小鼠角质细胞生长因子重组腺病毒载体的构建

目的 探讨构建表达小鼠角质细胞生长因子(KGF)基因重组腺病毒载体的方法.方法 提取小鼠肺组织RNA,经逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)获得cDNA后,PCR扩增目的基因片段.将获得的KGF基因插入载体质粒pShuttle-CMV,构建穿梭质粒pShuttle-CMV-KGF(pKGF).线性化pKGF后,转化入含AdEasy-1病毒骨架的BJ5183细菌中.筛选正确的同源重组质粒pAdEasy-1-pShuttle-CMV-KGF(pAd-KGF),转染HEK293细胞,产生病毒颗粒AdEasy-1-pShuttle-CMV-KGF(Ad-KGF).进一步大量扩增病毒,氯化铯梯度离心纯化,测定病毒滴度.制备病毒Ad-GFP为对照,显微镜下观察转染率.结果 ①经限制性内切酶酶切和基因测序鉴定,证实pKGF构建成功;②限制性内切酶酶切确定穿梭质粒重组于病毒骨架;显微镜下观察HEK293细胞形态,证实病毒包装复制成功;③病毒滴度3.0×1010 pfu/ml,达到进一步体内、外实验要求.结论 成功构建了重组腺病毒Ad-KGF,为了解KGF在肺部疾病中的作用以及进一步的基因治疗肺纤维化方法奠定了基础.     

血必净注射液防治家兔应激性脏器损伤的研究

目的探讨血必净注射液对家兔应激性脏器损伤的保护作用及其机制。方法40只大耳白兔随机分为正常对照组、实验对照组、西药治疗组和血必净组。以浸水方法制成应激模型，制模后西药治疗组和血必净组分别注射冬眠合剂和血必净注射液，观察各组家兔给药后不同时间血清皮质醇（Cor）、血栓素A2（TXA2）、内皮素（ET）以及一氧化氮合酶（NOS）含量变化；并观察胃黏膜、肾上腺以及心肌细胞的病理变化。结果制模后家兔Cor含量显著升高（P〈0．01）；西药治疗组和血必净组含量均有所降低，两组间比较差异无显著性（P〉0．05）；西药治疗组和血必净组ET和TXA2含量均明显降低，NOS含量均明显升高，两组间比较差异具有显著性（P均〈0．05）。血必净组胃黏膜、肾上腺以及心肌的病理学变化改善明显优于西药治疗组。结论血必净注射液对于应激性脏器损伤具有良好的保护作用。     

做认真事服务才能进步当有心人积累始可创新--记全国著名骨科专家、中国工程院院士卢世壁教授

卢世壁教授是我国骨科学界著名专家,中国工程院院士。现任国际外科学会会员,中华骨科学会人工关节学组组长,《中华骨科杂志》常务编委,中国肢体伤残协会副理事,解放军医学科学技术委员会委员,中国人民解放军骨科研究所所长、博士生导师。历任中国人民解放军总医院骨...     

微粒与脓毒症凝血功能紊乱

脓毒症(sepsis)是感染因素所致的全身炎症反应综合征(SIRS), 进一步发展可导致脓毒性休克、多器官功能障碍综合征(MODS) [1].业已证明,脓毒症主要是由炎症反应、凝血活化及纤溶抑制相互作用形成的级联反应过程,其中凝血活化是脓毒症发病的重要环节 [2].     

头颈部非鳞癌组织端粒酶活性的定量检测

研究表明 ,端粒酶在人类恶性肿瘤组织中呈高度表达 ,而在正常细胞呈低表达或无表达 ,提示端粒酶表达在恶性肿瘤的发生过程中起着重要的作用。已有报道显示 ,头颈部鳞癌中端粒酶呈普遍表达〔1～ 3〕。然而 ,除少数有关端粒酶在甲状腺腺癌中表达的报道外〔4～6〕,罕见其在头颈部非鳞癌恶性肿瘤组织中表达的报道。本研究用液体闪烁计数法〔3〕,旨在了解端粒酶在头颈部非鳞癌恶性肿瘤组织中的活性 ,探讨端粒酶活性定量检测的临床价值。1　材料与方法　　共检测 1 4例头颈部非鳞癌恶性肿瘤患者的组织样本 2 5份 (其中 1 1份取自恶性肿瘤患者的相…     

牙冠劈裂治疗与修复的临床观察

牙冠劈裂是临床上比较常见的问题,随着人们生活水平的提高和治疗技术的发展,劈裂冠的保留问题日益受到人们的重视.本文对180例不同类型的劈裂冠进行了修复治疗,疗效满意.     

