浅论中西结合发展进程之不足及对策

本文总结了中西医结合研究及临床应用的现状，对当前中西医结合理论与实践中存在的问题进行剖析，提出了应把中医研究科学化、国际化和现代化并与西医从理论到临床找到真正的结合点为方向，使二者理论精髓真正融合，结构和功能有机地结合在一起，形成一门具有无限生命力的新兴医学体系。     

量子点标记神经生长因子纳米化颗粒修饰羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠实验性脑损伤

目的:量子点是由Ⅱ-Ⅵ族元素或Ⅲ-Ⅴ族元素组成的纳米颗粒,因三维上受到量子限制而表现出独特的光学特征,其标记的神经生长因子纳米化颗粒由于是纳米级,易通过细胞生物膜.实验观察负载此纳米颗粒的羊膜间充质干细胞移植治疗大鼠脑损伤的效果.方法:实验于2007-01/10在郑州大学完成.①材料:SPF级健康成年Wistar大鼠40只,按体质量编号分为4组:神经生长因子细胞组、常规细胞组、损伤模型组、培养基对照组,10只/组,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.羊膜间充质干细胞来自健康产妇胎盘羊膜,产妇对实验知情同意,实验经医院医学伦理委员会批准.量子点神经生长因子纳米粒由兰州大学功能有机分子化学国家重点实验室协助构建.②实验方法;向羊膜间充质干细胞中加入含10%胎牛血清、20 μg/L碱性成纤维生长因子的DMEM/F12培养基,置于37 ℃、体积分数为0.05的CO2饱和湿度培养箱中培养,待细胞达80%～90%融合时胰酶消化传代.取传至第3代细胞,分别加入终浓度为20,40,60 μg/L的量子点标记神经生长因子纳米粒进行修饰处理72 h,并设立空白对照和空载量子点对照.4组大鼠均采用Feeney自由落体法建立脑损伤模型,神经生长因子细胞组于大鼠损伤部位注入经40 mg/L量子点标记神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞悬液10 μL(约4.0×108 个细胞),常规细胞组注入等量单纯量子点标记的羊膜间充质干细胞悬液,培养基对照组注入等量DMEM/F12细胞培养基,损伤模型组不给予移植操作.③实验评估:经量子点标记的神经生长因子纳米粒修饰后,MTT法检测细胞活性,荧光显微镜观察量子点在细胞内的分布,免疫细胞化学鉴定细胞分化.细胞移植后对各组大鼠运动及感觉功能进行评分,免疫组织化学染色及荧光显微镜观察量子点荧光化羊膜间充质干细胞在脑内存活分化和迁移情况.结果:①细胞生长率:培养72 h后与空白对照和空载量子点对照细胞比较,20,40,60 μg/L量子点标记的神经生长因子纳米粒组细胞生长率均呈增长趋势,40 μg/L时细胞无明显生长抑制,达60 μg/L时增长有所减慢.②体外量子点分布:荧光显微镜连续观察羊膜间充质干细胞.约6 h后开始摄入量子点标记的神经生长因子纳米粒,随着时间延长摄入量逐渐增加,于32 h荧光强度达高峰.③体外免疫细胞化学鉴定:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞表达神经元烯醇化酶和神经丝蛋白,向神经元方向分化,但不表达胶质纤维酸性蛋白.④神经行为学检测结果:细胞移植后24h,各组神经行为学各项指标评分均基本相似(P＞0.05);移植后10,20 d,损伤模型组与培养基对照组无明显变化,神经生长因子细胞组、常规细胞组运动及感觉功能各项评分均显著降低(P＜0.05),且神经生长因子细胞组下降幅度明显强于常规细胞组(P＜0.05).⑤免疫组织化学和荧光检测结果:经量子点神经生长因子纳米粒修饰的羊膜间充质干细胞在脑组织损伤区存活,并向周围迁移.结论:量子点是一种较好的细胞示踪剂,负载其标记的神经生长因子纳米化颗粒的羊膜间充质干细胞移植能够改善脑损伤大鼠神经功能.     

