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目的构建及表达CD80胞外区与抗人CD33单链抗体(scFv)融合基因,并初步检测融合蛋白的生物活性。方法扩增CD80胞外区,利用人血清白蛋白(HAS)第三结构域亲水性的403-427位氨基酸作为链间连接肽将其与抗人CD33 scFv连接,并克隆至原核表达载体PET22b(+)中,经IPTG诱导,在大肠杆菌Rosseta(DE3)内得到融合蛋白的表达。表达产物经过溶解包涵体,镍柱亲和层析纯化和体外复性过程,获得了高纯度的融合蛋白。并用间接免疫荧光法检测融合蛋白与人CD33抗原结合活性。结果克隆出CD80胞外区序列,大小为633 bp,正确合成作为链间连接肽的人血清白蛋白(HAS)第三结构域的403~427位氨基酸。成功构建融合基因表达载体,SDS-PAGE和Western blot分析结果表明,融合蛋白在Rosseta(DE3)中得到高效表达,融合蛋白相对分子质量(Mr)约为55 000,复性后经过间接免疫荧光检测表明具有与人CD33抗原结合活性。结论成功构建PET22b(+)-CD80胞外区-CD33 scFv(ExCD80-CD33scFv)融合基因表达质粒,融合蛋白在宿主菌Rosetta(DE3)中获得了表达,并初步检测其生物学活性。 相似文献
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目的:探讨黄芩苷能否通过抑制人结肠癌SW480细胞中Notch通路的表达而抑制其增殖并促进其凋亡。方法:MTT法及流式检测术分别检测不同浓度黄芩苷对人结肠癌SW480细胞生长抑制及凋亡的影响;Western Blot法及RT-PCR法分别检测不同浓度黄芩苷对人结肠癌SW480细胞Notch1、Hes-1蛋白和Jagged1基因表达的影响。结果:随着药物剂量的增大,黄芩苷对人结肠癌SW480细胞的抑制率逐步上升;黄芩苷20 μmol/L组细胞凋亡率显著高于对照组;黄芩苷40 μmol/L组细胞凋亡率显著高于黄芩苷20 μmol/L组;黄芩苷20 μmol/L组细胞Notch1、Hes-1蛋白、Jagged1基因表达均显著低于对照组,黄芩苷40 μmol/L组Notch1、Hes-1蛋白、Jagged1基因表达均显著低于黄芩苷20 μmol/L组。结论:黄芩苷能抑制人结肠癌SW480细胞的增殖,促进其凋亡,这种作用可能是通过对细胞中Notch通路的负性调节而实现的。 相似文献
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目的:探讨影响脑出血患者心肌酶学变化的相关因素。方法将125例急性自发性脑出血患者分别按其出血量、出血部位、Glasgow评分进行分组,与50例健康体检者进行比较,观察各组患者心肌酶学急性期变化情况。并动态监测心肌酶学改变,了解酶学变化趋势。结果与健康对照组相比,出血量<20 mL、Glasgow评分>12分患者心肌酶学在急性期无明显改变(P>0.05);出血量>20 mL、Glasgow评分<12分患者心肌酶学急性期明显高于对照组(P<0.05);心肌酶学改变与出血部位有关,丘脑出血心肌酶改变最为显著;脑出血患者心肌酶高峰期在72 h,14 d基本恢复正常。结论脑出血患者心肌酶学变化与出血量、出血部位及病情严重程度密切相关,可将其作为监测病情变化和判断预后的有效指标。 相似文献
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两种热稀释法测量血流动力学参数在犬失血性休克模型中的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 比较经肺热稀释法和肺动脉导管法测量血流动力学参数。方法 通过经肺热稀释法(COa)、右心漂浮导管热稀释法(COpa)和脉搏诱导持续心输出量测量法(COpa)在加只犬失血性休克模型制作前后以及应用不同液体容量复苏后测量心输出量和血液动力学参数,比较COa、COpa、COpc之间的关系。并且比较经肺热稀释法、右心漂浮导管热稀释法两种方法测得的血液动力学参数(包括SVRI和SVI)。结果 实验全程中COpc、COa和COpc的相关性好,准确性很稳定。体循环指数(SVRI)和每搏输出量指数(SVI)在经肺热稀释法和右心漂浮导管热稀释法比较中呈正相关。结论 在犬失血性休克模型中,我们发现与肺动脉导管法相比较,经肺热稀释法测量得到的血流动力学参数准确稳定,COpc准确、可靠,体循环指数(SVRI)和每搏输出量(SVI)在两种方法中的相关性良好。 相似文献
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目的研究低温对肠缺血再灌注(IIR)所致急性肺损伤(ALI)肺脂质过氧化的影响。方法新西兰大白兔40只,随机分为空白对照组(肛温37.0~38.0℃)、缺血对照组(肛温37.0~38.0℃)、浅低温组(肛温32.0~35.0℃)、中低温组(肛温28.0~31.9℃)。实验组采用完全夹闭肠系膜上动脉1 h,开放后再灌注的方法制备IIR致ALI模型。采用体表降温的方法控制实验动物体温。实验过程中监测动物平均动脉压;再灌注前、后2、4、6 h行动脉血气分析;再灌注6 h后处死动物取肺组织标本,测定肺组织丙二醛(MDA)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果实验组动物出现IIR所致ALI。与空白对照组比较,实验组的PaO2降低,MDA水平升高,SOD活性降低。实施低温治疗后与缺血对照组相比,上述肺损伤的表现得到了改善,同时发现浅低温同中低温的治疗效果类似。结论浅低温和中低温可以有效改善IIR导致ALI动物模型的早期低氧血症,减轻肺组织脂质过氧化的程度。 相似文献
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