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91.
92.
目的探讨大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离、培养及鉴定的方法。方法解剖分离E14d大鼠胚胎腹侧中脑组织,经机械吹打制成单细胞悬液,接种于无血清培养基中培养,观察其增殖、分化并进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定。结果原代培养7d后,可形成大量悬浮生长Nestin免疫阳性的神经球,经诱导分化后细胞呈GFAP、CNPase或β-Ⅲ-tubulin免疫阳性。结论建立大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离培养与鉴定的方法,为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。 相似文献
93.
目的 评价我国3种商品化抗棘球蚴抗体检测试剂盒用于棘球蚴病血清学诊断的效能。方法 收集142份细粒棘球蚴病、89份多房棘球蚴病确诊患者及39份健康对照者血清标本,分别采用试剂盒A[酶联免疫吸附试验(ELISA法)]、B(ELISA法)、C(胶体金法)检测,比较细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血常规和生化指标差异,分析采用试剂盒A和B检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体吸光度值(A值)与血常规及生化指标的相关性,评价3种试剂盒检测棘球蚴病的效果。结果 细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEU)、单核细胞计数(MONO)、嗜碱性粒细胞计数(BASO)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、间接胆红素(IBIL)中位数差异无统计学意义(P均 > 0.05),细粒棘球蚴病患者淋巴细胞计数(LYM)和白蛋白(ALB)中位数显著高于多房棘球蚴病患者(P均< 0.05),而多房棘球蚴病患者嗜酸性粒细胞计数(EOS)中位数显著高于细粒棘球蚴病患者(P < 0.01)。采用试剂盒A检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体A值与患者WBC(rs = 0.153,P < 0.05)、EOS(rs = 0.174,P < 0.05)呈线性正相关,与TBIL(rs = -0.134,P < 0.05)、IBIL(rs = -0.146,P < 0.05)呈线性负相关。采用试剂盒B检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体A值与WBC(rs = 0.257,P < 0.01)、NEU(rs = 0.203,P < 0.01)、MONO(rs = 0.159,P < 0.05)、EOS(rs = 0.330,P < 0.01)、ALT(rs = 0.171,P < 0.01)、AST(rs = 0.160,P < 0.05)呈线性正相关,与ALB呈线性负相关(rs = -0.168,P < 0.05)。试剂盒A、B和C诊断棘球蚴病患者的总符合率分别为86.30%、69.63%和91.48%,敏感度分别为84.42%、64.94%和92.21%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.82、0.62和0.79,Kappa值分别为0.600、0.337和0.750。试剂盒A、B和C诊断细粒棘球蚴病患者的总符合率分别为84.54%、64.64%和71.82%,敏感度分别为80.99%、55.63%和68.31%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.78、0.53和0.56;试剂盒A、B和C诊断多房棘球蚴病患者的总符合率分别为92.19%、85.16%和85.16%,敏感度分别为89.89%、79.78%和84.27%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.87、0.77和0.72。试剂盒C在诊断细粒和多房棘球蚴病时存在交叉反应。试剂盒A和B用于诊断棘球蚴病的受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)曲线下面积分别为0.970和0.948,差异无统计学意义(Z = 1.618,P > 0.05),试剂盒A和B诊断棘球蚴病结果具有较好一致性(Kappa = 0.585,P < 0.01)。结论 3种抗棘球蚴抗体检测试剂盒对多房棘球蚴病血清学诊断效果均优于细粒棘球蚴病。试剂盒A诊断棘球蚴病具有较高敏感性和特异性,检测性能相对稳定、干扰因素相对较少,适合用于棘球蚴病术前初步诊断和术后患者血清抗体随访监测;试剂盒C诊断棘球蚴病具有较高敏感性和特异性,操作方便、报告率高,适用于棘球蚴病初步筛查。 相似文献
94.
早期血液滤过对重症急性胰腺炎家猪TNF-α及IL-1β水平的影响 总被引:4,自引:2,他引:2
目的 探讨早期血液滤过对重症急性胰腺炎 (SAP)家猪血浆促炎细胞因子TNF α和IL 1β水平和组织转录水平的影响。方法 采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制家猪SAP模型 ,按拆信封法分为胰腺炎血滤治疗组 (HF组 )和胰腺炎非血滤治疗组 (NHF组 )。采用ELISA法检测两组动物建模前、后TNF α和IL 1β的血浆水平。用半定量逆转录聚合酶链式反应检测这两种细胞因子在胰、肝、肺组织中的转录水平。结果 建模后 1h、2h及 4h ,NHF组血浆TNF α及IL 1β水平逐渐升高 ,至 6h分别为 ( 1375± 334)pg/ml及 ( 96 5± 2 6 5 )pg/ml,明显高于同期HF组的 ( 6 18± 2 76 )pg/ml及 ( 4 45± 14 1)pg/ml(P<0 .0 1)。建模后 6h ,NHF组胰、肝、肺组织中TNF αmRNA的转录水平分别为 85 .7± 17.4、78.1± 10 .2和 82 .4± 10 .5 ,均高于HF组的 5 7.8± 8.9、4 8.0± 8.1和 4 6 .2± 9.6 ,P<0 .0 1;而IL 1βmRNA的转录水平NHF组为 82 .2± 15 .7、6 0 .0± 10 .6和 5 8.1±9.3,均高于HF组的 5 5 .9± 9.0、4 0 .6± 9.2和35 .7± 9.8,P<0 .0 1。结论 早期血滤能降低SAP家猪血浆TNF α和IL 1β的水平和转录水平 相似文献
95.
