白血病患者Th、Tc细胞IFN-γ、IL-4表达研究

目的探讨白血病患者Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞亚群极化改变的临床意义。方法采用流式细胞仪检测39例白血病患者发病时外周血CD3＋CD8-、CD3＋CD8＋细胞内IFN-γ和IL-4水平,并与同期30例对照组比较。结果白血病患者Th、Tc细胞内IFN-γ较对照组显著降低（P〈0.01）,而IL-4升高（P〈0.05）,Th1/Th2、Tc1/Tc2细胞比值显著降低（P〈0.01）。结论白血病的发病可能与Th1/Th2失调有关。     

175例儿童地中海贫血的基因诊断分析

目的 探讨深圳地区儿童α和β地中海贫血（简称地贫）的基因表型特征。方法 对有不同程度贫血或黄疸的儿童以红细胞休克-管定量法进行地贫筛查，并对检出的部分地贫患儿共175例进行基因分析，即采用跨断裂点（gap-PCR）PCR技术和PCR反向斑点杂交技术（PCR／RDB）分别对α地贫和β地贫进行基因检测。结果 全部病例中α地贫70例，占40．0％，其中标准型α地贫（即α地贫）54例，基因型为α α/--^SEA，HbH病16例；β地贫105例，占60．0％，共检出9种基因突变类型。其中重型β地贫14例，占β地贫患儿的13．3％。几种常见β地贫基因频率依次为CD41-42（-CTTT）0．430，IVS-2nt654（C→T）0．316，CDl7（A→T）0．105，TATA box nt-28（A→G）0．053，CD43（G→T）0．035等。结论 深圳地区儿童地贫基因频率与广东省其他地区大致相似。人群中儿童地贫检出率较高，广泛开展遗传咨询和地贫的产前基因诊断，对指导优生优育具有重大意义。     

以阴茎异常勃起为首发症状的慢性粒细胞白血病1例

患者 ,男 ,31岁。因持续性阴茎痛性勃起 16ｄ于 1999年 7月 5日入院。患者于 16ｄ前晨起无明显诱因出现阴茎勃起 ,伴阴茎疼痛 ,会阴部酸痛 ,无发热 ,无排尿困难。曾到私人诊所诊治及服用中药治疗无效。门诊收入泌尿外科。入院时体查 :一般情况好 ,皮肤粘膜无黄染及出血 ,浅表淋巴结未触及 ,胸骨压痛 ,心肺未见异常 ,肝肋下 2ｃｍ ,脾 6ｃｍ。阴茎勃起 ,阴茎与腹部皮肤夹角 <90°,有压痛 ,尿道口无红肿 ,无流脓 ,阴囊、睾丸未见异常。血常规 :血红蛋白 6 8ｇ/Ｌ ,白细胞 199 7×10 9/Ｌ ,血小板 35 0× 10 9/Ｌ,早幼粒 0 0 2 ,中性中幼粒 0 …     

流式细胞仪检测CD59在阵发性睡眠性血红蛋白尿症诊断中的应用

阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)系获得性红细胞膜缺陷引起的慢性血管内溶血.近年来,利用流式细胞术(FCM)检测和计数缺乏CD59的血细胞,被认为是诊断PNH更敏感、更特异的方法[1].本文采用流式细胞术测定红细胞CD59表达,探讨该方法在PNH诊断中的意义.     

白血病中IL－2受体基因的表达及其意义

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测１１６例各种白血病细胞ＩＬ－２受体基因的表达情况。该基因在Ｔ－ＡＬＬ、ＣＬＬ、Ｃ－ＡＬＬ和ＡＮＬＬ都有相当高的表达率，分别为１００％、１００％、７１．４３％和６５％。该方法较ＡＰＰＡＰ和免疫荧光法发现更高的阳性率，提示其敏感性及准确性更高。本文结果显示了大部分的白血病细胞都表达了ＩＬ－２受体基因，推测ＩＬ－２受体可能是白血病细胞所具有的一种普遍特性，而ＩＬ－２则可能在白血病细胞的增殖中起一定的作用。故提出临床上应重新评价ＬＡＫ细胞和ＩＬ－２在白血病中的治疗价值。     

从G-CSF动员的外周血细胞悬液培养的成纤维细胞样细胞的特性分析

目的： 研究从G-CSF动员的外周血细胞（PBC）悬液培养的成纤维细胞样（F-L）细胞的特性。 方法： 取PBC中贴壁细胞分4组培养：①RPMI-1640组；②L-DMEM组；③粒细胞集落刺激因子（G-CSF）组；④白细胞介素-3（IL-3）组。流式细胞仪分析各组培养的F-L细胞特性。 结果： 培养2-3周后，4组均能收获到F-L细胞，细胞贴壁生长，但不融合，不能连续传代培养，③④组细胞数量明显多于①②组，4组F-L细胞表型相似：CD33+、CD11c+、CD64+、CD14+、CD45+、HLA-DR+、CD86+、CD34-、CD38-、CD3-、CD19-、CD56-、CD29-、CD44-、CD105-；与单核细胞（PB-M）表型差异仅CD38表达不同而与间质干细胞（MSC）或树突状细胞（DC）表型明显不同。 结论： 从PBC培养的F-L细胞为巨噬细胞，不是MSC或DC；G-CSF、IL-3能提高F-L细胞培养数量，不改变PB-M向巨噬细胞分化的分化方向。     

