心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用

目的 :研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用。方法 :采用MTT比色法 ,观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力。结果 :心肌肽素及 5个分离组分均显示了促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 ,其中P1组分活力较强 ;各组分相加亦显示促进酶活力的作用 ,但未见显示相加效应。结论 :心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 ,系各组分所含物共同作用的结果。     

肝再生增强因子(ALR)的免疫组织化学定位研究及乙型肝炎患者血清ALR水平观察

探讨ＡＬＲ的组织分布 ,观察乙型肝炎患者血清ＡＬＲ水平。取鼠、人胎儿各新鲜组织固定后 ,低温石蜡包埋切片 ,以ＳＡＢＣ试剂盒进行免疫组织化学染色 ;用ＥＬＩＳＡ法检测乙型肝炎患者血清ＡＬＲ水平。结果显示 ,组织细胞染色呈胞浆、胞膜型 ,尤以睾丸、肝脏最强 ;乙型肝炎患者血清ＡＬＲ水平高于正常组 (Ｐ <0 .0 1) ,呈非常显著差异。ＡＬＲ的组织分布 ,既无种族特异性 ,也无器官特异。肝赃是ＡＬＲ作用的靶器官 ,其本身也可产生ＡＬＲ。肝再生增强因子(ALR)的免疫组织化学定位研究及乙型肝炎患者血清ALR水平观察@杨联萍!510602$广州…     

人肝再生增强因子在体外可与Na+-K+-ATPase 特异性结合

目的： 用体外下拉实验证明人肝再生增强因子（hALR）与其相互作用蛋白Na+-K+-ATPase的体外结合作用。方法：将Na+-K+-ATPase β亚基部分基因片段定向克隆到pGEX-4T-1 中, 转化大肠杆菌DH5α，IPTG 诱导, 获得Na+-K+-ATPase β亚基部分蛋白与谷胱甘肽（GST）的融合表达，经GST偶联的琼脂糖珠纯化, 以GST下拉实验检测其与hALR蛋白的体外直接相互作用。结果：还原型SDS-PAGE 显示GST- Na+-K+-ATPase 融合蛋白泳道有hALR蛋白单体和二聚体条带，Western blotting 结果进一步证实为hALR蛋白。结论：Na+-K+-ATPase可在体外与hALR蛋白特异地结合。     

乳猪肝胶原水解物的制备及其对荷瘤小鼠肿瘤生长影响的实验研究

目的:从乳猪肝中提取可溶性胶原,经水解后制备肝胶原水解物(HCH),观察其对荷瘤小鼠S180纤维肉瘤和HepA肝瘤增殖的影响。方法:从乳猪肝中用生化方法提取可溶性胶原,经胃蛋白酶水解制备HCH;采用SDS-PAGE电泳和激光飞行时间质谱测定其分子量。设立生理盐水阴性对照和阿霉素阳性对照组,观察HCH对荷瘤昆明小鼠S180纤维肉瘤和HepA肝瘤增殖的影响。结果:电泳结果显示,HCH的分子量范围为3.494~8.702kD,质谱结果显示,其分子量为2.313~8.809kD。其对荷瘤小鼠S180纤维肉瘤生长的抑制呈剂量相关性,25、50、100mg·kg^-1·d^-1的抑制率为53.87%、76.53%、58.20%,而阿霉素(2mg·kg^-1·d^-1)阳性对照组的抑制率为62.41%;HCH能剂量依赖性地抑制HepA肝瘤生长,25、50、100、200mg·kg^-1·d-1的抑制率为43.26%、55.06%、74.71%、40.47%。结论:经此方法制备HCH,其分子量在2~9kDa之间,能抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长。     

肝细胞提取物组分S4对肿瘤细胞体外增殖的影响

目的观察肝细胞提取物组分Ｓ４对８株肿瘤细胞增殖的影响．方法采用ＭＴＴ比色法研究不同浓度Ｓ４对８株肿瘤细胞不同时相增殖的影响．结果Ｓ４对７４０２，７７２１，７７０３，Ｈｅｐｅ肝癌细胞作用７２ｈ后ＩＣ５０（ｍｇ／Ｌ）分别为３９，４２，９５和６５．对胃腺癌细胞（ＳＧＣ７９０１）、回盲部腺癌细胞（ＨＣＴ８）、肺腺癌细胞（ＧＬＣ８２）作用７２ｈ的ＩＣ５０分别为１４３，９９和５４．对鼻咽癌细胞（ＣＮＥ２）４８ｈ未显示抑制作用．结论Ｓ４抑制７株肿瘤细胞呈现明显的量效与时效关系，在１ｍｇ／Ｌ～１０ｍｇ／Ｌ浓度范围内及２４ｈ～７２ｈ时限内，抑制作用随剂量增加、时间延长而增强     