96.
Objective To investigate whether hypoxic environment can promote the metastasis of pancreatic cancer cells by inducing epithelial to mesenchymal transition (EMT). Methods The Panc-1 cells were cultured in hypoxia environment. After cultured for indicated periods, the in vitro invasive ability of Pane-1 cells was compared with normoxia group using Transwell invasion assay. The epithelial marker E-cadherin and the mesenchymal marker vimentin were assayed by Western blot. The expression of Snail, a strong activator of EMT, was detected by real-time PCR. The HIF-1 α encoding cDNA was transiently trans-fected into the Pane-1 cells, and the E-cadherin and vimentin were analyzed. Results The number of cells invading to the lower side of the membrane under hypoxia was ( 121±5 ), whereas only ( 84±3 ) in no-morxia group ( P < 0.05 ). The relative expression of E-cadherin in normoxia, hyoxia groups at 12,24,48 hwas (0.59±0.04 vs 54.00±0.05,0.45±0.10,0.36±0.03 ), and that of vimentin was (0.36±0.05, 0.41±0.04,0.48±0.06,0.58±0.05 ) ( P < 0.05 ). The relative expression of Snail mRNA was in-creased in hypoxia environment, and the difference was significant after 72 h ( P < 0.05 ). Before and after HIF-1α cDNA was transfected into the Panc-1 cells, the relative expression of E-cadherin was 0.63± 0.05, and 0.47±0.07, and that of vimentin was 0.47±0.07, and 0.32±0.04 respectively ( P < 0.05 ). Conclusion Hypoxia microenvironment can activate HIF-1α and Snail to trigger EMT of pancreatic cancer cells. 相似文献
97.
不同类型早期肠道营养对重症急性胰腺炎大鼠细胞因子平衡和免疫状态的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 评价早期免疫增强型肠内营养对重症急性胰腺炎 (severeacutepancreatitis,SAP)大鼠血浆细胞因子和免疫功能的影响。方法 170只SD大鼠随机分为正常对照组、 2 4h组、SAP对照组、传统肠外营养组 (TPN组 )、增强型肠外营养组 (S TPN组 )、传统肠内营养组 (EN组 )和免疫增强型肠内营养组 (S EN组 ) ,胰胆管逆行注射2 5 %牛磺胆酸钠建立SAP模型。检测各时点血浆TNF α、IL 10水平及T细胞分类情况。结果 建模第 4天 ,与EN组比较 ,S EN组TNF α、IL 10水平高 ,IL 10 /TNF α比值低 (P均 <0 0 5 ) ;第 7天 ,S EN组上述指标较其它各组均低 (P均 <0 0 5 )。S EN组外周血CD3 、CD4 计数及CD4 /CD8 比值在各时点均高于EN组及肠外营养组 ,CD8 变化不大。结论 早期免疫增强型肠内营养在调节SAP大鼠促抗炎平衡及机体免疫功能方面明显优于肠外和传统肠内营养 ,但过早应用可能不利于炎症控制。 相似文献
98.
血管内皮生长因子-C反义寡核苷酸对胰腺癌淋巴管及血管生成的影响 总被引:3,自引:3,他引:0
目的观察血管内皮生长因子(VEGF)-C反义寡核苷酸对胰腺癌裸鼠原位种植瘤模型淋巴管及血管生成的影响。方法建立人胰腺癌细胞株panc-1裸鼠原位种植瘤模型,将动物随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(A组)、错义对照组(B组)和反义VEGF-C干预组(C组),每组10只,寡核苷酸用量为每次10 mg/kg体重,隔日1次,每周3次,共3周。建模4周后,处死动物,留取血清和瘤体标本,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学染色法检测反义VEGF-C干预对VEGF-C分泌水平及种植瘤淋巴管和血管生成的影响。结果A、B和C组血清VEGF-C的蛋白表达水平分别为(237.5±41.5)、(221.5±52.3)、(108.6±14.9)ng/L,C组较A、B组明显为低(P<0.01);3组种植瘤内淋巴管密度分别为13.8±2.1、12.4±1.9和4.2±1.6,C组较A、B组显著减少(P<0.01);3组种植瘤内微血管密度分别为27.5±8.7、25.9±4.2和19.4±5.6,组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论反义寡核苷酸干预可以显著降低胰腺癌裸鼠原位种植瘤模型VEGF-C的表达水平,并对其淋巴管生成具有抑制作用。 相似文献
99.
100.