Experimental Study on the Cryopreservation of LLC-PK1 Epithelial Cells with Hypoxic UW Solution

The effects of oxygen partial pressure on cryopreservation of the cells with organ preservation solution were explored. Hypoxic UW solution was made by purging the UW solution with argon. The pig proximal tubule epithelial cells （LLC-PK1 cells） were cryopreserved in hypoxic UW solution （Ar-UW group） or standard UW solution （UW group） at 4℃ for 48 h. Trypan blue staining and LDH detection were performed to evaluate the injury of the cells. The results showed that the oxygen partial pressure in Ar-UW group was significantly declined from 242±6 mmHg to 83±10 mmHg. After cryopreservation at 4℃ for 48 h, LDH leakage rate and Trypan blue-stained rate in Ar-UW group were （11.3±3.4）% and （10.5±4.7）%, respectively, which were significantly lower than in UW group [（49.5±6.9）% and （47.6±9.3）% respectively, both P〈0.01]. It was concluded that lower oxygen partial pressure of UW solution was more beneficial to the cryopreservation of LLC.     

Preparation and Preservation of Hypoxia UW Solution

In order to explore the method to prepare hypoxia UW solution and the stability and preservation of hypoxia UW solution, UW solution was purged by argon or air for 15 min or 60 at a flow rate of 0.8 or 2 L/min, and the oxygen partial pressure of UW solution was detected. The hypoxia UW solution was exposed to the air or sealed up to preserve by using different methods, and the changes of oxygen partial pressure was tested. The results showed that oxygen partial pressure of 50 mL UW solution, purged by argon for 15 min at a flow rate of 2 L/min, was declined from 242±6 mmHg to 83±10 mmHg. After exposure to the air, oxygen partial pressure of hypoxia UW solution was gradually increased to 160±7 mmHg at 48 h. After sealed up by the centrifuge tube and plastic bad filled with argon, oxygen partial pressure of hypoxia UW solution was stable, about 88±13 mmHg at 72 h. It was concluded that oxygen of UW solution could be purged by argon efficiently. Sealed up by the centrifuge tube and plastic bag filled with argon, oxygen partial pressure of UW solution could be stabilized.     

新生大鼠海马神经干细胞表达趋化因子受体CCR2的体外研究

目的 探讨趋化因子受体CCR2在体外培养神经干细胞的表达.方法 采用无血清方法分离、培养新生大鼠海马神经干细胞,细胞免疫荧光方法检测神经干细胞标志巢蛋白(nestin)表达及干细胞多向分化为神经元及胶质细胞的能力,通过细胞免疫荧光及RT-PCR的方法检测神经干细胞表达趋化因子受体CCR2的情况.结果 体外培养新生大鼠海马神经干细胞呈nestin阳性,可分化为NF200阳性神经元、GFAP阳性星形胶质细胞及CNP阳性少突胶质细胞,CCR2细胞免疫荧光及RT-PCR证实神经干细胞表达趋化因子受体CCR2.结论 新生大鼠海马神经干细胞表达趋化因子受体CCR2,为进一步研究其体内、外迁移提供理论依据.     

对某三级甲等医院经营状况的分析

目的:了解某三级甲等医院5年来的经营状况。方法:通过收集该院5年来的相关数据和全国医疗机构2005年度的数据,采用对比分析法了解该院的经营状况。结果:该院平均年收支结余106.93万元,年均收支结余率为0.53%;年均医疗收支结余为-1496.15万元,年均医疗收支结余率为-13.90%;2005年流动比率为49.15%,速动比率为44.75%,资产负债率为49.92%,固定资产收益率为0.16%,流动资产收益率为0.68%。结论:该院药品收入占医药收入的比例低于国家卫生部部属医院的平均水平,药品差价率5年来逐年降低,业务收入低于业务支出,负债结构有待调整,营利能力有待提高。     

囊性脑膜瘤1例报告

患者，女，32岁，因无明显诱因的反复头痛5月、头晕伴恶心、呕吐，四肢麻木1月，于2006年5月收入本院。     

硫酸钙-羟基磷灰石/胶原蛋白支架的制备及研究

目的研究硫酸钙-羟基磷灰石／胶原蛋白支架的制备，以期此材料能符合人工骨植入修复骨缺损的要求。方法采用共滴定法制备羟基磷灰石／胶原蛋白复合材料，再结合具有良好的生物相容性和生物降解性的硫酸钙制备人工骨支架材料，采用XRD、TEM、SEM和万能力学测试机等对复合材料进行生物力学复合材料特性的研究。结果硫酸钙-羟基磷灰石／胶原蛋白复合材料成分与微结构具有同天然骨类似的某些特征，具有良好的生物相容性和生物降解性，其结晶度、力学强度可达到人体松质骨要求，其结果取决于三种材料的含量比例、温度和pH值等。结论硫酸钙-羟基磷灰石／胶原蛋白复合材料是良好的生物活性材料。     

科室文化建设与实践

随着医疗技术的迅猛发展,专科技能要求飞快上升,人们对健康需求的不断提高及自我保护的法律意识增强以及"举证倒置" 等因素下,神经外科医务人员在为了确保医疗安全的基础上而且还要不断提升专业技能和开展新技术的过程中,无形的增加了工作压力.我科科室领导近几年就如何营造一个轻松的工作环境,提倡人文关怀、加强团队意识等良好的科室文化建设方面做了一些工作,取得了良好的社会效益和经济效益,现将体会总结如下:     

