双嘧达莫负荷心肌201Tl SPECT显像诊断冠状动脉微循环障碍的价值

目的 探讨双嘧达莫负荷心肌201Tl SPECT显像在诊断冠状动脉微循环障碍中的价值.方法 选取临床符合心脏X综合征诊断标准的患者共48例,按患者体质量0.56mg/kg予双嘧达莫针剂静脉注射(4min),在心脏负荷达高峰后注入201Tl 111 MBq,10min及240min后分别进行心肌201Tl SPECT显像,原始图像经三维重建后由2位以上有经验的核医学科医师进行分析.对出现“反向再分布”现象的患者采用山莨菪碱(654-2)治疗2周后,再次进行双嘧达莫负荷心肌201TlSPECT显像,同时比较患者治疗前后临床症状和平板运动试验结果.结果 48例患者中有42例延迟(240min)显像时均显示部分心肌节段反向放射性分布稀疏或缺损,即“反向再分布”,检出阳性率为87.50％(42/48).在42例出现“反向再分布”现象的患者中,治疗后临床症状及平板运动试验结果均有改善的36例患者再次进行延迟(240min)显像时原受累的49个节段中有45个节段放射性分布有不同程度改善,检出阳性率达91.84％(45/49).两者有1项未改善或2项均未改善的6例患者延迟(240min)显像时原受累的7个节段放射性分布无改善.结论 双嘧达莫负荷心肌201Tl SPECT显像对诊断以心脏X综合征为代表的冠状动脉微循环障碍疾病有一定的价值.     

KCNQ1和KCNH2基因与先天性长QT综合征的关系

目的　分析离子通道基因KCNQ1和KCNH2与先天性长QT综合征 (long QTsyndrome ,LQTS)的关系 ,以探讨LQTS发生的分子遗传机制。方法　在一个LQTS(JervellLange -Nielsen综合征型 )大家系中 ,采用PCR -直接测序技术 ,对KCNQ1和KCNH2基因的所有外显子和附近的部分内含子进行序列测定。结果　KCNQ1基因存在两种突变 ,其中一个位于外显子区域 ,但为同义突变 ,另外一个位于内含子区域 ;KCNH2基因也存在两种突变 ,均位于内含子区域。这四种单核苷酸有多态性 ,与现有报道不同。结论　在该LQTS家系中 ,KCNQ1和KCNH2基因存在四种突变 ,但均为非致病突变 ,提示KCNQ1和KCNH2基因以外的基因可能才是LQTS致病基因。KCNQ1基因和KCNH2基因存在新的单核苷酸多态性。     

心脏connexin基因变异与房颤的关系

connexin基因编码的缝隙连接通道是相邻细胞间的直接通道,具有亲水性、低选择性和低电阻等特点,允许离子、水分子及相对分子质量小于1kDa的多肽等在细胞间自由流动,是细胞间完成电化学信息     

β1肾上腺素能受体基因389A/G多态性与急性心肌梗死的关系

目的探讨βl肾上腺素能受体基因389A／G多态性与急性心肌梗死（acute myocardial infarcfion，AMI）的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术检测150例急性心肌梗死患者和150例性别和年龄匹配的对照者的基因型，同时采集相关的临床资料，进行病例．对照统计学分析和多因素参与的回归分析。结果AMI组和对照组在基因型和等位基因频率分布上的差异均有统计学意义（P均〈0．01），A等位基因在AMI组明显高于对照组。在多因素参与的回归分析中，389A／G多态性（OR：2．88，95％CI：1．70—4．88，P〈0．01）、吸烟（OR：2．72，95％CI：1．52—4．88，P〈0．01）、高脂血症（OR：2．85，95％CI：1．68—4．86，P〈0．01）、糖尿病（OR：2．38，95％CI：1．27—4．47，P〈0．01）和高血压（OR：2．00，95％CI：1．62—3．45，P〈0．05）均为AMI的独立危险因素。结论β1肾上腺素能受体基因389A／G多态性与AMI明显相关，为AMI的独立危险因素。     

心肌特异性表达人KCNE4转基因小鼠模型的建立

目的本研究旨在建立心肌特异性表达人KCNE4（hKcNE4）基因小鼠模型，为探索hKCNE4基因对特定类型心房颤动的防治作用奠定基础。方法通过RT—PCR克隆hKCNE4基因，使用核酸内切酶和连接酶构建hKCNE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4α—MHC-Clone26，经过酶切鉴定、序列分析证实无误后用BamHI酶切获得转基因表达元件hKCNE4-α—MHC-hGHpA。将hKCNE4-α—MHC-hGHpA显微注入小鼠受精卵雄性原核，并将有活力的受精卵移植到代孕小鼠的输卵管。PCR鉴定出代孕鼠所生小鼠中转基因阳性原代（G0）小鼠，运用RT—PCR-测序技术对阳性G0小鼠与野生型小鼠交配所生的一代（G1）小鼠进行检测以识别出表达转基因的阳性小鼠。结果成功克隆了hKCNE4基因，正确构建了hKCNE4基因心肌特异性表达载体hKCNE4-α—MHC-Clone26。代孕鼠共生产86只仔鼠，9只转基因阳性，2只（分别称其为LineA和LineB）转基因在心脏中高表达。对LineA和LineB的阳性后代进行初步表型分析发现其生长发育良好，繁殖力正常，体表心电图无明显异常。结论成功建立心肌特异性表达hKCNFA转基因小鼠模型，为进一步研究hKCNFA基因对特定类型心房颤动的防治作用提供了一种工具。     

