结核分枝杆菌Km基因突变与耐卡那霉素药物的研究

目的分析结核分枝杆菌(T.M)耐卡那霉素(KM)和(Km)基因突变情况。方法通过传统梯度药敏试验和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析127株分枝杆菌临床分离株耐KM情况和Km基因的变化。结果药敏试验卡那霉素耐药率为35.4%(45/127),127株分枝杆菌临床分离株的16S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同。45株耐卡那霉素分离株中,12株(26.6%)Km基因SSCP泳动异常。结论T.M对抗结核二线药物中的KM药物已出现耐药,其部分耐药原因可能是由于T.M耐KM药物的Km基因突变所致。     

结核分支杆菌五种耐药基因检测的临床应用及评价

目的　检测结核分支杆菌rpoBkatG、rpsL、pncA和embB耐药基因 ,评价其临床应用价值。方法　采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)分析和药敏试验 (比例法 ) ,了解 10 9例肺结核患者结核分支杆菌耐药情况 ,并分析、比较临床治疗效果。结果　 1/ 2以上的肺结核患者至少耐两种抗结核药物 ,对RFP、INH、SM、PZA和EB总耐药率分别为 80 7%、71 5 %、78 8%、5 7 7%和48 6%。rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变率分别为 76%、68%、71%、5 1%和 3 0 %。结核分支杆菌耐药基因突变率与耐药水平联系密切 ,多数结核分支杆菌耐药基因突变易发生在高耐药株 ,也有少数基因突变发生在低耐药株。根据药敏试验和耐药基因检测结果 ,6个月耐多药结核治愈率分别达到 5 4 8%和 62 8% ,治疗效果满意 ,两种方法差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　耐药基因检测指导治疗是一种新探索 ,PCR SSCP方法敏感、特异 ,可以快速检测结核分支杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB耐药基因突变 ,可能会成为临床指导用药的好方法     

糖皮质激素在结核病治疗中的合理应用专家共识

糖皮质激素具有抗炎、抗过敏、抗细菌内毒素和免疫抑制等药理作用,能够减轻机体对结核分枝杆菌变态反应所致的免疫损伤。但糖皮质激素在迅速控制病情的同时可以导致菌群失调、消化性溃疡、骨质疏松等不良反应。临床上使用糖皮质激素辅助治疗结核病存在不合理现象,因此,亟需规范糖皮质激素在结核病治疗中的应用。本共识简要介绍了糖皮质激素治疗结核病的优势和基本原则,提出必要时在强力有效抗结核药物治疗的前提下应用糖皮质激素辅助治疗结核性脑膜炎、结核性心包炎、结核性胸膜炎、结核性腹膜炎、急性血行播散性肺结核、干酪性肺炎等的推荐意见,以及应用糖皮质激素的注意事项、不良反应及应对措施;强调糖皮质激素辅助治疗结核病应慎重并严格掌握适应证,权衡利弊,规范使用。     

SARS患者血清干扰素-2α和肿瘤坏死因子水平检测

目的观察SARS患者血清干扰素-2α(IFN-2α)和血清肿瘤坏死因子(TNF)含量变化.方法用放射免疫法检测了66例SARS患者血清IFN-2α和TNF含量,并与正常对照组作了比较.结果 SARS组进展期患者IFN-2α含量明显高于对照组,重型SARS患者血清IFN-2α含量高低不一 .SARS组进展期患者TNF含量明显高于对照组,重型SARS患者血清TNF含量明显高于普通型.结论患者血清IFN-2α和TNF含量变化提示细胞免疫参与了机体的免疫反应,重症SARS患者IFN-2α和TNF含量变化反映了患者的免疫机能状况差异.     

