miR-520c-3p靶向MEX3A调控肺癌细胞增殖、凋亡的分子机制

为研究miR-520c-3p对肺癌细胞增殖和凋亡的影响及其潜在的作用机制,用实时定量RT-PCR检测肺癌细胞H1299、NCI-H460、A549和正常肺上皮细胞BEAS-2B中miR-520c-3p和MEX3同源物A(MEX3 homolog A,MEX3A)的表达水平。将miR-NC、miR-520c-3p、si-NC、si-MEX3A、anti-miR-NC、anti-miR-520c-3p转染至H1299细胞后,用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blotting检测蛋白表达,双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性。结果显示,与正常肺上皮细胞BEAS-2B比较,肺癌细胞H1299、NCI-H460、A549中miR-520c-3p的表达水平均显著降低(P0.05),MEX3A mRNA和蛋白的表达水平显著升高(P0.05)。miR-520c-3p过表达、MEX3A抑制表达均可抑制H1299细胞的增殖活力,促进细胞凋亡;miR-520c-3p过表达抑制CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达,促进p21、Cleaved Caspase-3、Bax蛋白的表达;MEX3A抑制表达抑制CyclinD1、Bcl-2蛋白的表达,促进p21、Bax蛋白的表达。miR-520c-3p可靶向调控MEX3A的表达;MEX3A过表达逆转了miR-520c-3p过表达对肺癌细胞H1299的增殖抑制和凋亡促进作用。提示miR-520c-3p可抑制肺癌细胞H1299的增殖,促进其凋亡,其机制可能与靶向MEX3A有关,这将为肺癌的预防和治疗提供新靶点。     

微小隐孢子虫CPl5基因高效真核表达载体的构建及其在Hela细胞中的表达

目的：构建隐孢子虫CP15真核表达载体pCB3．1—15，观察其在Hela细胞中的表达。方法：用BglⅡ从pMD18-T-15中酶切得到CP15基因，将其插入真核表达载体pCR3．1( )的BamH I位点，构建CP15真核表达载体pCR3．1—15，脂质体介导法将其转染Hela细胞，并用G18加压筛选，用RT—PCR方法检测外源CP15基因的转录，用ELISA法和间接免疫荧光法检测其活性。结果：酶切鉴定表明已成功构建了重组真核表达载体pCR3．1-15；外源CP15基因能在转染细胞中有效转录；ELISA法和间接免疫荧光法实验结果表明表达产物具有良好的生物活性。结论：构建的pCR3．1—15真核表达载体在Hela细胞中具有良好的表达活性。     

双关节骨外固定器在老年桡骨远端复杂性骨折治疗中的应用

目的：探讨双关节骨外固定器治疗桡骨远端复杂性骨折的效果。方法：对16例老年人桡骨远端复杂性骨折采用手法闭合复位、双关节骨外固定器固定进行治疗。结果：随访8～38个月，骨折均获得良好的复位与固定，疗效较满意。结论：手法复位，双关节外固定器治疗桡骨远端复杂性骨折，可有效矫正畸形，重建桡腕关节的稳定，是一种微创、安全、疗效确切的治疗方法。     

一株人单克隆抗体在快速竞争抗HIV ELISA中的应用

建立了直接检测抗HIV抗体的ELISA筛选技术。第一代测定法主要是根据夹心法的原理,利用从细胞培养中纯化的病毒,但这样会出现假阳性和假阴性的结果。先前应用的夹心法需要高倍稀释的血清和两步程序,而且只能检出IgG抗体。为了尽早地在感染后测定IgM抗体,以检出抗HIV的免疫应答,因此;利用吸附在固相的重组HIV囊膜蛋白和酶标人单克隆抗体,建立了一种竞争ELISA法。该法既可检测IgM又能检测IgG抗体,而且不需要预先释稀血清,1小时内可得出结果。     

血清、尿液β2-m对Graves'病患者检测的临床意义

目的：探讨血清、尿液β2-微球蛋白（β2-mieroglobulin，β2-m）对毒性弥漫性甲状腺肿（graves diseases，Graves）患者β2-m含量与甲状腺激素的关系，了解其变化情况及临床意义。方法：采用放射免疫分析和化学发光免疫分析测定了82例Graves病初发未治疗组与同一组经治疗的69例缓解组及13例未缓解组。并和40例健康对照组进行血清、尿液β2-m含量与FT3、FL4、TGA、TMA血清检测。结果：初发组与未缓解组β2-m含量与FT3、FT4含量显著高于健康对照组（P〈0．01）。经治疗组β2-m含量与FT3、FT4含量同步缓解而下降至正常，与未治疗组对比（P〈0．01）。对比健康正常组差异无显著性（P〉0．05）。82例Graves病初发组TGA阳性率为48．7％（40／82），TMA阳性率为53．66％（44／82）。未缓解组TGA阳性率为15．38％（2／13），TMA阳性率为23．07％（3／13）。缓解组TGA、TMA仍有13．04％、15．94％阳性。结论：甲状腺疾病患者β2-m含量与甲状腺激素有密切关系，提示β2-m可作为Graves病疗效观察、病情变化及预后判断的一项辅助诊断指标。     

