激光捕获显微切割结合RNA线性扩增技术在膀胱移行细胞癌相关基因研究中的应用

目的当对有间质细胞混杂的膀胱移行上皮细胞与膀胱移行细胞癌进行基因差异表达分析时,激光捕获显微切割技术(lasercap-turemicrodissection,LCM)是不可缺少的,然而从LCM所得的细胞中获取足够RNA量相当困难。本文首次将LCM与RNA线性扩增结合用于膀胱癌相关基因研究,目的是确定一条切实可行的技术路线,将膀胱移行上皮细胞从膀胱粘膜中分离出来,将膀胱癌细胞从肿瘤间质细胞中分离出来,并对其进行RNA体外线性扩增,以备进一步研究。方法采用LCM技术分别从正常膀胱粘膜及膀胱癌组织冰冻切片中获取膀胱移行上皮细胞及膀胱癌细胞,提取RNA,并对微量RNA进行体外线性扩增。然后用RT-PCR验证扩增前、后RNA中β-actin基因表达水平。结果对照实验I证实经LCM后RNA完整性较好;经对照实验Ⅱ初步确定设定条件下LCMshooting次数与可获得RNA量间对应关系。从膀胱粘膜种捕获膀胱移行上皮细胞25万shootings;从膀胱癌组织中获取癌细胞20万shootings。产物RNA扩增后获得片段大小为0.5-2.5kh的aRNA,且β-actin基因表达表达完整。结论LCM结合RNA体外线性扩增技术能成功地获取较为单一的研究目的细胞,扩增后RNA完整性较好,能用于进一步研究中。     

美、德医疗保险制度一瞥

美国:企业采取措施缩减医疗保险开支美国享受由雇主支付保险费的医疗保险的人占总人口的三分之二。在这种情况下,控制医疗开支直接关系到企业的利益,企业因此会想方设法减少医疗保险开支。在美国,只有残疾人和65岁以上的人才能享受全面医疗保险,共有4000多万人享受这种保险,其资金来源于社会保险收费。至于其他的人,有1.77亿人通过其雇主享受医疗保险;1600万人完全由自己支付医疗费和医疗保险费;4100多万人没参加任何医疗保险。与法国的企业不同,美国并非所有的企业都必须为职工支付医疗保险费。在美国企业中,有45%的中小型企业(职工人数不…     

新生儿细菌性脑膜炎预后不良的危险因素分析

目的 探讨新生儿细菌性脑膜炎预后不良的危险因素。方法 回顾性分析152例细菌性脑膜炎新生儿的临床资料,根据转归分为预后良好组（n=122）与预后不良组（n=30）,比较两组患儿的一般情况、首发症状及实验室检查结果,分析预后不良的危险因素。结果 预后不良组极低出生体重、外周血WBC < 5×10⁹/L或 > 20×10⁹/L、C-反应蛋白 > 50 mg/L、脑脊液WBC > 500×10⁶/L、脑脊液糖 < 1 mmol/L、脑脊液蛋白 > 2 g/L比例高于预后良好组（P < 0.05）,血培养和/或脑脊液培养阳性率、革兰阳性菌及无乳链球菌培养阳性率高于预后良好组（P < 0.05）。多因素logistic回归分析显示,脑脊液糖 < 1 mmol/L、脑脊液蛋白 > 2 g/L是新生儿细菌性脑膜炎预后不良的独立危险因素。结论 脑脊液糖 < 1 mmol/L、脑脊液蛋白 > 2 g/L是新生儿细菌性脑膜炎预后不良的危险因素。     