应用基因芯片分析结核分枝杆菌常见耐药基因型的研究

目的应用基因芯片快速检测结核分枝杆菌耐药基因型，建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验和PCR－直接测序方法为对照，应用基因芯片快速检测157株结核分枝杆菌临床分离株异烟肼（INH）、利福平（RFP）、链霉素（SM）和乙胺丁醇（EMB）耐药基因（katG、rpoB、rpaL、rrs和embB）的带荧光素标记的PCR产物。结果PCR-直接测序和基因芯片检测36株结核分枝杆菌药物敏感株的5种耐药基因均为野生型。121株结核分枝杆菌耐药分离株中，56株耐INH分离株，katG基因突变率为62．5％，其中katG缺失率为7．5％，315位密码子突变率为55．4％，279位密码子突变率为1．8％；104株耐RFP株，rpoB基因突变率为94．2％，最常见的突变位点为531位和526位密码子（突变率分别为60．6％、15．4％），双位点突变率为5．8％，还发现511、513、515、516、517、518和533位密码子突变；62株耐SM分离株，rpsL和ITS总突变率为88．7％（两者分别为82．3％、6．5％），rpsL突变位于43位和88位密码子（突变率分别为77．4％、4．8％），rrs突变位于513位和516位碱基（突变分别为4．8％、1．6％）；57株为耐EMB株，embB基因突变率为61．4％，均为306位密码子突变，最常见的突变为ATG→GTG或剐rA（突变率分别为35．1％、15．8％），还发现306位密码子ATG→ATC、ATT和CTG突变。通过基因芯片检出的突变与基因测序结果一致。结论应用基因芯片可分析大多数结核分枝杆菌耐药基因型，弥补传统药敏试验方法的不足，指导临床治疗。     

葛根素的提取及对小鼠解酒护肝功能的鉴定

目的：提取葛根中的葛根素,HPLC法检测提取的葛根素,并比较不同剂量的葛根素与解酒效果的相关性,评价不同剂量葛根素解酒护肝效果。方法在前期实验所得的最优条件下提取葛根素备用,HPLC法定性定量检测葛根醇提物( PRE),将雄性健康昆明小鼠随机分为空白组、阳性对照组、葛根素干预组(每组10只)。先给小鼠灌胃葛根提取物,30 min后灌胃白酒,观察醉酒小鼠的醒酒时间及测定小鼠肝组织ADH、GOT、GPT含量变化,以探讨葛根素对醉酒小鼠的影响。结果 HPLC测定8倍体积分数的70%乙醇,在60℃恒温摇床水浴提取30 min为葛根素提取的最优条件;与阳性对照组相比,低、中、高剂量的葛根醇提物能显著缩短醉酒小鼠的醒酒时间,中剂量的PRE能有效抑制酒精的吸收,降低肝组织中ADH、GOT、GPT的浓度,而高剂量的PRE对酒精的吸收影响较小。结论 HPLC法能对葛根素提取物进行定性定量测定;葛根素对急性酒精中毒导致的小鼠肝损伤有保护性调控作用,葛根素剂量与解酒效果呈良好的正性相关。     

严重急性呼吸综合征患者血清TNF含量动态观察及评价

SARS(严重急性呼吸综合征), 是一种新的烈性传染病, 2003年初短短的半年时间以极强的感染传播力和毒性, 波及世界30余个国家和地区, 已经引起包括我国在内的世界各国高度重视.SARS病原体冠状病毒的靶器官主要是肺脏和免疫系统[1], 它既可以引起机体的免疫反应, 也可以造成宿主免疫抑制或免疫损伤.为了解宿主病程中血清肿瘤坏死因子(TNF)含量的动态变化, 本文对29例SARS患者的TNF含量作了观察并与正常组作了对比, 现将结果报道如下.     

