EDN1基因5′上游AP-1顺式调控元件在同型半胱氨酸诱导HUVECs EDN1基因转录中的作用

目的： 探讨EDN1基因5′上游AP-1顺式调控元件在同型半胱氨酸(Hcy)诱导HUVECs EDN1基因转录中的作用。方法：用荧光探针DCF检测HUVECs内活性氧的含量；用RT-PCR法检测EDN1mRNA的表达，用Western blotting法测定c-jun/AP-1蛋白的表达；同时用双抗夹心法测定HUVECs上清液中EDN1的分泌；利用重组质粒的瞬时转染技术观察了HUVECs的AP-1报告基因的活性。结果：Hcy能明显增加HUVECs ROS的生成，促进 EDN1的分泌和提高EDN1mRNA的表达；瞬时转染分析实验结果显示Hcy能明显诱导质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)荧光素酶的表达,但对质粒pGL3-EDN1-AP-1(-115/+135)的突变体pGL3-EDN1-AP-1 MU(-115/+135) 荧光素酶的基础表达及Hcy的诱导作用均明显降低。结论：推测Hcy可能改变HUVECs内的氧化还原状态，促进ROS的释放，激活核转录因子AP-1，通过EDN1基因中AP-1顺式作用元件调控该基因转录。     

植物雌激素α-ZAL抑制同型半胱氨酸诱导HUVECs的ET-1基因表达及抗氧化机制

目的:通过氧应激(ROS)信号转导通路探讨植物雌激素α-ZAL对同型半胱氨酸(HCY)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中ET-1基因表达的抑制作用及抗氧化机制。方法:用荧光探针DCF检测HUVECs内ROS的含量;采用RT-PCR方法对ET-1mRNA的表达进行分析,运用WesternBlot法测定细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)和c-Jun氨基末端激酶(c-jun/AP-1)的表达;同时测定HUVECs上清液中ET-1的浓度,利用瞬时转染技术观察HUVECs的AP-1报告基因的活性。结果:α-ZAL能降低AP-1的活性,抑制由HCY诱导ET-1的分泌和ET-1mRNA的表达,并可能通过抗氧化作用阻断由HCY诱导的HUVECsROS的产生。结论:α-ZAL能抑制HCY诱导HU-VECs的ET-1基因表达,推测可能是α-ZAL减弱了氧应激(ROS)、抑制了蛋白激酶ERK的激活和调节ET-1基因上核转录因子AP-1的表达。     

甲状旁腺素对心肌细胞Ca~（2＋）跨膜转运的影响

甲状旁腺素对心肌细胞Ｃａ￣（２＋）跨膜转运的影响程锦轩，张一彬，王振纲，段金虹（中国医学科学院基础医学研究所药理室北京１００００５）为探讨甲状旁腺素（ＰＴＨ）对心肌细胞钙（Ｃａ２＋）内流的作用及其可能机制，本文采用４５Ｃａ示踪技术和酶学方法观察了牛甲...     

雌激素对动脉粥样硬化的预防性治疗作用及部分机制探讨

目的和方法 :动脉粥样硬化所致的心脑血管疾病是严重威胁人类健康的常见疾病。雌激素对心血管系统有一定的保护作用 ,雌激素替代疗法 (ＨＲＴ)可以降低女性绝经期后的心脑血管疾病的发病率和死亡率。但对其作用环节的研究尚不十分清楚。本研究 :1 应用雌性家兔双侧卵巢切除 (ＯＶＸ)后 ,给予Ｃｈｏ造成食饵性动脉粥样硬化模型 ,观察雌激素对动脉脂质斑块沉积的影响以及对血酯的影响作用 ;2 用ｏｘ-ＬＤＬ刺激体外培养兔主动脉平滑肌细胞 (ＶＳＭＣ) ,研究雌激素对细胞增殖的影响 ;3 应用激光共聚焦显微镜观察雌激素对体外培养兔ＶＳＭＣ[…     