乳腺癌患者外周血树突状细胞亚群及其HLA-DR表达的变化

目的：探讨乳腺癌患者外周血树突状细胞(DC)亚群和其HLA-DR表达变化及血浆中DC相关细胞因子水平的变化。方法:4色荧光流式细胞术分析57例乳腺癌术前、术后1周、术后6个月的患者及正常对照的外周血DC前体细胞pDC₁/pDC₂（CD11c+CD123-/CD11c-CD123+）比值及其HLA-DR的表达；酶联免疫吸附法检测血浆细胞因子白细胞介素-12p40（IL-12p40）、白细胞介素-10（IL-10）、γ-干扰素（IFN-γ）、白细胞介素-4（IL-4）水平。结果:57例乳腺癌患者中, 2例Ⅲ期、4例Ⅳ期外周血pDC缺乏，其余患者Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期外周血pDC₁/pDC₂比值分别为1.62±0.59、1.41±0.63、0.91±0.32、0.81±0.29，均显著低于对照组（1.94±0.44,P<0.05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者术后1周pDC₁/pDC₂比值为1.71±0.47、1.52±0.54、1.04±0.36，与术前比较均无显著差异（P>0.05），但显著低于对照组（P<0.05）; 术后6个月pDC₁/pDC₂比值分别为1.92±0.72、1.63±0.65、1.28±0.34，与术前比较，均有显著提高（P<0.05），但与对照组比较，仅Ⅰ期患者恢复正常（P>0.05）,Ⅱ、Ⅲ期患者仍然显著降低（P<0.05）。乳腺癌患者pDC亚群HLA-DR表达以及血浆中IL-12p40、 IL-10、IFN-γ、IL-4水平及IL-12p40/IL-10、IFN-γ/IL-4比值与对照组比较均无显著差异（P>0.05）。结论:Ⅰ-Ⅳ期乳腺癌患者外周血pDC₁/pDC₂比值降低，部分Ⅲ、Ⅳ期患者外周血pDC缺乏。pDC的HLA-DR表达及DC分泌相关细胞因子的能力没有同步变异。术后患者pDC亚群Ⅱ、Ⅲ期明显改善，Ⅰ期恢复正常。     

三氧化二砷耐药白血病细胞株K562/AS2的建立及其与多药耐药的关系

目的:建立三氧化二砷(As₂O₃)耐药白血病细胞株,用于研究其耐药机制。初步探讨该细胞系与多药耐药的关系。方法:As₂O₃耐药白血病细胞株的建立通过逐步增加药物浓度方法。细胞毒实验采用MTT法,细胞周期测定采用碘化丙啶荧光染色法,细胞表面P-糖蛋白(P-gp)、细胞内柔红霉素(DNR)浓度、以及细胞免疫表型测定采用流式细胞术测定。结果:As₂O₃耐药白血病细胞株K562/AS2的细胞倍增时间和细胞周期与敏感细胞株K562相似。K562/AS2对As₂O₃、DNR、足叶乙甙(VP16)和阿糖胞苷(Ara-C)的耐药倍数分别为(7.4、2.9、3.8和1.1倍)。多药耐药细胞K562/A02对As₂O₃、DNR、VP16和Ara-C的耐药倍数分别为(0.8、94、2.5和0.9倍)。K562细胞与K562/AS2细胞之间的表面P-gp和细胞内DNR荧光强度无明显差异。结论:建立一株对临床可获得药物浓度(2μmol/L)的As₂O₃产生耐药的白血病细胞K562/AS2。K562/AS2对As₂O₃的耐药倍数是敏感株K562的7.4倍。K562/AS2对DNR和VP16部分耐药,其机制与多药耐药基因1(mdr1)表达产物P-gp作用无关。     

以吡喃阿霉素为主化疗方案治疗难治性白血病24例分析

急性白血病(AL)目前治疗方案主要为化疗,仍有20%左右的成人AL经典化疗不能达到完全缓解(CR),我院自1994年开始用以吡喃阿霉素(THP)为主的方案治疗24例难治和复发AL,取得较好疗效,现报道如下:     

儿童特发性血小板减少性紫癜外周血Th细胞IFN-γ、IL-4表达分析

目的研究儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)体内Th1/Th2失衡及其与疾病关系。方法采用流式细胞仪对53例ITP患儿(急性32例,慢性21例)治疗前后和28例健康者外周血CD3+、CD8-细胞内IFN-γ和IL-4表达水平进行检测分析。结果急性ITP患儿起病时Th细胞中表达IFN-γ(Th1)阳性百分比高于正常人(P<0.05),而慢性ITP患儿Th1细胞较对照组显著降低(P<0.01),治疗缓解后急性ITP患儿Th1细胞与对照组无明显差别(P>0.05),慢性ITP患儿Th1细胞比例增高(P<0.05)。结论儿童急、慢性ITP呈现不同的Th1/Th2极化失衡,与疾病的活动、缓解有一定的关系,提示Th1/Th2极化在疾病发生中可能起了重要作用。