家族性高胆固醇血症合并早发冠心病患者低密度脂蛋白受体基因突变研究

目的 对家族性高胆固醇血症(FH)合并早发冠心病患者进行低密度脂蛋白受体(LDL-R)基因突变研究.方法 对1例FH合并早发冠心病患者进行详细家系调查和临床体检并按照国内FH诊断标准明确临床诊断;酚氯仿法提取患者基因组DNA;应用聚合酶链反应结合核苷酸测序方法,检测LDL-R的全部18个外显子和启动子及载脂蛋白(apo)B100R3500Q位点;核苷酸序列分析结果 与GenBank比对寻找突变.结果 本例患者和其子TC分别为12.1、16.0 mmol/L,本例患者可诊断为"FH杂合子",其子因存在肌腱黄瘤可诊断为"FH".患者 apoB100基因3500片段经核苷酸序列分析未发现突变,可排除由于患apoB100缺陷症导致高胆固醇血症的可能性.该患者LDL-R第13外显子D601Y杂合突变.结论 对于高胆固醇血症合并早发冠心病患者应尽量明确诊断并给予治疗,控制病情进展.     

余甘子减少高脂血症对兔动脉壁损伤作用的实验研究

目的探讨余甘子能否减少高脂血症对兔动脉壁的损伤及机制。方法将24只新西兰雄性白兔随机分为对照组、余甘子组(4g·kg~(-1)·d~(-1))和高胆固醇血症模型组,每组8只。酶法检测3组血脂含量,8周后处死,组织匀浆测定主动脉和肝脏脂质含量,图像分析法测定主动脉内膜粥样硬化斑块面积和内膜面积与中膜面积,光镜观察动脉内膜病变。结果实验8周后余甘子组与高脂组相比,(1)能显著抑制血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平的上升,增加血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C);(2)降低主动脉和肝脏脂质含量;(3)主动脉斑块面积、内膜厚度与中膜厚度比值明显降低。结论余甘子可能通过调整家兔脂质代谢,防止兔实验性粥样斑块的形成。     

三个家族性高胆固醇血症样表型纯合子家系遗传异质性及其系谱分析

目的对3个纯合子型家族性高胆固醇血症（FH）样表型家系进行基因检测及系谱分析，初步探讨FH异质性的分子基础。方法对3个先证者及家系成员进行血脂测定、心电图、心脏及大血管彩色多普勒超声检查，采用聚合酶链反应（PCR）-变性高效液相色谱（DHPLC）法结合扩增产物直接序列分析检测低密度脂蛋白受体（LDL-R）、载脂蛋白（apoB）、枯草溶菌素9（PCSK9）基因，结果与GenBank比对，并进行家系分析。结果先证者3例初诊时年龄均〈16岁，血浆胆固醇水平〉258mg／dL，出生时即有黄色瘤，之后多处出现黄色瘤并有角膜环，可确诊为纯合子型FH。1例出现早发冠心病，多次发生心绞痛。LDL-R基因发现313＋1G→A纯合突变。检查3家系3代共86例，根据血脂和临床表现确诊17例杂合子FH患者，系谱分析家系1、2遗传方式符合常染色体显性遗传规律，家系3符合常染色体隐性遗传规律。结论证实3个家族性高胆固醇血症样表型系谱，系谱分析可初步明确FH遗传方式，结合基因检测可对FH异质性的诊断和治疗提供依据。     

低密度脂蛋白不同亚组分对血管内皮细胞粘附分子表达的不同影响

通过观察低密度脂蛋白不同亚组分对细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1表达的影响 ,来探讨低密度脂蛋白致动脉粥样硬化的分子机制。采用两次超速离心法分离制备大颗粒疏松低密度脂蛋白和小颗粒致密低密度脂蛋白 ,在内皮细胞培养基中分别加入不同剂量的天然或氧化型小颗粒致密或大颗粒疏松这 4种脂蛋白 ,37℃温育 12h ,用细胞酶联免疫吸附法检测细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1蛋白的表达。结果发现 ,不同剂量的 4种脂蛋白均可使细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1蛋白表达增高 ,天然或氧化型小颗粒致密低密度脂蛋白增加内皮细胞表面细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1蛋白表达呈剂量依赖性。比较相同浓度的 4种脂蛋白的作用时发现 ,2 5mg和 5 0mg小颗粒致密低密度脂蛋白增加细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1表达的作用强于大颗粒疏松低密度脂蛋白 ,但差异无统计学意义 ;10 0mg天然小颗粒致密低密度脂蛋白增加细胞间粘附分子 1和血管细胞粘附分子 1表达的作用强于其它三种脂蛋白 (细胞间粘附分子 1的表达分别为 0 .83± 0 .0 9、0 .6 6± 0 .15、0 .80± 0 .0 7和 0 .76± 0 .0 8;血管细胞粘附分子 1的表达分别为 0 .37± 0 .0 4、0 .2 8± 0 .0 4、0 .2 9± 0 .0 2和0 .2 7± 0 .0     

