广西首例HIV-1G亚型毒株的发现和近似全长基因组序列分析

目的获得广西首例HIV-1 G亚型毒株全长基因组序列并分析其来源。方法采集1例广西HIV感染者血浆,提取病毒RNA,利用逆转录巢式-PCR技术,分两段扩增病毒近似全长基因序列,对PCR产物进行核苷酸序列测定,利用MEGA软件对全长序列进行系统进化分析。结果获得了8800 bp长度的近似全长基因组序列,系统发育分析结果显示该毒株与HV-1 G亚型参考株成簇,Bootstrap值为99%,通过与世界上其他地区流行的HIV-1 G亚型毒株进行亲缘分析,该毒株与喀麦隆流行毒株的关系最近。结论在广西发现了首例HIV-1 G亚型感染者,推测该毒株是由境外传入的,应对广西地区流行的HIV-1毒株的来源和变异进行密切监测。     

广西壮族自治区2008 - 2009年HIV-1流行毒株基因型及其分布

目的了解广西地区目前HIV-1流行毒株的基因型及其分布。方法收集广西地区13个市294名2008-2009年新诊断的HIV感染者血浆标本和背景信息,感染途径主要为异性性传播(86.1%)。采用RT PCR法分别扩增HIV-1 gag,pol全长基因(分别为1584 by和3147 by)及enu:基因的C2V3片段(558 bp),序列编辑后用Genotyping及Mega 5.031具确定病毒的基因型,用Simplot和Recombinant HIV-1 Drawing Tool软件进行病毒基因的重组分析。结果获得全长gag基因序列270条、全长pol基因序列246条、。enu>基因C2V3区序列223条,确定272例标本的基因型。CRFO1_AE占的比例最高(77.6% ),其次为CRF08_BC(10.7%)和CRF07_BC ( 7.4% ),有4例B(B'')亚型,1例G亚型,还有7例未知重组型。性别、民族间病毒基因型分布的差异无统计学意义。7株新型重组毒株有6株以CRF01_AE为母株,嵌人B和/(或)C的片段,还有1株为CRF07_BC和CRF08_BC的二代重组。结论广西地区目前流行的HIV-1毒株以CRFO1_AE为主,并出现以CRFO1_AE为母株嵌人其他毒株基因片段的新型重组毒株,呈现基因组结构复杂化趋势。     

有效抑制HIV复制下AIDS儿童患者外周血T淋巴细胞亚群的变化分析

目的 研究高效抗逆转录病毒治疗持续有效抑制HIV复制下AIDS儿童患者的T淋巴细胞亚群变化.方法 16例AIDS儿童患者接受HAART治疗1年以上,病毒载量检测低于50 IU/ml,在有效抑制HIV复制时M0和跟踪治疗3个月M3时用NucliSens EasyQ病毒载量检测仪检测血浆病毒载量,流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群,分析CD4+、CD8+T淋巴细胞及其相关亚群的变化.结果 16例儿童患者继续治疗3个月后血浆病毒载量持续低于50 IU/ml,在血浆病毒载量被持续有效抑制的情况下CD4+T淋巴细胞数、CD4+/CD8+T无明显增加.结论 有效抑制HIV复制下AIDS儿童患者外周血T淋巴细胞亚群短时间内变化不明显.     

广西壮族自治区HIV-1耐药警戒线研究

目的通过对广西艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)新近感染者耐药基因变异的研究,了解当地HIV耐药毒株传播的水平。方法通过序贯抽样的方法,采集70例2007年8-10月新确证的、年龄在15～25岁的HIV感染者的全血样本,使用In-house法扩增HIV-1 pol区部分基因片段,并进行耐药基因变异分析。结果得到47条序列,其中有1份在蛋白酶区发生主要耐药突变M46L,可引起对ATV和NFV的低水平耐药性;在反转录酶区存在T69NT突变,仅引起对d4T和DDI的潜在耐药性。根据WHO HIV耐药警戒线监测方法判断,广西HIV耐药株属于低传播水平(<5%)。结论广西HIV新近感染者中已有HIV耐药株的传播,但是目前传播水平还较低,应继续开展HIV耐药毒株传播的监测工作。     