中西合璧蠲短举长--浅析中西医结合治疗慢性肾衰竭的优势与误区

慢性肾功能不全(CRF)是所有原发性或继发性慢性肾脏疾病所致的进行性肾功能损害而出现的一系列症状或代谢紊乱组成的临床综合征，缓慢地出现肾功能减退而至衰竭。有关资料显示慢性肾脏疾病的年发病率为2％～3％，尿毒症的年发病率为100-150／100万。由于近年来人口老龄化，高血压、糖尿病、结缔组     

活化蛋白C对脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞表达血管性血友病因子及其裂解酶的影响

目的 探讨活化蛋白C(APC)对脂多糖(LPS)诱导大鼠主动脉内皮细胞(RAECs)血管性血友病因子抗原( vWFAg)及其裂解酶(ADAMTS-13)蛋白表达的影响.方法 采用组织贴块法培养Wista护大鼠的RAECs,1周后传代至第4～5代用于实验.将细胞分为对照组、LPS刺激组(1 mg/L)以及APC干预组(在LPS刺激后分别加入终浓度为0.1、1、10 mg/L的APC);分别于12、24、48、72 h采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定RAECs培养上清液中vWFAg和ADAMTS-13蛋白的表达水平.结果 对照组仅有少量的vWFAg和ADAMTS-13蛋白表达.随LPS刺激时间延长,vWFAg表达12h即明显增多,48 h达峰值[(285.45±30.13)％],ADAMTS-13蛋白表达(μg/L)呈降低趋势,72 h降至最低(13.32±2.37),与对照组[vWFAg:(94.53±7.83)％,ADAMTS-13:115.76±2.36]比较差异有统计学意义(均P＜0.01).APC可逆转LPS刺激后对vWFAg的促进作用和对ADAMTS- 13的抑制作用,且剂量越大,逆转效果越明显.10 mg/LAPC干预后可使LPS刺激48 h时达峰值的vWFAg明显降低[(198.43±17.92)％比(285.45±30.13)％],使LPS刺激72 h时降至最低的ADAMTS-13(μg/L)明显升高(125.25±2.70比13.32±2.37),差异有统计学意义(均P＜0.01).结论 LPS刺激RAECs后vWFAg明显升高,ADAMTS-13蛋白表达明显降低,具有时间依赖性;用不同浓度APC干预后,随浓度增加和作用时间延长,vWFAg明显降低,ADAMTS-13蛋白表达明显升高,具有剂量依赖性和时间依赖性.     

C反应蛋白和肌钙蛋白T对老年维持性血液透析患者预后的评估

目的探讨C反应蛋白(CRP)和肌钙蛋白(cT n) T对老年维持性血液透析患者预后的评估价值。方法选择153例老年维持性血液透析患者,收集患者的性别、年龄、身高、体重、心脑血管疾病等一般资料,检测CRP、cTnT、血钙、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、血红蛋白(Hb)、血尿素(Urea)、白蛋白(ALB)、肌酐(Scr)等水平。随访3年,比较cTnT、CRP阳性组和阴性组心脑血管事件发生率及病死率的区别;用Cox回归模型分析年龄、Scr、心血管疾病、CRP、cTnT等对维持性血液透析患者预后的影响。结果CRP、cTnT阳性组心脑血管事件发生率及病死率均明显高于cTnT、CRP阴性组(P0. 05); Cox模型回归分析显示年龄、心血管疾病、CRP阳性、cTnT阳性是影响老年维持性血液透析患者预后的重要因素(P0. 05)。结论 CRP和cTnT对老年维持性血液透析患者心脑血管事件和预后有评估作用,CRP和cTnT升高提示预后不佳。