尾加压素Ⅱ促进毛乳头细胞增殖及分泌血管内皮生长因子的实验研究

目的 初步研究尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)对体外培养的毛乳头细胞增殖以及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响.方法 采用一步酶法分离原代毛乳头细胞并进行体外培养,取2～4代细胞用于实验.用含不同浓度UⅡ的DMEM培养基培养毛乳头细胞,分别在0、24、48、72 h采用CCK-8法检测毛乳头细胞的增殖情况,...     

紫外光谱法鉴别厚朴及其伪品救必应

目的 建立厚朴及其伪品救必应的紫外光谱鉴别方法。方法 采用中药鉴别紫外谱线组法进行实验。结果 厚朴及其伪品救必的紫外谱线图像、最大吸收峰数目及峰位值具有明显差异。结论 本法简便、准确、灵敏,可用于鉴别厚朴及伪品救必应。     

血管钙化大鼠模型Apelin及其受体表达的实验研究

目的观察血管钙化大鼠模型血浆和主动脉组织Apelin及其受体(APJ)的表达。方法选取16只雄性SD大鼠,随机分正常组和钙化组,每组8只。钙化组:08:00肌肉注射维生素D3 3×10^5 U/kg,同时尼古丁25 mg/kg溶于1 mL花生油灌胃,18:00时重复灌胃1次。正常组:类似钙化组操作,但肌肉注射生理盐水和灌胃单纯花生油。4周后取材检测血管钙化程度,用钙离子测试盒、碱性磷酸酶(ALP)试剂盒测定大鼠主动脉钙含量和ALP活性,用酶联免疫吸附法检测大鼠血浆和主动脉组织Apelin含量,用免疫组化法检测大鼠主动脉组织APJ的表达。结果与正常组相比,钙化组中主动脉中膜弹性纤维间可见钙盐沉积,血清和主动脉组织中ALP、钙含量明显升高(P<0.01),而Apelin的表达明显降低(P<0.01),同时,APJ表达亦下调。结论血管钙化大鼠模型Apelin及其受体的表达下调,Apelin/APJ系统可能是新的抑制血管钙化因子。     

儿茶酚抑素抑制血管钙化的作用及机制

目的观察儿茶酚抑素(CST)对大鼠血管钙化的影响。方法 24只SD大鼠按随机数表法分为正常组、钙化组和钙化+CST组,每组8只。正常组大鼠在造模当天予生理盐水肌注和花生油灌胃处理,钙化组采用维生素D3和尼古丁诱导大鼠血管钙化模型,钙化+CST组给予CST 2 nmol/(kg·d)腹腔内注射4周,检测血管钙盐沉积(Von Kossa染色);测定大鼠主动脉钙含量(钙离子测试盒)、碱性磷酸酶(ALP)活性(碱性磷酸酶试剂盒)、主动脉组织单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量(均为放射免疫法)。结果维生素D3和尼古丁能够建立典型大鼠血管钙化模型;与正常组大鼠比较,Von Kossa染色示钙化组主动脉有大量黑色颗粒沉淀,经CST干预后,主动脉组织钙盐沉积明显减少;与此同时,钙化组大鼠主动脉组织的钙离子含量及ALP活性明显升高,与正常组大鼠比较,差异均有统计学意义(P<0.05);经CST干预后,钙化+CST组大鼠的钙离子含量及ALP活性明显减轻,与钙化组大鼠比较,差异均有统计学意义(P<0.05);钙化组大鼠血清MCP-1和TNF-α浓度明显高于正...     

尾加压素Ⅱ促进毛乳头细胞增殖和迁移的实验研究

目的探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对体外培养的毛乳头细胞增殖和迁移的影响。方法首先,选择10^-5mol/L、10^-6mol/L、10^-7mol/L、10^-8mol/L、10^-9mol/L、10-10mol/L 6个浓度的UⅡ作用于体外培养的大鼠毛乳头细胞48 h,阴性对照组为使用不含UⅡ培养基培养的毛乳头细胞。采用CCK-8法检测毛乳头细胞的增殖活性。其次,采用Transwell实验检测10^-6mol/L和10^-7mol/L的UⅡ对毛乳头细胞体外迁移的影响。同时进行划痕实验,用一次性枪头在铺满90%培养皿底的毛乳头细胞上划痕后,加入含10^-6mol/L UⅡ的DMEM培养基,分别于0 h和24 h测量毛乳头细胞爬行的距离。结果与阴性对照组相比,UⅡ可促进毛乳头细胞增殖,其中10^-6mol/L UⅡ组增殖率高达(41±4.4)%,差异有统计学意义(P<0.05);Transwell检测结果显示,...