人肝再生增强因子的酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用检测

目的 构建肝再生增强因子的酵母双杂交诱饵质粒，为进一步研究其相互作用蛋白奠定基础。方法 将人肝再生增强因子的编码序列重组入pGBKT载体中，经酶切及序列分析鉴定构建正确后，转化酵母AHl09菌株，转化子在SD／-His／-Trp选择培养基上培养；滤纸法β-半乳糖苷酶活性测定；Westem blot检测目的蛋白表达情况。结果 正确地构建了人肝再生增强因子的酵母双杂交诱饵质粒pGBKT7-hALR，其酵母AHl09转化菌在SD／-Trp培养基上30℃培养65h，长出φlmm菌落，而在SD／-Trp-His培养基上不生长，β-半乳糖苷酶活性检测呈阴性。Westem blot结果显示目的蛋白以35KD的融合蛋白形式表达。结论 诱饵质粒pGBKT7-hALR对宿主菌AHl09没有毒性作用，能稳定表达目的蛋白，不能自身激活报告基因，可用于酵母双杂交的筛选工作。     

乳猪肝胶原蛋白水解物注射液的研制及对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

目的 与方法 摸索乳猪肝胶原蛋白水解物注射液(HCH)的制备方法 ,同时对其进行质量检验和初步稳定性试验;并观察其对荷瘤昆明小鼠HepA肝瘤和S180纤维肉瘤及小鼠体内肝癌H22移植瘤的影响.结果 HCH生产工艺路线合理,质量达到拟定标准要求.HCH能明显抑制HepA肝瘤生长,25、50、100、200 mg·kg-1·d-1的抑制率分别为43.26%、55.06%、74.71%、40.47%;对荷瘤小鼠S180纤维肉瘤25、50、100 mg·kg-1·d-1的抑制率分别为53.87%、76.53%、58.20%,而阿霉素(2 mg·kg-1·d-1 )阳性对照组的抑制率为62.41%;对小鼠体内肝癌H22移植瘤生长的抑制呈剂量相关性,50、100、200 mg·kg-1·d-1的抑制率分别为48.1%、60.0%、74.8%,而卡铂(20 mg·kg-1·d-1 )阳性对照组的抑制率为63.7%.结论 此法可制备合格的HCH,且适合于大规模生产;HCH能明显地抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长.     

心肌肽素对大鼠心肌匀浆脂质过氧化的影响

目的 观察小分子多肽类物质心肌肽素对心肌匀浆孵育脂质过氧化的影响。方法 制备５％（质量体积浓度）大鼠新鲜心肌匀浆液。取１．９ｍｌ均浆液,分别加入０．１ｍｌ生理盐水及不同浓度心肌肽素,使心肌肽素终浓度分别为５,１０,２０μｇ／ｍｌ,置３７℃水浴振荡６０ｍｉｎ。分别以硫代巴比妥酸法和光化学扩增法检测心肌脂质过氧化反应终产物ＭＤＡ的含量及细胞内ＳＯＤ活性。结果 心肌肽素可剂量依赖性地显著降低心肌匀浆中Ｍ     

重组人肝增强因子的纯化及鉴定

人肝增强因子是一种能促进正常肝细胞再生及损伤肝细胞修复的肝再生调控因子。重组人肝增强因子在大肠杆菌中以包涵体形式存在。发酵菌体经冻融、溶菌酶、超生 3步联合作用后 ,破菌率达 98% ,粗制包涵体经ＴＥ缓冲液、0 .5%Ｔｒｉｔｏｎ 10 0、2ｍｏｌ/Ｌ脲、70 %异丙醇依次洗涤 ,回收沉淀 ,用溶解于 50ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣＬ(ｐＨ8.0 )的8ｍｏｌ/Ｌ脲裂解 ,同时加 2 巯基乙醇 ,待包涵体全部溶解后 ,离心去杂质 ,上清液稀释至蛋白终浓度为 0 .1ｍｇ/ｍｌ,置 4℃复性。复性液经ＭｏｎｏＱ柱 ,以 50ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ ＨＣＬ 1ｍｏｌ/…     

肝再生增强因子的免疫组化定位及其在肝炎病患者血清水平观察

目的：探讨肝再生增强因子（ALR）的组织分布,观察肝炎患血清ALR的水平,方法：取鼠、人胎儿系列新鲜组织固定后,石蜡包埋切片,以SABC试剂盒进行免疫组化染色定位;用ELISA法检测肝炎病患血清ALR水平,结果：免疫组化染色结果显示,ALR在组织细胞中呈胞浆,胞膜型分布,尤以睾丸、肝脏染色最深;慢性肝炎患血清ALR水平升高非常显（P＜0．001）,急性肝炎患血清ALR水平升高显（P＜0．05）,急、慢性肝炎患ALR无显差异,结论：ALR主要分布肝脏和睾丸组织,既无种族特异性,也无器官特异,肝脏是ALR作用的靶器官,其本身也可产生ALR。