早产和足月新生儿串联质谱筛查切值的建立

目的分析昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心不同出生胎龄新生儿干血斑中氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱水平,并分别建立其参考区间,降低假阳性率或假阴性率,提高阳性预测值。方法选取2013年1月至2020年12月在昆明医科大学第一附属医院新生儿遗传代谢病筛查中心做串联质谱筛查检测的52526例新生儿干血斑标本作为研究对象,根据出生时胎龄不同分为早产组(32周≤胎龄<37周,n=5694)和正常孕周组(37周≤胎龄≤42周,n=46832),采用串联质谱法对其氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱浓度进行检测及比较,并分别建立其参考区间(P_(0.5)~P_(99.5))。结果11种氨基酸及C0、C2、C3、C4、C5、C6、C8、C10、C14、C14:2、C16:1、C18:2的99.5%上限值,早产组高于正常孕周组;C6DC、C12、C16的99.5%上限值,早产组低于正常孕周组。C0的0.5%下限值,早产组高于正常孕周组;瓜氨酸、甲硫氨酸、C16、C18、C18:1的0.5%下限值,早产组低于正常孕周组。其余酰基肉碱的0.5%下限值与99.5%上限值在两组间无明显变化或相差不大。用重新设定的参考区间对部分筛查质量指标做前后对比分析,发现假阳性率在早产组和正常孕周组分别由8.17%、4.86%下降到3.72%、1.48%,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为18.480、16.359,P<0.05);阳性预测值分别由0.56%、1.44%上升到2.17%、3.41%,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为11.898、12.149,P<0.05)。结论不同胎龄新生儿氨基酸、游离肉碱和酰基肉碱浓度存在差异,分别建立了不同胎龄新生儿氨基酸、游肉离碱和酰基肉碱筛查的参考区间,为新生儿氨基酸、脂肪酸和有机酸代谢障碍性疾病的筛查及诊断提供了参考依据。     

湖南省江华瑶族自治县14年白血病流行病学调查

目的：了解白血病在瑶族人群中的发病情况及危险因素。方法：调查1984－1997年全县白血病新发病例,计算其发病率并进行比较分析。结果：本县白血病年发病率为1．61／10万,明显低于全国白血病年均发病率,瑶族人群低于汉族人群。白血病的发病有时一空集积现象。结论：瑶族人群白血病率不高。     

幽门螺杆菌分离培养技术的改进

探讨自制的改良布氏活性炭巧克力培养基,置厌氧罐蜡烛培养环境分离临床粘膜标本幽门螺杆菌(Hp)的检出率.结果表明66例粘膜标本中分离出Hp54株(81.8%),44株Hp滤液有24株(54.5%)具有细胞毒活性,其中26例消化性溃疡患者有18例(69.2%),18例慢性胃炎患者有6例(33.3%)为Hp(Toxin+)感染.结果提示通过对Hp生物学性状和毒素的检测结果证实,该法可用于临床粘膜标本Hp的常规分离培养.     

P53蛋白检测在女性生殖系统良恶性组织鉴别中意义的探讨

目的：探讨P53蛋白在鉴别女性生殖系统对交界性病变良恶性质和非典型增生恶变潜能意义,以提高病理诊断水平。方法：P53免疫组化染我应用S－P三步法。结果：P53表达见于癌组,阳性率52．38％（22／42）;非典组6．25％（1／16）;良性疾病组0％（0／104）,各组比P＜0．005。结论：P53检测对鉴别交界性病变良恶性质和估测非内典型增生恶变潜能有效重要意义。     

外源性磷酸肌酸对开心手术病人的心肌保护作用

20例需行瓣膜置换手术的风湿性心脏瓣膜病患者 ,随机等分为 2组。实验组 (CP组 )于术前 2d静脉滴注护心通 ,总量为 4g ;对照组 (C组 )用 5 %G S滴注。结果示实验组的心脏自动复跳率明显高于对照组 ,而对正性肌力药物的需求、缺血再灌后的MDA活性增高及心肌超微结构的改变则较对照组明显减轻 ,两组间的心肌酶活性和心肌ATP含量差异无显著性。提示护心通是一有效的心肌保护药物