人外周血单核细胞体外诱导成熟和激活的树突状细胞

目的　建立从人外周血单核细胞体外诱导培养成熟和激活的树突状细胞 (dendritic cell,DC)的方法。方法　从健康成人外周血分离单核细胞 (PBM) ,加入粒单系集落刺激因子 (GM-CSF) 10 0 μg/L+重组白细胞介素 -4 (rh IL -4 ) 5 0 0 k U /L体外培养 14 d,并于培养结束前 1d加入或不加入肿瘤坏死因子α (TNF -α ) (10 0μg/L ) ,流式细胞仪测定树突状细胞 (DC)的主要组织相容性复合体 (MHC) - 类分子、粘附分子和协同刺激分子 ,分析其成熟度和激活度。结果　 PBM经 GM-CSF+ rh IL-4诱导培养 14 d后 ,细胞成簇 ,表型为 CD83 2 2 .6%、CD865 5 .5 %、CD11c 3 6.1%、CD64 3 .2 %、人类白细胞抗原 (HLA) -DR 13 .4% ;培养结束前 1d加入 TNF -α诱导后 ,细胞表型为 CD83 81.5 %、CD8699.3 %、CD11c 98.8%、CD64 3 .4%、HLA-DR 88.3 %。结论　 GM-CSF +rh IL-4诱导 PB-M14 d,可获得大量不成熟的 DC,该体系有利于 DC扩增 ;培养结束前 1d加入 TNF-α,DC成熟度高 ,激活性好 ,适合于肿瘤免疫治疗     

以亚砷酸为主方案治疗急性早幼粒细胞白血病的分子生物学疗效

 目的　观察以亚砷酸为主的方案治疗初治的急性早幼粒细胞白血病（APL）的细胞学及分子生物学疗效。方法　56例APL患者均经骨髓细胞形态学检查、组织化学检查、免疫表型测定以及FISH法和实时定量PCR法检测PML／RARα融合基因而确诊。诱导化疗方案采用亚砷酸10 mg／d,静脉滴注,直至获得完全缓解。缓解后采用亚砷酸与化疗交替治疗,以亚砷酸为主。对20例患者的PML／RARα融合基因进行动态观察。结果　56例PML-RARα融合基因阳性的初治APL患者完全缓解率98.2 ％,CR中位时间32（23～42） d。实时定量RT-PCR检测阳性的32例患者中位随访期3年,总生存率100 ％,复发率3.12 ％。完全缓解24个月后分子生物学缓解率100 ％（6／6）。结论　以亚砷酸为主的方案治疗PML／RARα融合基因阳性的APL患者疗效好,血液学缓解后24个月有可能获得分子生物学缓解。     

复发或难治性急性非淋巴细胞白血病细胞周期及P-糖蛋白临床测定

目的：探讨复发或难治性白血病细胞增殖状况与多药耐药基因产物P－糖蛋白的表达对化疗的影响，方法：应用流式细胞术对15例复发或难治性白血病骨髓单个核细胞进行DNA含量和P－糖蛋白（P－gp)测定，以10例缺铁性贫血，原发性血小板减少性紫癜作为对照。结果：复发或难治疗性白血病细胞G0/G1期比较低于对照组，S－G2M期比较高于对照组，P－gp测定均为阴性。化疗完全缓解率30％。结论：复发或难治性白血病细胞多处于增殖期，再生性耐药可能在其预后不良中起着重要的作用。     

Detection of p53 gene mutations in human leukemia by PCR-SSCP analysis and direct nucleotide sequencing.

Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｐ５３ｇｅｎｅｍｕｔａｔｉｏｎｓｉｎｈｕｍａｎｌｅｕｋｅｍｉａｂｙＰＣＲＳＳＣＰａｎａｌｙｓｉｓａｎｄｄｉｒｅｃｔｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇＷａｎｇＲｏｎｇ王嵘，ＹｕＺｈｉｆｅｉ郁知非，ＧｕＪｉａｎｒｅｎ顾建人，...     

重组人集落刺激因子的临床应用

近年来,造血细胞集落刺激因子(CSF)的研究进展迅速。已有4个人造血细胞集落刺激因子(GM-CSF、G-CSF、M-CSF和IL-3)的cDNA和基因被克隆和表达。生物工程技术已经能合成大量的重组人CSF(rhCSF)。CSF的研究已经从实验室进入到临床。目前在临床应用的主要是rhGM-CSF和rhG-CSF,初步结果令人鼓舞。 Groopman等首先使用rhGM-CSF治疗16例A1DS伴白细胞减少患者。在首次静脉注射后6小时,循环中白细胞升高,随后降至原先水平。在持续静脉滴注中,白细胞持续升高至一定水平(4.6±2.4×10~9/L,最高至48×10~9/L)。其增高的程度与剂量有关。所增加的主要是中性分叶核、杆状核,嗜酸粒细胞和单核细胞。血红蛋白和血小板以及淋巴细胞变化不大。外周血T4/T8的比例也没有改变。