广西部分吸毒人群丙型肝炎病毒及艾滋病病毒感染情况调查分析

目的 了解我区吸毒人群中丙型肝炎病毒(HCV)及艾滋病病毒(HIV)感染和两者合并感染的情况,为制定艾滋病及丙型肝炎的防治措施提供理论依据.方法 对我区部分在押的吸毒者共计3000名作为调查对象,制定统一的调查问卷进行调查,并采集静脉血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法检测HCV抗体和HIV抗体,当HIV抗体阳性时则用蛋白免疫印迹试验(Westem Blotting,WB)进行HIV抗体确证实验.结果 在3000名吸毒患者中,男性占88.4%,女性占11.6%;总的HCV抗体阳性率是85.6%,HIV抗体阳性率是18.2%,其中静脉注射吸毒者(IDUs)HCV抗体阳性2553名,感染率为86.1%,口吸吸毒者HCV抗体阳性21名,感染率60.O%;口吸吸毒人群中HIV抗体阳性3名,感染率为8.56%,静脉吸毒人群中HIV抗体阳性543名,感染率18.31%;HCV抗体阳性合并HIV抗体阳性有537名,感染率为20.86%.结论 广西吸毒人群的HCV感染率较高,尤其是静脉注射吸毒人群,应当加强对吸毒人群的综合干预措施,控制HCV及HIV的传播,降低新发感染.     

EasyQ方法检测HIV-1病毒载量的质量控制

目的探讨采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量的可行性和质量控制,分析提高检测质量而采取的措施。方法采用NucliSens EasyQ核酸扩增检测分析系统检测HIV-1病毒载量,汇总和分析检测情况。结果检测了2 090例血浆标本,第1次检测结果为有效结果的有1 992例,占95.3%;第1次检测结果为无效结果的有98例,占4.7%。在98例第1次检测结果为无效结果中,错误编码1(1例,1%),错误编码3(1例,1%),错误编码4(37例,38%),错误编码8(1例,1%),错误编码9(50例,51%),错误编码10(8例,8%)。结论NucliSensEasyQ核酸扩增检测分析系统是检测HIV-1病毒载量的一种可靠方法之一,严格执行质量控制措施可大大提高检测的准确度和有效性。     

中国南方四省区流行的HIV-1 CRF01_AE病毒株基因特征研究

Objective To analyze the genetic characteristics of HIV-1 CRF01_AE strains prevailing in. the four provinces of southern China. Methods Plasma samples were collected from the newly diagnosed HIV-1 individuals reported in 2006 in Guangdong, Guangxi, Jiangxi and Hunan province. The gag and env gene fragments were amplified from RNA template extracted from plasma using RT and nested PCR methods. CRF01_AE sequences were analyzed by phylogcnetie methods and characterized by calculating the genetic distance and Entropy analysis. Results Two main epidemic clusters were found to exist in the CRF01 AE strains from 210 HIV-1 CRF01 AE infected individuals collected in the 4 provinces, southern China. It was found that no international reference strain was closely correlated with cluster Ⅰ , which including 123 samples. The strains in cluster Ⅱ, consisting 57 cases of samples, were closely related with the strains identified in Vietnam. Genetic distance analysis of gag and env genes showed that the diversity of cluster Ⅰ was obviously less than that of cluster Ⅱ. Data on nucleotide polymorphism showed that nucleotides compositions of 42 sites in gag and 40 sites in env wer esignificantly different between the two clusters. When compared with cluster Ⅱ , the polymorphism decreased at 61 nucleotide sites but increased at 21 sites in cluster Ⅰ. Conclusion This was the first report describing that two main epidemic clusters were existed in CRF01_AE strains prevailing in the 4 provinces, Southern China. The vires in cluster Ⅰ was the dominant strain in this region, with shorter period of circulation and higher proportion seen in the HIV-infected population, which might belong to CRF01_AE strain with certain features facilitating the spread of the virus. The virus in cluster Ⅱ was highly homology with the CRF01_AE strains from Vietnam, and seemed to have had several events of epidemics in populations in border regions of China and Vietnam.     

