北京地区不同人群TT病毒感染研究

自１９７７年ＮｉｓｈｉｚａｗａＴ及１９９８年ｏｋａｍｏｔｏ报道从１例输血后的非甲－戊肝炎病毒人血清中分离出一种新的病毒基因,被命名为ＴＴ病毒（ＴＴＶ）以来,人们认为ＴＴＶ与输血有关,但是１９９８年国内的一些研究资料证实,与输血无关的人群中ＴＴＶ感染很高。为了解北京地区不同人群中ＴＴＶ的感染情况,探讨ＴＴＶ的传播途径,对非输血相关的人群进行ＴＴＶＤＮＡ感染研究,我们对１２５例肾透析患者,１２０例丙型肝炎患者,１００例正常献血员标本进行ＴＴＶＤＮＡ检测研究,结果如下。一、材料与方法：１．研究对象：①…     

BamHI酶切位点变异区域性分布在HCV1b型5''''非编码区的研究

目的研究丙型肝炎病毒(HCV)1b型5'非编码区BamHⅠ酶切位点变异的区域性分布。方法对来自中国4个不同地区的64例HCV1b基因型血清样品进行5'-NCR扩增后,分别用MboⅠ、BamHⅠ限制性内切酶酶切分析,比较不同地区变异株分布的差异。结果测序证实中国HCV1b基因型在117位有BamHⅠ酶切位点。64例血清样品中,BamHⅠ单切点变异株,华南7例(28%),东北1例(10%),华北1例(11.1%),西南0例;MboⅠ及BamHⅠ切点均无的变异株,西南8例(40%),华南2例(4%),东北1例(10%),华北0例。结论证实HCV1b型BamHⅠ变异具有区域性分布特点,华南地区和西南地区变异较多,华北和东北变异较少。而这一变异是否与干扰素治疗耐药有关,尚有待于进一步研究。     

HCV基因5′-末端非编码区酶切分型与核心区基因分型初步比较

取HCVⅡ型感染血清和Ⅲ型感染血清按不同比例混合,进行HCV RNA检测,酶切分型结果如下: 29例丙型肝炎患者两种分型方法基因型检测结果: (1)5′-NCR分型:①24/29例无HaeⅢ切点,在145bp处有cDNA带,判断为Ⅰ、Ⅱ型。②3/29例有HaeⅢ切点,酶切后产生56bp、89bp2个片段,145bp处无cDNA带,判断为Ⅲ、Ⅳ型。③2/29有HaeⅢ切点,酶切后,产生56bp、89bp、145bp3个cDNA片段,判断为     

HCV5＇-NCR基因变异与干扰素免疫应答关系的探讨

目的了解HCV 1b基因型5’-NCR基因变异株的感染状态。方法应用限制性内切酶酶切分析检测119例1b型中5＇-NCR基因变异。结果在119例HCV 1b型中存在5种感染状态：①有Mbo I切点变异株占58．0％（69／119）;②无Mbo I切点变异株占16．0％（19／119）;③有Mbo I切点和无Mbo I切点混合感染株占10．9%（13／119）;④有BamH I切点变异株占10．1％（12／119）;⑤有Mbo I双切点变异株占5．0％（6／119）。1例干扰素治疗有效的丙型肝炎患者,HCV RNA持续阴性,未检测出5’-NCR变异（有Mbo I单一切点）,而2例干扰素治疗12个月和26个月的丙型肝炎患者血清ALT反复升高,HCV RNA持续阳性样品中,1例检出5’-NCR Mbo I酶切位点变异。结论研究结果提示,在丙型肝炎患者血清中存在HCV 1b型中5’-NCR基因单一的Mbo I切点的样品,58．0％可能是HCV野生株感染的状态。     

聚合酶链反应中污染环节的分析

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,简称PCR)是一种体外模拟自然DNA复制过程的核酸扩增技术,该技术通过重复94℃～95℃变性、37℃～55℃复性、72℃延伸等简单的3个温度,能将靶DNA扩增数百万倍,获得极高的检测敏感性,操作者稍不注意就会造成污染,极微量的污染便可导致假阳性结果,现分别对污染和如何判断污染及污染源的追踪等3个部分进行阐述。1污染为了使读者重视操作堆积化及其重要性,我们将PCR整体绘制成PCR污染示意图,并分别叙述各区的相互关系,图中分为4个区,即污染1区、清洁区、污染2区、交叉污染区等。见图1。     