山莨菪碱、川芎嗪预防肺水肿大鼠动脉血浆及BALF中6-酮-PGF_1α、TXB_2含量变化

神经源性肺水肿(NPE)是颅脑创伤、脑血管病变、高原缺氧等常见的并发症,发病急剧凶险.在我国没有引起临床与基础应有的重视。我们用大量注射肾上腺素造成致死性肺水肿,病理过程与NPE+分相似,而程度上更剧烈,具有动力性与非动力性双重机制,既有肺毛细血管流体静压增高,又有毛细血管通透性增高.用山莨菪碱与川芎嗪进行预防,绝大部份动物不形成肺水肿并长期存活,效果明显.     

PGE_2及TXB_2在中性粒细胞中的释放以及肾上腺素对其的影响

在肺水肿与ARDS发病机理中,儿茶酚胺的作用不容忽视,为了解肾上腺素(AD)在肺水肿形成的非动力性机理中的作用,探讨了AD对中性粒细胞释放PGE_2及TXB_2功能的影响。方法是用无菌糖元(1%)注射大鼠     

针对干扰素-γ的新型核酸适配体的筛选及鉴定

 目的: 研发能特异性结合干扰素-γ（IFN-γ）的DNA适配体,为发展IFN-γ的新型检测技术提供基础。方法: 体外合成全长为59个碱基并含有21个随机寡核苷酸的单链DNA文库,以IFN-γ蛋白为靶标,利用指数富集的配体系统进化技术（SELEX）,从单链DNA文库中筛选能够选择性结合IFN-γ蛋白的核酸适配体;流式细胞术检测富集进度、适配体与IFN-γ蛋白结合特性;MFold软件预测二级结构。结果: 经多轮筛选获得了能够识别IFN-γ蛋白的DNA适配体B3-8,其能够选择性地结合IFN-γ蛋白,而与血清白蛋白的结合较弱。经检测其Kd值为185 nmol/L。结论: DNA适配体B3-8能选择性地识别IFN-γ蛋白,在研发针对IFN-γ的新型检测技术方面具有应用潜能。     

白藜芦醇与表阿霉素联合用药对多种人类肿瘤细胞的体外抑制作用

目的 探讨白藜芦醇与表阿霉素联合用药对7种人类肿瘤细胞的抑制作用。方法 体外培养多种人类肿瘤细胞,经白藜芦醇与表阿霉素联合处理24h后,用MTS法测定细胞活性,光镜下观察细胞形态,用二氢丙啶荧光染料(PI)观察细胞的坏死程度,用流式细胞术检测细胞周期分布。结果 白藜芦醇与表阿霉素的联合用药对人乳腺癌MCF7和人胃癌MGC803细胞呈现出协同抑制效应,明显高于单独用药抑制率的加和（p<0.01）,对其它所研究的肿瘤细胞则有加和抑制效应。联合用药处理后细胞坏死情况明显,且细胞周期被抑制在G0/G1期和S期。结论 白藜芦醇与表阿霉素的联合用药对MCF7和MGC803细胞具有引起细胞坏死和细胞周期抑制的协同效应,而对其它所研究肿瘤细胞仅存在加和抑制效应。     

甲状旁腺素对心肌细胞Ca~(2+)跨膜转运的影响

应用放射性同位素~(45)Ca示踪技术观察了牛甲状旁腺素_(1-34)活性片段(bPTH_(1-34))对培养乳鼠心肌细胞钙离子(Ca~(2+))跨膜转运的影响.并且镜检了细胞的搏动频率和采用蛋白质竞争结合法检测了胞内cAMP的含量。结果表明:bPTH_(1-34)(1×10~(-7)mol·L~(-1))显著增加静息细胞的搏动频率.明显增高细胞cAMP的含量.并且显著增加静息、高K~+去极化及NA受体兴奋状态细胞的外Ca~(2+)内流.同时抑制胞内Ca~(2+)外排。提示其强心与细胞内Ca~(2+)升高的机理之一.可能与细胞内cAMP升高有关。