缺血预处理后Fas蛋白表达与迟发性神经元凋亡的关系初步探讨

目的动态观察缺血预处理后大鼠大脑皮层和海马CA1区神经元凋亡与Fas蛋白表达变化情况,初步探讨缺血预处理后Fas蛋白表达与迟发性神经元凋亡的关系。方法四血管阻断法复制全脑缺血模型,动物随机分为非缺血对照组、预处理对照组、缺血预处理组和缺血组。采用尼氏和TUNEL染色法观察皮层及海马CA1区神经元存活数和凋亡细胞数,免疫组化方法检测Fas蛋白在缺血预处理后表达变化情况。结果缺血组缺血6h在皮质及海马CA1区Fas阳性表达细胞计数升高,12h达高峰;缺血预处理组缺血12h阳性细胞计数升高,24h达高峰。缺血组缺血6h出现凋亡细胞,48h凋亡细胞数达到高峰;缺血预处理组凋亡细胞数较缺血组明显减少。缺血组缺血7d神经元数明显减少,12周时神经元大量减少;缺血预处理组缺血7d时神经元数无明显变化,但12周时神经元同样大量减少。结论全脑缺血可能通过诱导Fas蛋白的表达增多,启动细胞凋亡,导致缺血后神经元凋亡的发生;缺血预处理虽可延缓缺血后神经元的凋亡,但无法提供真正的长时期的神经元保护作用,其有限的保护作用可能是通过延缓Fas蛋白的表达而减缓了神经元凋亡的进程。     

β-巯基乙醇诱导成年鼠骨髓基质细胞向神经细胞分化的研究

目的：探讨β—巯基乙醇诱导成年大鼠骨髓基质细胞成神经细胞的可能性。为神经再生和诱导剂的筛选提供一种新的参考方法。方法：从大鼠骨髓中分离出骨髓基质细胞并培养传至3—5代，诱导前24h用含lmmo1／1的β—巯基乙醇及含20％的DMEM培养液培养，再以含5mmo1／1 β—巯基乙醇的无血清DMEM培养液作诱导，用免疫细胞化学方法鉴定神经细胞特异性标志物NF、NSE及GFAP的表达。结果：诱导后lh，部分细胞发生形态学上的改变，6h后大部分细胞不仅在形态上表现为神经元样特征，而且NF、NSE等特异性抗体呈阳性表达，而GFAP抗体表达呈阴性。结论：β—巯基乙醇能将骨髓基质细胞诱导成神经元样细胞。     

弥漫性大B细胞淋巴瘤致肿瘤溶解综合征1例

<正>患者，男性，58岁，因“胸闷、气促2个月”收住苏州大学附属第一医院心内科，血清肌钙蛋白、磷酸肌酸激酶同工酶和乳酸脱氢酶(LDH)正常，胸部CT肺野未见异常(图1a),而纵隔淋巴结肿大，心肺查体阴性，考虑为淋巴瘤。胸腹部增强CT示纵隔及腹膜后淋巴结肿大和上腔静脉狭窄(图1b-d),肝脏和脾脏低密度阴影。纤维支气管镜行黏膜活检，经超声支气管针吸穿刺肿大的纵隔淋巴结(图1e-f)。因患者出现颜面部及上肢水肿，植入上腔静脉支架，     

皮肌炎继发间质性肺疾病临床特征及预后分析

目的 总结分析皮肌炎(dermatomyositis,DM)并发间质性肺疾病(interstitial lung disease,ILD)的临床特征,探讨患者预后不良的预测指标.方法 选取在苏州大学附属第一医院住院治疗的268例DM患者作为研究对象,收集包括症状、体征、实验室检查、心电图、肺功能检查等资料及预后进行回顾性研究.结果 相较于单纯DM患者,伴发ILD的患者出现发热、关节痛、呼吸道症状、抗核抗体(ANA)阳性、抗Jo-1抗体阳性,以及血沉(ESR)、乳酸脱氢酶(LDH)、IgG升高的概率明显升高.而当后者出现以下一种或几种表现,如:发热、Gottron皮疹、心脏损害、关节痛、合并感染,血清ESR、LDH指标升高、肌酸激酶(CK)低水平时,患者的病死率升高.结论 对于DM患者,应尽早常规行肺功能及高分辨率CT(HRCT)检查.当DM伴ILD患者出现发热、关节痛、心脏损害、合并感染、CK低水平等表现时,需及早干预.     

自体骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的时机选择

目的:评价不同时机骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗急性心肌梗死(AMI)的疗效.方法:44例首次急性ST段抬高型AMI患者,在急诊成功开通梗死相关冠状动脉后随机分为AMI后第1周移植组(A组,10例)、AMI后第2、第3周移植组(B组,10例)、AMI后第4至6周移植组(C组,11例)和对照组(仅行PCI术,不进行骨髓穿刺或冠状动脉内输注,13例).各组于AMI后3 d、6个月行经胸超声心动图,采用99MTc-MIBI核素的单光子放射计算机断层显像术进行心肌灌注显像.结果:与对照组相比,A组和B组左室射血分数显著提高,心肌灌注缺损指数明显下降.A组与B组间未见明显差异,而C组与对照组相比亦未见明显差异.A组、B组、C组均未出现恶性心律失常和其他严重并发症.结论:AMI急诊介入术后行BMSCs移植是安全的.AMI后前3周行BMSCs移植比较理想.     