β-内酰胺类抗生素、D-Ser、DAAO抑制剂三药联用抗MRSA作用

摘要：目的 研究β-内酰胺类抗生素、D-Ser及D-氨基酸氧化酶(DAAO)抑制剂三药联用抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)感染的疗效。方法 体外利用肉汤微稀释法和结晶紫染色法评价DAAO抑制剂5-氯苯并[d]异恶唑-3-醇(CBIO)对细菌生 长和生物被膜的影响；建立小鼠全身感染模型和大鼠腿部感染模型，以生存率和组织匀浆细菌计数为指标评价三药联用疗效； 小鼠皮下给药评价CBIO的安全性。结果 在体外MIC测定时CBIO没有抑菌作用，但分别与苯唑西林和美罗培南联用时可对两 种抗菌药物的抗菌活性产生明显的拮抗作用。D-Ser和CBIO单用对于MRSA N315所产生物被膜的抑制和清除作用较弱，当与抗 生素联用时可显著提升生物被膜的抑制率和清除率；皮下单独给予健康小鼠30mg/kg CBIO后5d内，小鼠生存状况良好(n=5)；三 药(β-内酰胺类抗生素、D-Ser和CBIO)联用相比单用抗生素以及抗生素和D-Ser两药联用，可一定程度上提高小鼠存活率、降低 大鼠腿部肌肉组织持菌量。结论 β-内酰胺类抗生素、D-Ser及CBIO联用在体内具有良好的抗MRSA感染作用，且CBIO体内安 全性良好，但CBIO会与抗生素产生一定程度的拮抗作用。一定浓度的CBIO与β-内酰胺类抗生素、D-Ser联用或许能为MRSA感 染的临床用药提供新的选择。     

补阳还五汤抗器官纤维化作用机制的研究进展

纤维化可发生于多种器官，是多种慢性疾病的最终结局。由于炎症导致器官实质细胞发生坏死，器官组织内成纤维细胞过度增殖，细胞外基质（ECM）过度沉积，持续进展可致器官结构破坏和功能丧失。中医药治疗纤维化具有较好疗效，临床常用益气活血类方药。补阳还五汤是益气活血的代表方剂，临床和实验研究表明补阳还五汤能够延缓肺、心、肝、肾等多器官纤维化的发展进程，作用机制包括改善脏器功能、减少ECM沉积、抗氧化应激、抗炎症反应、调节基质金属蛋白酶（MMPs）/基质金属酶组织抑制因子（TIMPs）失衡、调控转化生长因子-β（TGF-β）/Smad通路等。中医学认为，正气亏虚是纤维化发生的内在原因，瘀血是纤维化形成的重要病理因素，虚和瘀贯穿纤维化始终，纤维化器官组织微环境的改变符合气虚血瘀的病理表现，故益气活血法是治疗纤维化的基本法则。该文通过综述补阳还五汤治疗多器官纤维化的作用机制，为阐明其治疗多器官纤维化的科学内涵提供文献支持，也为进一步的临床研究奠定基础。     

0～1岁婴儿发展性运动障碍的早期发现与干预

<正>曾经有一对夫妇万分困惑,为什么出生时健康的宝宝,从满月开始就持续不停地哭闹?是饿了?渴了?缺乏父母的安全性依恋?还是感染了疾病?几经周折,直至他们辗转至儿童神经科问诊,才知道宝宝是发展性运动障碍,并且不排除脑瘫可能!妈     

医护一体化运行病历管理在泌尿外科患者中的效果研究

目的探讨医护一体化运行病历管理在泌尿外科患者中的效果。方法选取2016年7~12月泌尿外科24名为对照组,2017年1~6月泌尿外科24名医护人员为观察组,观察组实行医护一体化运行病历管理模式,对照组实行常规的运行病历管理模式。不定期抽查两组运行病历,比较两组缺陷病历发生率,主要缺陷项目发生率以及患者填写各项知情同意书时对医护人员的满意程度。结果观察组患者总运行病历缺陷项目发生率为57%,对照组为86%,差异具有统计学意义(P0.05);规范培训后,观察组医护人员考核合格率为95.83%,对照组医护人员为83.33%,差异具有统计学意义(P0.05);患方填写各项知情同意书时对观察组医护人员总体满意率为87.5%,对对照组医护人员总体满意率为78.1%,差异具有统计学意义(P0.05)。结论医护一体化运行病历管理模式有助于提高运行病历质量,促进医护人员沟通,提高患者满意度。     

顾旭辨治冠脉支架术后心绞痛经验总结

正目前,冠状动脉内支架植入术(PCI)后心绞痛复发主要原因有:①再发新的冠状动脉病变(如冠脉狭窄或痉挛);②PCI治疗为不完全血运重建,还有其他冠脉病变狭窄未能解除;③PCI后再狭窄。对第一个原因可以再行冠状动脉造影检查,必要时再行PCI,但介入风险加大,也加重患者经济负担;而后两种情况往往病变较重,无法再行PCI,即使行PCI,效果也很差,甚至行冠脉搭桥治疗效果也不甚理想。顾旭是本院心病二科及重症医学科主任,郑州市中医药学会理事,从事临床工作20余年,在治疗心血