发生、铁代谢调节、免疫调控、细胞分化、增殖、迁移及凋亡等诸多生理病理过程。有关neogenin调控成骨分化的研究尚处于早期阶段,其调控机制还不明确。为了更好地探究neogenin的功能特性,该文就有关neogenin的分子特征和分布、生理功能及其经BMP信号通路调控成骨分化方面的研究进展进行综述。     

骨髓基质细胞促进人胚神经干细胞向神经元的分化

目的:探讨骨髓基质细胞(BMSCs)对人胚神经干细胞(NSCs)分化的影响。方法:采用机械法分离人胚NSCs,成球法进行传代培养,采用免疫荧光染色检测神经上皮干细胞蛋白(Nestin)的表达鉴定NSCs。按培养方式不同,分为NSCs自然分化组、BMSCs和NSCs直接接触共培养组及Transwell共培养组,采用免疫细胞荧光法及免疫印迹法检测各组神经元和星形胶质细胞标志物的表达。结果:在直接接触共培养组和transwell共培养组中,免疫荧光染色显示神经元标志物NSE阳性细胞率明显高于自然分化组,而星形胶质细胞标志物GFAP阳性细胞率低于自然分化组。免疫印迹检测显示Transwell共培养组中NSE表达量显著高于自然分化组,而GFAP表达量低于自然分化组。结论:BMSCs具有促进NSCs向神经元分化的作用。     

免疫球蛋白样物质在上皮来源的恶性肿瘤中的表达

目的研究在上皮来源恶性肿瘤细胞中免疫球蛋白样物质的表达.方法采用免疫组化SP法,分别用鼠抗人IgG、IgD、IgA和IgM单克隆抗体对乳腺癌、肝癌、肺癌、膀胱癌等多种上皮来源恶性肿瘤癌组织及其部分传代细胞进行了检测.结果在上述癌组织及癌细胞中有不同程度的阳性反应,与抗人IgG、IgD、IgA和IgM抗体反应阳性率分别为50.0%、85.7%、61.9%和45.2%.其中乳腺癌阳性率为100.0%.结论在上皮来源恶性肿瘤中存在免疫球蛋白样物质的表达,其性质和机制有待于进一步研究.     

CRISPR/Cas系统在神经系统研究中应用的研究进展

CRISPR技术在神经干细胞基因编辑中的可行性已通过相关靶向基因编辑实验得到证实。根据这些实验结果,可以认为CRISPR在未来神经再生和神经系统疾病治疗等领域具有巨大价值。本综述介绍了CRISPR基因编辑技术的原理及其优势和劣势,以及利用CRISPR技术针对帕金森病和亨廷顿病的相关基因研究,以此来探讨CRISPR在神经系统疾病建立疾病模型和基因治疗等领域的应用前景。     

氯化镧对内毒素诱导巨噬细胞肿瘤坏死因子表达的影响

目的　探讨稀土化合物氯化镧对内毒素效应的影响。　方法　分离培养小鼠腹腔巨噬细胞 (M) ,用内毒素 (lipopolysaccharide ,LPS)对其进行诱导实验。采用ELISA法及SYBRGreen荧光定量RT PCR方法 ,观察氯化镧对LPS诱导的小鼠M肿瘤坏死因子α(TNFα)分泌及TNFαmRNA表达的影响。BALB/C小鼠随机分为 2组 ,分别给予致死量LPS及经氯化镧处理的LPS ,观察 7d内小鼠死亡率。　结果　经氯化镧处理的LPS诱导的小鼠 ,MTNFα分泌量及TNFαmRNA表达水平均明显低于LPS组 (P <0 .0 1)。经氯化镧处理的致死量LPS攻击小鼠 ,其死亡率明显低于LPS对照组。　结论　氯化镧具有降低内毒素毒性、抑制LPS诱导小鼠MTNFα分泌及TNFαmRNA表达的作用     

缺血预处理联合阿魏酸钠对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的 探讨脑缺血预处理联合阿魏酸钠对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 采用四血管阻断法复制全脑缺血模型，动物随机分为对照组、缺血预处理组、缺血预处理 阿魏酸钠组和缺血组，采用免疫组织化学染色、TUNEL染色等方法观察各组动物在脑缺血再灌注后皮层和海马CA1区Fas蛋白、Caspase-8蛋白的表达、神经元数及凋亡细胞计数的情况。结果 阿魏酸钠 缺血预处理组凋亡细胞数较缺血组和缺血预处理组显著减少，缺血7d时皮层及海马CA1区神经元无明显丢失，而缺血组神经元大量丢失。缺血预处理 阿魏酸钠组Fas阳性细胞与缺血组相比显著减少，Caspase-8蛋白阳性细胞则较缺血预处理组和缺血组显著减少。结论 缺血预处理联合阿魏酸钠可以进一步加强缺血预处理对脑缺血再灌注损伤的保护作用。其机制可能是通过减少脑缺血后神经元Caspase-8蛋白的表达，从而抑制细胞凋亡。     