脑外伤后小鼠海马区notch信号的表达变化

目的观察脑外伤后小鼠海马区notch信号基因的表达变化。方法采用Feeney自由落体法复制闭合性脑外伤小鼠模型,分为假手术对照组和脑外伤组,于伤后4h、1d、3d分别处死。采用实时荧光定量PCR法检测伤后各时间点notch1、hes1mRNA的表达。结果 (1)notch1 mRNA表达水平在伤后4h开始升高,1d时达到高峰,较对照组升高约6倍,3d时有所回落,但仍维持在高水平,较对照组升高2倍。(2)hes1 mRNA在伤后4h无明显变化,1d时达到高峰,较对照组升高3倍,3d时回落到正常水平。结论脑外伤后notch1和hes1 mRNA明显增高,提示notch信号被激活,可能与伤后NSCs增殖分化相关。     

夜间阴茎勃起试验在勃起功能障碍诊断中的应用

勃起功能障碍(erectile dysfunction,ED)常见于男性尤其是中、老年男性.根据病因将其分为器质性ED(动脉性、静脉性、神经性和内分泌性等)、心理性ED及混合性ED(器质性病因和心理因素同时存在)3种类型.ED的诊断除了详细的病史资料、体格检查和一般实验室检查之外,部分患者必须通过一种或者多种特殊检查才能最后确诊.随着对阴     

胎肝源性细胞促进人骨髓间充质干细胞向肝细胞的定向分化

目的:探讨人胎肝源性细胞(HFLC)对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外诱导分化为肝系细胞的效应和机制.方法:药物流产的胎肝源性细胞和Hoechst33342标记的人MSCs,按培养方式不同,分为HFLC和MSCs直接接触共培养组及transwell共培养组,用倒置显微镜观察细胞形态,在不同时段用免疫细胞荧光法检测肝系细胞标志如AFP、 CK-18和CK-19并进行糖原染色.结果:在直接接触共培养组,免疫细胞荧光法显示分化细胞表达AFP、 CK-18和CK-19,并随分化时间延长表达量增加;同时,分化细胞具有贮存糖原功能,PAS染色显示分化细胞糖原染色阳性.而在transwell共培养组,分化细胞未检测到肝系细胞标志物的表达及糖原的贮存.结论:HFLC与MSCs的直接接触共培养体系的微环境,有利于MSCs定向分化为肝系细胞.     

昆明鼠胚胎干细胞系的建立及其特性

背景：到目前为止,国际上通用的动物胚胎干细胞细胞系大多是从129品系和C57BL/6系小鼠中获得的,少部分来自BALB/C系,来自于中国昆明鼠则鲜有报道。 目的：分离培养昆明系小鼠胚胎干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定。 设计、时间及地点：以细胞为对象的观察性实验,于2006-05/2007-06在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。 材料：昆明小鼠3.5 d胚龄的囊胚。 方法：自昆明系小鼠3.5 d胚龄的囊胚分离内细胞团细胞,接种于小鼠原代胚胎成纤维细胞饲养层上,对分离的内细胞团细胞进行扩增、传代培养。 主要观察指标：观察胚胎干细胞集落的生长情况,对其碱性磷酸酶表达进行染色分析,采用免疫荧光法检测其阶段特异性胚胎抗原1表达,以反转录-聚合酶链反应检测其特异性表达因子c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2的基因表达情况,并对其体内外分化能力对进行鉴定分析。 结果：分离、培养自内细胞团的细胞呈典型的胚胎干细胞集落样生长,碱性磷酸酶染色及阶段特异性胚胎抗原1荧光染色阳性,细胞表达c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2等基因,细胞在体内外均能分化成来源于不同胚层的多种细胞类型。 结论：成功从昆明小鼠囊胚中分离并建立一株胚胎干细胞系,其生物学特性与其他胚胎干细胞株相符。     

人诱导性多能干细胞的培养及鉴定

目的建立稳定的人诱导性多能干细胞（iPS细胞）培养体系。方法取第3．5代的小鼠胚胎成纤维细胞．丝裂霉素C处理后用作饲养层。人iPS细胞接种于饲养层上生长,胶原酶消化或机械法传代。倒置显微镜下观察iPS细胞生长状态：观察拟胚体形成能力;RT—PCR检测iPS细胞多能性基因的表达情况。结果（1）小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）为贴壁生长细胞,呈梭形或多角形。细胞增殖旺盛。（2）生长在饲养层上的人iPS细胞呈典型的克隆状生长。克隆呈圆形或椭圆形．边界清晰。克隆内细胞排列紧密,细胞体积小,核大,细胞核／质比高。RT—PCR结果显示人iPS细胞强表达多能性基因Oct4,Nanog,Sox2;去除饲养层后悬浮培养能形成拟胚体（EB）。结论本实验的培养体系适合人iPS细胞的培养,人iPS细胞能稳定增殖,保持自我更新及分化潜能。