广西艾滋病抗病毒治疗病毒学失败发生规律及风险因素分析

目的了解广西艾滋病抗病毒治疗病毒学失败情况,探讨发生规律及风险因素。方法用回顾性队列研究方法分析2010年1月1日至2014年12月31日广西抗病毒治疗信息数据库数据。按我国抗病毒治疗方案,病人入组治疗后每年监测1次病毒载量。抗病毒治疗病毒学失败定义为治疗中出现病毒载量400拷贝/m L。使用Lifetable法分别计算治疗6~11月、12~23月、24~59月的病毒学失败发生率。使用COX比例风险回归模型分析影响因素,计算校正P值(AP)和校正风险比(AHR),评估各因素与病毒学失败的关联强度。结果治疗6~11月、12~23月和24~59月的病毒学失败发生率分别为18.8/100人年(88 400/4 711.0)、12.2/100人年(66 700/5 483.0)和1.7/100人年(30 700/17 589.0)。56~岁年龄组患者发生病毒学失败的风险是18~岁年龄组患者的1.163倍(AP=0.024,AHR=1.163,95%CI=1.020-1.327)。静脉吸毒途径感染艾滋病者发生病毒学失败的风险是性途径感染艾滋病者的1.484倍(AP=0.000,AHR=1.484,95%CI=1.262~1.745)。WHO II期和III期患者发生病毒学失败的风险分别是WHO I期患者的1.248倍(AP=0.001,AHR=1.248,95%CI=1.092~1.427)和1.220倍(AP=0.003,AHR=1.220,95%CI=1.069~1.392)。县区级医院治疗患者发生病毒学失败的风险是自治区级医院治疗患者的1.275倍(AP=0.001,AHR=1.275,95%CI=1.101~1.477)。出现漏服药物和毒副反应患者发生病毒学失败的风险分别是不出现该类事件患者的1.239倍(AP=0.000,AHR=1.239,95%CI=1.126~1.363)和1.447倍(AP=0.000,AHR=1.447,95%CI=1.313~1.595)。各因素的风险比在治疗6~11月、12~23月和24~59月3个时段存在差异。结论广西艾滋病抗病毒治疗病毒学失败发生率随着治疗时间延长呈下降趋势。影响病毒学失败的风险因素也随着治疗时间延长而改变。建议根据患者临床特征和治疗时间调整治疗方案。     

高危人群HIV急性期/早期感染检测策略应用研究

目的 探索适合于高危人群HIV急性期/早期感染的检测策略,减少窗口期漏检。方法 收集来自广西的MSM人群专项调查样本,分别利用抗体诊断试剂（ELISA）、抗原抗体诊断试剂（ELISA）、抗原抗体诊断试剂（胶体金）、蛋白免疫印迹试验（WB）以及核酸检测建立四种检测策略,对常规策略与四种检测策略的检测结果进行对比和分析。结果 3253份调查样本中,策略一检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、10例;策略二检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、14例;策略三检测出抗体阳性、核酸阳性分别304例、17例;策略四检测出抗体阳性、核酸阳性分别为304例、20例。策略一至四的检测敏感性分别为96.91%、98.15%、99.07%、100.00%,四种策略对HIV急性期/早期感染者的检测能力优于常规策略。确证结果不确定或阴性而核酸结果阳性的病毒载量值均大于5000拷贝/ml,提示可能为HIV急性期/早期感染。结论 在HIV感染率较高的高危人群中,采用抗原抗体诊断试剂结合核酸检测方法可以检出HIV急性期/早期感染者,提高阳性检出率,四种检测策略各有优缺点,应根据实验室条件、样本量和目的选择使用。     

广西壮族自治区低档场所中老年嫖客与暗娼HIV-1感染者基因亚型研究

目的 了解广西壮族自治区低档场所中老年嫖客与暗娼的HIV-1感染者病毒基因亚型特征及传播规律。方法 采用方便抽样的方法,于2012年对广西壮族自治区4个城市和9个县（区）低档场所的嫖客（年龄≥50岁）与暗娼开展分子流行病学调查,进行HIV-1抗体筛查,对HIV-1抗体阳性者血浆进行pol区基因片段扩增和序列测定,对获得的基因序列进行系统进化树构建并鉴定毒株的基因亚型,分析毒株亚型分布特征及传播规律。结果 共招募4 048例中老年嫖客和784例低档暗娼,共发现116例HIV-1抗体阳性,中老年嫖客与暗娼的HIV-1抗体阳性检出率分别为2.5%（103/4 048）、1.7%（13/784）,对其中84例HIV-1抗体阳性者进行基因扩增和序列测定,53例获得基因序列（中老年嫖客48例、暗娼5例）。发现3种基因亚型,均为重组株,CRF01_AE占90.6%（48/53）,CRF08_BC占7.5%（4/53）,CRF07_BC占1.9%（1/53）。经系统进化树分析发现,48例CRF01_AE流行毒株聚集成2个传播簇Cluster 1和2;4例CRF08_BC聚集成1个传播簇。在CRF01_AE Cluster 1中又形成4个亚簇C1-SC1、2、3、4,各亚簇对象来源于同一处或相邻低档场所、或与同一省道毗邻乡镇的低档场所。结论 广西壮族自治区低档场所中老年嫖客与暗娼HIV-1感染者流行毒株仍以CRF01_AE为主,以同一处或相邻低档场所或毗邻乡镇呈小范围聚集,当地HIV-1阳性的中老年嫖客与暗娼可能是该人群易感者毒株快速传播的重要传染源。