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目的:观察重组质粒DNA直接免疫接种诱导BALB/c小鼠的免疫应答水平,为恶性疟原虫DNA疫苗在动物和人体的应用提供依据。方法:构建编码多价保护性抗原的重组质粒pcDNA3-Pf8,PCR法检测免疫鼠的肌肉、肝脏、肾脏、心脏、脾脏和肺组织中pcDNA3-Pf8,ELISA、T淋巴细胞转化试验、体外抑制试验观察其诱导的体液免疫及细胞免疫水平。结果:用PCR法从上述组织中均检测到pcDNA3-Pf8,ELISA法测得免疫鼠血清的特异性抗体滴度达12560,淋巴细胞转化试验显示恶性疟原虫可溶性抗原能特异性地剌激免疫鼠脾细胞增殖,免疫血清在体外还能抑制恶性疟红内期疟原虫的生长、发育。结论:编码恶性疟原虫多价保护性抗原的重组质粒pcDNA3-Pf8直接免疫接种,能特异性地剌激BALB/c小鼠产生体液免疫和细胞免疫应答,其免疫血清在体外对疟原虫生长发育具有明显抑制作用。 相似文献
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恶性疟原虫疫苗研究Ⅱ.一种新的化学拼接法重组多价保护性抗原的基因 总被引:1,自引:2,他引:1
将恶性疟原虫保护性抗原环子孢子蛋白(CSP)、环状体感染红细胞表面抗原(RESA)、裂殖子表面抗原1和2(MSA1和MSA2)4种抗原中具有T和/或B细胞表位的6个基因片段,按照我们设计的方案排成一条线性序列,经在计算机上分析比较后,分成长短不一的8个基因片段(F1~F8),其中F1、F3、F5和F7为正链片段,F2、F4、F6和F8为负链片段。每相邻两个片段间预设15个互补碱基搭头。在DNA合成仪上分别合成这8个片段后,把F2~F76个片段分别磷酰化,按等摩尔浓度混合。经30℃退火,使8个片段连接起来,然后按基因体外扩增的原理,填补互补碱基以外的缺口,重组成新的多价基因。我们把这种化学拼接法取名为“缺口填补法(Filling-qapMethod)”,经克隆和测序验证,表明这种方法具有效果好、经济、简便等优点。 相似文献
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广州管圆线虫致病机制的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
广州管圆线虫是一种人兽共患寄生虫,幼虫侵入人体后可移至大脑,主要引起嗜酸性粒细胞增多性脑膜脑炎。其发病为幼虫移行,幼虫在颅部占位并释放代谢产物,基质金属蛋白酶与纤溶酶原活化因子的产生,嗜酸性粒细胞对神经细胞的毒害及超敏反应等多因素作用的结果。偶尔该虫也可侵犯眼球,眼球病变主要是免疫反应导致的损害。了解广州管圆线虫的发病机制,对该病的防治和诊断具有重要意义。 相似文献
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本文根据恶性疟原虫MSP1 19已知序列,自行设计一对用于特异扩增MSP1C 端19肽基因的引物P1,P2在P1引物中引入Sal I酶切位点及ATG起始密码子,在P2引物中引入Xba I酶切位点及终止密码子,经PCR扩增获得363bp大小片段,与预期大小相符,采用“压碎与浸泡法”纯化回收PCR产物,PCR产物经套式PCR及酶切鉴定证实与预期大小相符。采用“压碎与浸泡法”纯化回收PCR产物,PCR产 相似文献
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我国于2010年正式启动了国家消除疟疾行动,计划于2020年在全国范围内消除疟疾。要如期实现消除疟疾的目标,必须要客观认识疟疾消除阶段的特点,制订科学合理的防控策略和技术措施。本文通过对疟疾控制和消除阶段的比较,分析疟疾消除阶段目标、策略和措施调整与转变的必要性和紧迫性,对我国现行的消除疟疾"1 3 7定点清除"工作模式的背景、定义、工作重点及技术难点进行阐述,以增进各级医疗卫生机构对我国当前消除疟疾目标、策略和措施的认识,促进相应策略和措施的创新和贯彻落实,推动我国消除疟疾工作。 相似文献
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恶性疟原虫疫苗研究Ⅱ.一种新的化学拼接法重组多价保… 总被引:5,自引:0,他引:5
将恶性疟原虫保护性抗原环子孢子蛋白、环状体感染红细胞表面抗原、裂殖子表面抗原1和2(MSA1和MSA2)4种抗原中具有T和/或B细胞表位的6个基因片段,按照我们设计的方案排成一条线性序列,经在计算机上分析比较后,分成长短不一的8个基因片段(F1-F8),其中F1、F3、F5和F7为正链片段,F2、F4、F6和F8为负链片段。每相领两个片段间预设15个互补碱基搭头,在DNA合成仪上分别合成这8个片段 相似文献
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恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1(MSP1)在其分子C-端MPS-119具有两个类EGF结构,其中类EGF-1为特异性抗体抑制疟原虫侵入红细胞的靶位之一。本文通过酚-氯仿抽提,乙醇沉淀法提取恶性疟原虫(FCC-1HN株)基因组DNA,再用PCR扩增类EGF-1基因,经酶切纯化后插入质粒pGEM3Zf(+)中,转化大肠杆菌DH5a,经PCR筛选及双酶切鉴定,筛选出含类EGF-1基因的阳性克隆子。 相似文献
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应用末端标记的酶解凝胶直读技术,结合末端鉴定法与片段重叠法,测出了布氏姜片吸虫和肝片形吸虫5S rRNA的全核苷酸顺序,在二级结构水平上,与已测出的其它各类生物667个5S rRNA顺序比较,发现两种片形吸虫5S rRNA多分枝环由GAAG序列构成,而不是其它生物中常见的GAUA。对两种片形吸虫5S rRNA的其它结构特点也进行了讨论。 相似文献
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恶性疟原虫主要裂殖子表面蛋白1(MSP1)在其分子C-端MPS-119具有两个类EGF结构,其中类EGF-1为特异性抗体抑制原虫侵入细胞的靶位之一。本文通过酚-氯仿抽提,乙醇沉淀法提取恶性疟原虫(FCC-1HN株)基因组DNA,再用PCR扩增类EGF-1基因,经酶切纯化后插入质粒pGEM3Zf(+)中,转化大肠杆菌DH5a,经PCR筛选及双酶切鉴定,筛选出含类EGF-1基因的阳性克隆子。 相似文献