葛根素能诱导血管平滑肌细胞凋亡部分相关基因差异表达

为观察葛根素诱导兔血管平滑肌细胞凋亡过程中相关基因mRNA的差异表达，探讨葛根素促进血管平滑肌细胞凋亡的分子机制。应用葛根素体外诱导兔血管平滑肌细胞凋亡模型和mRNA差异显示技术观察葛根素诱导与正常细胞间基因差异表达，将葛根素作用后高表达的cDNA片段克隆、测序，与GeneBank进行同源性分析，并用^32P标记探针，再与不同浓度葛根素作用的血管平滑肌细胞总RNA进行Northern印迹分析。结果发现，1、差异显示图谱出现一些仅在葛根素组高表达而在对照组无表达的cDNA片断。2、将其序列与GeneBank进行同源性比较，证实其中3个序列均与兔葡萄糖调节蛋白94基因高度同源。2、Northern杂交证实兔葡萄糖调节蛋白94基因在葛根素作用的血管平滑肌细胞中高表达，与差异显示图谱一致。4、灰度扫描分析，兔葡萄糖调节蛋白94基因在血管平滑肌细胞中表达量与葛根素浓度成正比。上述结果提示，葛根素诱导血管平滑肌细胞凋亡过程中上调了兔葡萄糖调节蛋白94基因表达，该基因在此过程中可能起到一定作用。     

余甘子抗脂质过氧化和保护血管内皮的实验研究

大戟科植物余甘子又称油柑 ,作为鲜果食用或药用 ,有清热、解毒、保健强身等功效 ,早为中医文献收载 ,亦为藏族习用药材。笔者通过观察分析余甘子果汁粉对实验性高胆固醇血症家兔血脂、丙二醛水平、动脉粥样斑块形成及内皮素 1表达的影响 ,探讨余甘子抗动脉粥样硬化的作用及其机制 ,旨在为余甘子药物开发提供实验研究资料。1　材料与仪器A - 6Ⅱ型半自动生化分析仪 (北京松上技术有限公司 ) ,SH - 80 1γ放免计数仪 (北京二六二厂 ) ,CIMAS多功能真彩色病理图像分析系统 (北京航空航天大学图像中心 )。余甘子果汁粉 (中国林业科学院昆明…     

Notch对心力衰竭小鼠心肌重构和心脏功能的调控作用

目的：查探讨Notch信号对心力衰竭小鼠心肌重构和心脏功能的调控作用。方法：采用横向主动脉缩窄术(TAC),构建小鼠慢性心力衰竭模型,同时利用Notch信号抑制剂DBZ。40只,8周龄,雄性,C57BL/6J小鼠,随机分为四组(每组10只)：假手术对照组(行假手术),假手术DBZ组(行假手术并给予DBZ),心力衰竭对照组(行TAC手术),心力衰竭DBZ组(行TAC手术并给予DBZ)。TAC术后4周观察小鼠心脏大小;检测小鼠心脏质量与胫骨长度及心脏质量与胫骨长度比值;用小动物超声影像系统检测小鼠心功能;用WGA染色检测心肌细胞横截面积。结果：TAC术后4周,DBZ明显抑制了TAC引起的心脏增大;DBZ明显降低心脏质量[(0.11±0.004)vs.(0.12±0.01)g]和心脏质量/胫骨长度比[(5.49±0.19)vs.(6.06±0.34)mg/mm];DBZ可以抑制TAC诱导的LVIDs值上升[(2.45±0.48)vs.(3.05±0.48)mm]以及EF[(59.94±10.75)%vs.(46.46±10.44)%]和FS值[(31.61±7.67)%vs.(23.11±6...