新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响

本研究探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病HL-60细胞的增殖和表皮生长因子受体（EGFR）表达的影响,应用RT-PCR方法检测CKLFSF8基因在HL-60细胞中的表达;利用脂质体将CKLFSF8基因转染到HL-60细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长;MTT法检测细胞的增殖程度;免疫细胞化学法检测CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞EGFR的表达。结果表明：在细胞生长过程中可检测到CKLFSF8表达;CKLFSF8基因转染前后HL-60细胞的增殖受到了明显的抑制,与空白对照组和空质粒组相比有显著性差异（P（0.05）;对比转染前后细胞EGFR表达的阳性率具有显著性差异（P（0.01）。结论：CKLFSF8基因转染对白血病细胞HL-60的增殖和EGFR的表达有明显抑制作用。     

脑卒中患者鞘内神经干细胞注射半年后功能状态评估

背景：近年研究证实中枢神经组织有再生能力，但损伤后修复功能较差，很多实验结果不能令人满意。既往的脑移植或脑组织移植最大的生物学障碍是移植物难以在宿主体内生存或发育，移植效果的稳定性及其功能的恢复不肯定。目的：探讨鞘内神经干细胞注射治疗脑卒中的方法，观察其疗效奴副作用，以评价其安全性及可行性。设计：以患者为研究对象，前后对照的验证性研究。单位：一所市级医院神经内科和一所大学医院微生物与免疫学教研室。对象：2002-11／2003-09安阳市人民医院神经内科住院脑卒中患者26例。其中3例为急性脑出血，其余23例病程3个月～30年，平均(4．2&;#177;6．6)年；男20例，女6例；年龄36～72岁，平均(56．3&;#177;12.7)岁；脑梗死15例，脑出血11例；合并高血压19例，冠心病2例，糖尿病4例，高脂血症4例。干预：3例急性脑出血(出血量35～40mL)患者行微创血肿穿刺术，通过引流管将细胞悬液注射到脑损伤处；其余病例均采用鞘内注射的方法将细胞悬液注入蛛网膜下腔，通过脑脊液循环至大脑表面。术后采用物理治疗、作业治疗及语言治疗进行康复。采用欧洲卒中量表评分标准(European stroke scale，ESS)、生活功能评分标准(barthel index，BI)评价其疗效。ESS提高1分以上为有效，无提高或下降为无效。检查患者头颅CT，MRI，心电图、胸部X射线片及血液生化学指标。主要观察指标：疗效及副反应。结果：23例行鞘内注射患者中，19例有效，4例无效；移植后ESS评分54．1&;#177;21．2，较移植前51．4&;#177;21．1提高，差异有显著性意义(t=5．8，P=0．0000076)；移植后BI 41．1&;#177;31．3，较移植前36．1&;#177;32．1提高，差异有显著性意义(t=7．11，P=0．00000039)。3例行微创血肿穿刺术急性脑出血患者均恢复良好，生活可基本自理。4例患者术后24h内出现一过性发热，2例患者术后感轻微头痛。结论：研究表明神经干细胞移植后患者症状得到不同程度的缓解，且无明显毒副作用。证实神经干细胞移植用于改善脑卒中患者功能状态有效可行。     

人羊膜间充质干细胞移植对荷瘤鼠C6胶质瘤生长的抑制

背景:实验室前期课题成果显示,脐血或羊膜间充质干细胞具有亲肿瘤及抑瘤特性。目的:探讨人羊膜间充质干细胞对C6胶质瘤细胞生长的抑制作用。设计、时间及地点:细胞学体内对照观察,于2008-06/09在郑州大学微生物与免疫教研室完成。材料:胎盘来源于郑州大学一附院妇产科健康剖宫产产妇,C6胶质瘤细胞株由北京神经外科研究所惠赠,10只BALR/c裸鼠由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。方法:无菌条件下取胎盘,分离部分羊膜,体外分离培养人羊膜间充质干细胞,传至第3代用于实验。10只裸鼠背部双侧皮下注射含3×106个C6胶质瘤细胞的DMEM/F12培养基,建立双侧荷瘤鼠模型。成功造模后,模型对照组于裸鼠左侧皮下注射DMEM/F12培养基50μL,细胞移植组于同一裸鼠右侧皮下注射含2×106个羊膜间充质干细胞的等量DMEM/F12培养基。主要观察指标:肿瘤生长情况,周围组织浸润及新生血管形成等病理学观察,免疫组化法检测肿瘤中细胞周期素D1的表达。结果:细胞移植后14,21d,细胞移植组肿块体积明显小于模型对照组(F=54.127,P<0.05)。模型对照组瘤体呈结节状,部分肿瘤组织中心有坏死现象,内部有新生血管形成,肌层及皮肤浸润较明显,已达腹膜;细胞移植组瘤体分叶较少,无新生血管形成,仅有局部的皮肤浸润,未见肌层浸润。模型对照组细胞周期素D1蛋白呈阳性表达,而细胞移植组表达阳性率较低。结论:人羊膜间充质干细胞可明显抑制荷瘤鼠C6胶质瘤细胞的生长,同时可抑制细胞周期素D1蛋白的异常表达。     