体外培养骨髓间质干细胞向神经细胞分化的研究进展

成年动物骨髓中有两类干细胞，一是造血干细胞，另一为非造血干细胞，最早称之为成纤维克隆形成单位(CFU—fibroblast)，现指骨髓间质干细胞(mesenchymal stemcell，MSCs)或称之为骨髓基质细胞(BMSCs)。MSCs并非由单一的细胞群体组成，根据MSCs的形态特点将其分为毯子样细胞、网状细胞、     

抗致龋病IgY的制备及防龋功能的观察

目的：制备具有高效免疫活性的抗致龋菌鸡卵黄免疫球蛋白（ＩｇＹ），评估其临床防龋功能。方法：以变形链球菌皮下注射免疫产蛋母鸡，采用聚乙二醇（ＰＥＧ）两步沉淀法提取ＩｇＹ，微量凝集试验检测ＩｇＹ免疫效价及交叉免疫特性，并观察其抑菌效果，与含氟漱口水比较其临床防龋功能。结果：作者制备的ＩｇＹ免疫效价为１：５１２，具有抑制变形链球菌生长，并与其他较常见的变形链球菌ｃ、ｅ、ｆ血清型结合发生交叉凝集反应，经临床验证结果表明ＩｇＹ漱口水与含氟漱口水龋患发生率相近。结论：抗变形链球菌鸡卵黄免疫球蛋白制剂具有防龋功能。     

颅脑损伤后海马区notch信号分子及其相关miRNA的表达变化

目的 观察颅脑损伤后海马区notch1相关微小RNA(miRNA)、notch1及nestin的表达变化,探讨颅脑损伤后神经干细胞增殖机制.方法 采用自由落体法复制闭合性颅脑损伤小鼠模型,于伤后4 h、1 d和3 d处死动物.(1)实时聚合酶链反应(Real-time PCR)检测伤后4 h、1 d和3d伤侧海马区mir-326、mir-34a和notch1 mRNA的表达变化.(2)免疫荧光染色检测伤后3 d伤侧海马齿状回区notch1和nestin蛋白表达变化.结果 (1)颅脑损伤后4 h、1 d和3 d组海马区mir-326和mir-34a表达水平分别为假手术组的(0.36±0.16)、(0.16±0.04)、(0.36±0.17)倍和(0.48±0.15)、(0.50±0.04)、(0.25±0.14)倍,均低于假手术组(P＜0.01);(2)颅脑损伤后4 h、1 d和3 d组海马区notch1 mRNA表达水平分别为假手术组的(1.77±0.17)、(2.55±0.48)和(2.44±0.58)倍,均高于假手术组(P＜0.05);颅脑损伤后3 d组海马齿状回区notch1阳性细胞明显多于假手术组[(18.20±3.56)个比(0.40±0.55)个,P＜0.01].(3)颅脑损伤后3 d组海马齿状回区nestin阳性细胞数明显高于假手术组[(21.80±5.07)个比(0.80±0.45)个,P＜0.01].结论 在颅脑损伤后海马区神经干细胞增殖过程中,mir-326和mir-34a表达明显降低,其靶基因notch1 mRNA和蛋白表达明显升高,提示mir-326和mir-34a可靶向抑制notch信号分子,调控伤后神经干细胞增殖过程.

Abstract：

Objective To observe the expression of notch1-related miRNA, notch1 and nestin,and explore the regulatory mechanism of neural stem cells proliferation in hippocampus of mice after traumatic brain injury (TBI). Methods Mice were suffered closed head injury, and then sacrificed at 4th h,1st day and 3rd day post-injury. Real-time polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the expression levels of mir-326, mir-34a and notch1 mRNA in mice hippocampus at 4th h, 1st day and 3rd day post TBI. Immunofluorescence was conducted to determine protein expression levels of notch1 and nestin in mice hippocampus at 3rd day post TBI. Results ( 1 ) Relative to sham group, the levels of mir-326 and mir-34a at 4th h, 1st day and 3rd day after TBI in the hippocampus were respectively (0. 36 ± 0. 16),(0. 16±0.04), (0.36±0. 17) and (0.48±0. 15), (0.50±0.04), (0.25 ±0. 14) fold (P＜0.01);(2) Relative to sham group, the levels of notch1 mRNA at 4th h, 1st day and 3rd day post TBI injury in the hippocampus were respectively (1.77 ±0. 17), (2.55 ±0.48) and (2.44±0.58) fold (P＜0.05).Notch1 + cells in the DG at 3rd day post TBI were significantly increased compared to sham group ( 18.20± 3.56 vs 0. 40 ±0. 55 ,P ＜0. 01 ); (3) Nestin + cells in the DG at 3rd day post TBI were increased apparently compared to sham group (21.80 ± 5. 07 vs 0.80 ± 0. 45, P ＜ 0. 01 ). Conclusion mir-326 and mir-34a may play a key role in trauma-induced neural stem cells proliferation in hippocampus in vivo by targeting notch1 signaling.