慢性乙肝患者血清及外周血单个核细胞中HBV DNA的研究

利用国产生物素交联光敏补骨酯素(Biotin—Psoralen)标记核酸探针,建立了外周血单个核细胞(PBMC)的原位杂交方法,同时应用聚合酶链反应技术(PCR)检测了血清中的HBV DNA,结合PBMC的原位杂交结果,对HBV DNA在PBMC中存在的状况和意义进行了初步探讨。     

HBV P区聚合酶基因变异研究

目的 建立快速特异的HBV基因变异检测技术及变异株的酶切位点分析。方法 对酪氨酸、缬氨酸、天冬氨酸、天冬氨酸(YVDD)及酪氨酸、异亮氨酸、天冬氨酸、天冬氨酸(YIDD)变异病人进行测序分析。结果 在HBV感染的病例中，不仅检出酪氨酸、蛋氨酸、天冬氨酸、天冬氨酸(YMDD)到YIDD/YVDD变异，还存在亮氨酸、亮氨酸、亮氨酸、亮氨酸(LLLL)到亮氨酸、蛋氨酸、亮氨、亮氨酸(LMLL)变异，天冬氨酸、亮氨酸、组氨酸、天冬氨酸(DLHD)到天冬氨酸、蛋氨酸、组氨酸、天冬氨酸(DMHD)变异及亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸、谷氨酸(LLAQ)到亮氨酸、蛋氨酸、丙氨酸、谷氨酸(LMAQ)变异。酶切位点分析结果表明不同的变异株存在不同的限制性酶切位点。结论 提示这些变异位点均在“ATG”(M)蛋氨酸密码子尚需进一步探讨研究。YVDD、YIDD、LMAQ变异与拉米夫定治疗有关。     

HCV NS5b1b与1b混合感染指标在干扰素治疗中的应用

目的 :探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染的基因型及其与干扰素应答效果的关系。方法 :应用逆转录—聚合酶链反应 (RT PGR)技术对 2 69例肝炎病人血清进行HCVNS5b区基因片段扩增 ,并对 5 6例阳性PCR产物进行酶切分型 ,同时观察干扰素α 2b对其中 48例慢性丙型肝炎的疗效。结果 :HCV单纯 1b型感染、1b与 1b混合感染及 2a型感染对干扰素的应答率分别为 70 % (14 /2 0 )、9 5 % (2 /2 1)、71 4% (5 /7) ;其中完全应答分别为 45 % (9/2 0 )、4 8% (1/2 1)、5 7 1% (4 /7) ;部分应答分别为 2 5 % (5 /2 0 )、4 8% (1/2 1)、14 3 % (1/7)。 1b与 1b混合感染组同单纯 1b型及 2a型感染组比较有显著性差异 (P <0 0 1) ,而单纯 1b型感染组与 2a型感染组比较无明显差异 (P >0 0 5 )。结论 :HCV单纯 1b型感染或 2a型感染者对干扰素敏感 ,而 1b与 1b混合感染者干扰素治疗效果极差 ,可作为预测干扰素疗效的一项新的重要指标     

输血后丙型肝炎患者血清中HCV RNA含量的动态观察

<正> 近年来,国内外已有报道应用α-干扰素治疗丙型肝炎取得了较好的效果,病情好转,血清ALT下降,但不能指示血清中HCV RNA含量逐渐下降或消失的情况。本文应用定量PCR方法检测了2例未经干扰素治疗的8份系列血清和3例经干扰素治疗的16份系列血清,进行HCV RNA动态观察,现将结果报道如下     

腹水中乙型肝炎病毒感染的研究

乙型肝炎（乙肝）病毒（ＨＢＶ）在肾脏等肝外组织中都有存在和表达。本研究探讨腹水中ＨＢＶ及其抗原、抗体的存在和表达。一、材料与方法１病例选择：２０例中１７例为乙肝后肝硬化，３例为其他原因合并腹水。１５例有反复输血史。２材料及方法：（１）同时取患者血...