抗中性粒细胞胞浆抗体在溃疡性结肠炎的检测意义

目的:为探讨抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)对溃疡性结肠炎(UC)的诊断意义.方法:采用间接免疫荧光法(IIF)检测53例UC、60例对照组(其中20例肠结核、40例健康体检者)血清中ANCA阳性率.结果 :53例UC患者中,ANCA阳性39例,敏感性73.6% ,特异性98.3% .对照组中20例肠结核患者血清中ANCA均阴性,40例健康体检者有1例ANCA阳性.结论:ANCA对UC的诊断特异性强,检查方便、无痛苦.可作为UC诊断的一项血清学指标,同时具有重要的鉴别诊断价值.     

早期护理干预对早产儿生长发育的影响

目的:探讨早期护理干预对早产儿生长发育的影响。方法:将70例早产儿随机分成2组,A组为对照组给予常规暖箱护理,B组在常规护理的同时给予抚触护理。结果:出院时B组婴儿奶量摄入、体重显著高于A组(P<0.05),睡眠时间增加,睡眠质量提高(P<0.05)。结论:抚触护理有利于早产儿的生长发育,使早产儿生长激素的分泌达到最佳水平,生理性体重下降减少,缩短了其体重恢复时间,提高了睡眠时间和质量,使其安全感增加,从而有助于增加早产儿的体重,提高抗病能力,促进身心健康,缩短平均住院天数。     

微小RNA-200b的异常表达与子宫内膜癌的关系

目的研究微小RNA-200b（microRNA-200b）在子宫内膜癌及子宫正常内膜组织中的表达量,分析microRNA-200b表达量和子宫内膜癌临床病理特征的关系及其子宫内膜癌发生、发展中的意义。方法采用荧光实时定量PCR方法检测47例子宫内膜癌和11例正常子宫内膜组织的microRNA-200b表达量。结果子宫内膜癌组织中microRNA-200b的表达较正常内膜组织明显升高,差异有统计学意义（P〈0．01）;各年龄组织分型、临床分期的子宫内膜癌microRNA-200b表达量的差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论微小RNA-200b可能参与了子宫内膜癌的发生、发展过程,起到癌基因的作用,其高表达可以作为一个早期筛查的分子标记物。     

从脑细胞悬液到干细胞研究的20年历程(上)

从脑细胞悬液到干细胞研究,至少历经20余年。按照时间顺序,回顾了从上世纪80年代到现在的干细胞研究历程。初期,应用脑细胞悬液或脑组织块直接脑内移植治疗几种难治性疾病。上世纪末,神经组织干细胞研究启动并逐渐深入和广泛。本世纪初至今,相继开展了自体骨髓间质干细胞、外周血干细胞、脐血间质干细胞、羊膜间质干细胞、肿瘤干细胞等体内和体外研究。近几年,在大量的基础与动物实验基础上,逐渐开展了上述几种干细胞的临床应用初步研究,以及脑胶质瘤干细胞个体化特异性的放疗和化疗,对若干神经系统难治性疾病的治疗取得了一些独特的效果,提高了患者的生活质量。     

对比子宫内膜癌的临床分期与手术病理分期(附109例分析)

过去,对于子宫由膜癌采用1971年国际好产科联盟(FIGO)临床分期标准,指导手术及术后辅助治疗的选择;由于子宫内膜癌预后与肿瘤类型、组织分组、播散范围等因素有关,根据临床分期难以对这些因素作出准确判断。故1988年FIGO对子宫内膜癌的分期进行了新的修订．即手术病理分期标准。因此．本回顾分析了1989～1998年间我院手术治疗的子宫内膜瘟病例的临床病理资料．就其临床分期和手术病理分期进行比较．以明确两间的差异。