KCNQ1和KCNH2基因与家族性阵发性房室交界折返性心动过速的关系

目的：分析离子通道基因KCNQ1和KCNH2与家族性阵发性房室交界折返性心动过速（FPAVJRT）的关系，以探讨FPAVJRT发生的分子遗传机制。方法:在一个FPAVJRT大家系中，采用PCR直接测序技术，对KCNQ1和KCNH2基因的所有外显子和附近的部分内含子进行序列测定。结果：KCNQ1基因存在5种突变，其中2个位于外显子区域，但均为同义突变，另外3个位于内含子区域；而KCNH2基因存在3种突变，但均位于内含子区域。结论:在该FPAVJRT家系中，KCNQ1和KCNH2基因存在8种突变，但均为非致病突变，提示KCNQ1和KCNH2基因以外的基因可能才是FPAVJRT致病基因。     

SA基因与中国汉族人群高血压病的关系

目的 探讨SA基因座是否与中国汉族人群高血压病连锁,以及SA基因多态性与中国汉族人群高血压病的关系。方法 应用MF－PCR－SSCP技术研究SA基因座微卫星的频率分布特征;以SA基因座微卫星为遗传标记,通过状态一致性受累同胞对连锁分析方法探讨SA基因座是否与高血压病连锁,运用PCR－SSCP－银染技术筛查SA基因变异体,再经测序证实,然后通过关联研究明确这种变异是否与高血压病有关。结果 （1）D16S3046、D16S3136和D16S3068多态信息量（PIC）分别为0．86、0．82和0．80,杂合度（H）分别为0．88,0．71和0．77,表明中国汉族人群SA基因座微卫星的频率分布具有高度多态性;（2）SA基因座与中国汉族人群高血压病无链关系,微卫星D16S3046、D16S3136和D16S3068连锁分析t值分别为0．972、0．622和0．236,P值分别为0．384、0．543和0．871;（3）SA基因座存在C→置换,但各基因型和等位基因的频率分布在有高血压病家族史的高血压病患者和无高血压病家族史的血压正常人之间差异无显著性,前者χ^2=0．296,P＞0．05。结论 SA基因与中国汉族人群高血压病无关,SA基因可能不是中国汉族人群高血压病的易感基因。     

先天性房间隔缺损致病基因KLF13新突变的识别与功能分析

目的：探索房间隔缺损致病基因KLF13新突变。方法：对175例先天性房间隔缺损患儿和217名健康者的KLF13基因进行测序分析以发现新的致病突变。克隆KLF13基因,构建野生型KLF13表达质粒KLF13-pcDNA3.1,通过定位诱变获得突变型KLF13-pcDNA3.1,转染NIH3T3细胞,通过报告基因分析研究突变体的功能特性。结果：在1例散发性先天性房间隔缺损患儿发现KLF13基因新突变,即NM＿015995.4:c.85G>T; p.(Glu29*)突变。该突变不存在于217名健康者。生化分析表明突变型KLF13对靶基因ACTC1的转录激活功能丧失。结论：发现KLF13基因功能丧失性新突变可导致先天性房间隔缺损,这对先天性房间隔缺损的个体化医学防治有潜在的临床意义。     

二叶式主动脉瓣合并升主动脉扩张的生物信息学分析

目的 通过生物信息学方法探究二叶式主动脉瓣（bicuspid aortic valve,BAV）合并升主动脉扩张的关键基因及相关富集通路,寻找扩张升主动脉组织中浸润的关键免疫细胞。方法 从基因表达综合数据库下载表达谱数据GSE83675（截至2022年5月12日）,使用R语言筛选差异表达基因、进行基因集富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）,应用STRING数据库及Cytoscape软件构建蛋白互作网络并筛选Hub基因,通过CIBERSORT反卷积算法计算主动脉组织中免疫细胞浸润比例。结果 筛选获得19个上调基因和180个下调基因,GSEA表明主要的富集通路有细胞因子-细胞因子受体相互作用、癌症相关通路、肌动蛋白细胞骨架调节、趋化因子信号通路、丝裂原活化蛋白激酶信号通路等。基于蛋白互作网络筛选出EGFR、RIMS3、DLGAP2、RAPH1、CCNB3、CD3E、PIK3R5、TP73、PAK3、AGAP2这10个Hub基因。CIBERSORT分析表明活化自然杀伤细胞在BAV合并升主动脉扩张患者的主动脉组织中浸润较多。结论 筛选出的关键基因及信号...     

心房颤动导管消融术后早期复发的标志物

目的:探讨心房颤动(房颤)导管消融术后早期复发与炎症反应和细胞外基质生物标志物的关系. 方法:选择经导管消融治疗的房颤患者43例,测定术前血清白细胞介素6(IL-6)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2).比较房颤导管消融术后早期复发与未复发患者间的血清标志物水平. 结果:与未复发组相比,复发组术前血清IL-6水平显著升高,为(7.8±1.4) ng/L对(4.5±0.9) ng/L; hs-CRP水平显著升高,为(18.9±3.2)μg/L对(14.9±4.1)μg/L;MMP-2水平显著升高,为(935.9±92.3) μg/L对(766.2±169.2)μg/L;两组TIMP-2的差异无统计学意义,为(5354.2±1164.8) pg/L对(4966.9±979.1)pg/L,P＞0.05. 结论:房颤患者导管消融术前血清IL-6、hs-CRP及MMP-2水平与消融术后早期复发可能有关.