结核分支杆菌耐药基因检测对获得性耐药性的研究

了解不同年龄段肺结核病人的结核分支杆菌获得性耐药情况, 比较两种耐药性检测方法的检测效果, 评价它们的临床应用价值.用药敏试验(绝对浓度法)检测了结核分支杆菌株对RFP、INH、SM、PZA和EMB耐药情况, 采用聚合酶链反应-单链构象多态性分析(PCR-SSCP)检测结核分支杆菌耐药rpoB、katG、 rpsL、pncA和embB基因突变, 用绝对浓度法作药物敏感试验.青年组、中年组和老年组获得性耐药率分别为89.2%、85.3%和67.6%, 耐药基因突变率分别为76.2%、81.3%和63.2%,青年组耐药率和耐多药率显著高于其他组.结核杆菌耐药基因突变与耐药水平联系密切, 多数结核分支杆菌耐药基因突变易发生在高耐药区,也有少数基因突变发生在低耐药区.不规律用药时间越长耐药率越高.不同年龄组获得性耐药情况有差别, 应重视不同年龄组, 特别是青年组耐药率检测.PCR-SSCP是一种快速检测结核杆菌rpoB、katG、rpsL、pncA和embB基因突变敏感、特异的方法.     

三种结核抗体试剂盒在结核病诊断中的应用评价

目的 评价3种结核抗体试剂盒在结核病诊断中的应用价值。方法 收集2015年1—12月解放军第三〇九医院病理科应用聚合酶链反应反向斑点杂交法(polymerase chain reaction-reverse dot blot,PCR-RDB)进行组织标本分枝杆菌菌种鉴定(以下称“分子病理”)的601例患者资料,排除不符合纳入标准的患者,最终纳入205例患者。通过病案检索获得3种结核抗体试剂盒(TB-IgG、SD Rapid TB、TB-DOT)检测外周血结核抗体的结果。应用SPSS 20.0统计学软件,分析3种结核抗体相较于分子病理学检测的敏感度、特异度等检测效能,采用McNemar检验和Kappa值分析检测结果的差异性和一致性。结果 以分子病理检查结果为标准,TB-IgG、SD Rapid TB、TB-DOT 试剂盒的敏感度分别为26.6%(34/128)、20.3%(26/128)、97.7%(125/128);特异度分别为90.9%(70/77)、98.7%(76/77)、3.9%(3/77);阳性预测值分别为82.9%(34/41)、96.3%(26/27)、62.8%(125/199);阴性预测值分别为42.7%(70/164)、42.7%(76/178)、50.0%(3/6);正确指数分别为0.18、0.19、0.02。TB-IgG、SD Rapid TB 试剂盒检测结果分别与分子病理检查相比较,诊断差异均有统计学意义( {\chi }_{\mathit{配对}}^2 =9.17,P<0.001;矫正 {\chi }_{\mathit{配对}}^2 =13.58,P<0.001),且与分子病理检测存在微弱一致性(Kappa值分别为0.14、0.15,P值均<0.001);而TB-DOT与分子病理的诊断差异无统计学意义(矫正 {\chi }_{\mathit{配对}}^2 =0.04,P=0.833),不能肯定与分子病理检测存在一致性(Kappa值=0.02,P=0.523)。 结论 3种结核抗体试剂盒检测结果存在一定差异,SD Rapid TB在3种检测方法中相对较好;多种抗原联合检测可以提高检测的敏感度和特异度,对结核病诊断具有辅助价值。     

免疫检查点抑制剂相关甲状腺毒性研究进展

免疫检查点抑制剂（ICIs）作为肿瘤免疫治疗的一种强效抗癌方式越来越多地应用到肿瘤治疗中。其通过解除肿瘤细胞对于机体免疫细胞的抑制作用达到杀伤肿瘤细胞的作用，但在作用过程中由于过度激活免疫细胞引发机体包括内分泌系统在内的多个系统出现自身免疫反应，即免疫相关不良事件（irAEs）。甲状腺毒性是比较常见的内分泌毒性，包括甲状腺功能减退、甲状腺功能亢进、甲状腺炎甚至甲状腺危象等。随着临床上ICIs的广泛应用，甲状腺毒性的发生势必越来越多，现就其流行病学、发病机制、临床表现及临床管理方面做如下综述，以提高临床医生的认识，改善癌症患者的生存质量。