大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞的分离培养与鉴定

目的探讨大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离、培养及鉴定的方法。方法解剖分离E14d大鼠胚胎腹侧中脑组织，经机械吹打制成单细胞悬液，接种于无血清培养基中培养，观察其增殖、分化并进行Nestin免疫细胞化学鉴定和诱导分化后β-Ⅲ-tubulin、GFAP、CNPase免疫细胞化学鉴定。结果原代培养7d后，可形成大量悬浮生长Nestin免疫阳性的神经球，经诱导分化后细胞呈GFAP、CNPase或β-Ⅲ-tubulin免疫阳性。结论建立大鼠胚胎腹侧中脑神经干细胞分离培养与鉴定的方法，为进一步开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。     

3种抗棘球蚴抗体检测试剂盒用于棘球蚴病血清学诊断效果评价

目的　评价我国3种商品化抗棘球蚴抗体检测试剂盒用于棘球蚴病血清学诊断的效能。方法　收集142份细粒棘球蚴病、89份多房棘球蚴病确诊患者及39份健康对照者血清标本,分别采用试剂盒A[酶联免疫吸附试验（ELISA法）]、B（ELISA法）、C（胶体金法）检测,比较细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者血常规和生化指标差异,分析采用试剂盒A和B检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体吸光度值（A值）与血常规及生化指标的相关性,评价3种试剂盒检测棘球蚴病的效果。结果　细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病患者白细胞计数（WBC）、中性粒细胞计数（NEU）、单核细胞计数（MONO）、嗜碱性粒细胞计数（BASO）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、间接胆红素（IBIL）中位数差异无统计学意义（P均 > 0.05）,细粒棘球蚴病患者淋巴细胞计数（LYM）和白蛋白（ALB）中位数显著高于多房棘球蚴病患者（P均< 0.05）,而多房棘球蚴病患者嗜酸性粒细胞计数（EOS）中位数显著高于细粒棘球蚴病患者（P < 0.01）。采用试剂盒A检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体A值与患者WBC（rs = 0.153,P < 0.05）、EOS（rs = 0.174,P < 0.05）呈线性正相关,与TBIL（rs = -0.134,P < 0.05）、IBIL（rs = -0.146,P < 0.05）呈线性负相关。采用试剂盒B检测的棘球蚴病患者血清特异性抗体A值与WBC（rs = 0.257,P < 0.01）、NEU（rs = 0.203,P < 0.01）、MONO（rs = 0.159,P < 0.05）、EOS（rs = 0.330,P < 0.01）、ALT（rs = 0.171,P < 0.01）、AST（rs = 0.160,P < 0.05）呈线性正相关,与ALB呈线性负相关（rs = -0.168,P < 0.05）。试剂盒A、B和C诊断棘球蚴病患者的总符合率分别为86.30%、69.63%和91.48%,敏感度分别为84.42%、64.94%和92.21%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.82、0.62和0.79,Kappa值分别为0.600、0.337和0.750。试剂盒A、B和C诊断细粒棘球蚴病患者的总符合率分别为84.54%、64.64%和71.82%,敏感度分别为80.99%、55.63%和68.31%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.78、0.53和0.56;试剂盒A、B和C诊断多房棘球蚴病患者的总符合率分别为92.19%、85.16%和85.16%,敏感度分别为89.89%、79.78%和84.27%,特异度分别为97.44%、97.44%和87.18%,约登指数分别为0.87、0.77和0.72。试剂盒C在诊断细粒和多房棘球蚴病时存在交叉反应。试剂盒A和B用于诊断棘球蚴病的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve,ROC）曲线下面积分别为0.970和0.948,差异无统计学意义（Z = 1.618,P > 0.05）,试剂盒A和B诊断棘球蚴病结果具有较好一致性（Kappa = 0.585,P < 0.01）。结论　3种抗棘球蚴抗体检测试剂盒对多房棘球蚴病血清学诊断效果均优于细粒棘球蚴病。试剂盒A诊断棘球蚴病具有较高敏感性和特异性,检测性能相对稳定、干扰因素相对较少,适合用于棘球蚴病术前初步诊断和术后患者血清抗体随访监测;试剂盒C诊断棘球蚴病具有较高敏感性和特异性,操作方便、报告率高,适用于棘球蚴病初步筛查。     

早期血液滤过对重症急性胰腺炎家猪TNF-α及IL-1β水平的影响

目的　探讨早期血液滤过对重症急性胰腺炎 (SAP)家猪血浆促炎细胞因子TNF α和IL 1β水平和组织转录水平的影响。方法　采用胰管逆行灌注人工胆汁的方法复制家猪SAP模型 ,按拆信封法分为胰腺炎血滤治疗组 (HF组 )和胰腺炎非血滤治疗组 (NHF组 )。采用ELISA法检测两组动物建模前、后TNF α和IL 1β的血浆水平。用半定量逆转录聚合酶链式反应检测这两种细胞因子在胰、肝、肺组织中的转录水平。结果　建模后 1h、2h及 4h ,NHF组血浆TNF α及IL 1β水平逐渐升高 ,至 6h分别为 ( 1375± 334)pg/ml及 ( 96 5± 2 6 5 )pg/ml,明显高于同期HF组的 ( 6 18± 2 76 )pg/ml及 ( 4 45± 14 1)pg/ml(P<0 .0 1)。建模后 6h ,NHF组胰、肝、肺组织中TNF αmRNA的转录水平分别为 85 .7± 17.4、78.1± 10 .2和 82 .4± 10 .5 ,均高于HF组的 5 7.8± 8.9、4 8.0± 8.1和 4 6 .2± 9.6 ,P<0 .0 1;而IL 1βmRNA的转录水平NHF组为 82 .2± 15 .7、6 0 .0± 10 .6和 5 8.1±9.3,均高于HF组的 5 5 .9± 9.0、4 0 .6± 9.2和35 .7± 9.8,P<0 .0 1。结论　早期血滤能降低SAP家猪血浆TNF α和IL 1β的水平和转录水平