硒蛋白K基因干扰对T淋巴细胞内质网钙稳定蛋白的影响

目的探讨SelK mRNA干扰效果及其硒蛋白K(SelK)基因干扰后对细胞内质网钙稳态蛋白(endoplasmicreticulum calcium homeostasis protein,CHERP)的表达,观察T淋巴细胞内Ca~(2+)浓度的变化。方法从SelK m RNA(NM_019979.2)的编码序列中符合设计要求的靶位点设计特异性干扰SelK mRNA的RNAi片段,构建shRNA干扰载体靶向干扰SelK RNA,用核酸序列分析方法分析重组片段的正确性,利用荧光定量PCR和Westeron blot鉴定SelK mRNA的干扰效果,采用Real time-PCR的方法检测SelK干扰后细胞内的CHERP的变化。结果阳性重组载体可以被BamH I酶切。酶切片段序列分析重组子质粒结果与所设计片段完全一致,正确率为100.0%。三个ShRNA表现了不同的干扰效果,sh222、sh102和sh101的干扰效率分别为12.13%、16.46%和42.37%,在核酸水平上重组质粒sh101对SelK的干扰效果最佳,与sh222和sh102相比,差异有统计学意义(P0.01)。Western blot检测重组质粒sh101在蛋白水平上的干扰效率为45.4%,干扰组细胞中CHERP的表达与对照组相比抑制率达到40.0%。结论重组质粒sh101对SelK在核酸和蛋白质水平上都有较好的干扰效率,SelK干扰对细胞中CHERP的表达有抑制的作用,或因此打乱了内质网与胞质中的钙离子平衡,从而影响到了细胞内游离的钙离子浓度,是导致T淋巴细胞激活的因素之一。     

MR淋巴管造影显示VX2兔乳腺癌前哨淋巴结

目的:探讨钆剂增强的MR淋巴管造影(MR- LG)用于VX2兔乳腺癌前哨淋巴结(SLN)显像的可行性.方法:采用VX2肿瘤软组织块悬液注射法建立30只兔原位乳腺癌动物模型.实验兔在肿瘤接种前后共行2次MR- LG检查(包括对比剂注射前的STIR序列扫描).图像3D重建后,淋巴管引流通路上距离原发肿瘤最近的淋巴结定义为SLN,且成像效果根据3D图像上有无淋巴结和淋巴管显像分成良好和较差两个等级;记录STIR序列扫描和MR- LG显示的所有淋巴结,并与前哨淋巴结病理对照.结果:80％ (24/30)的荷瘤兔完成第二次MR- LG检查,良好3D图像为79.2％ (19/24).在MR - LG图像上,淋巴结信噪比(SNR)均高于其引流淋巴管和同层肌肉(P值均＜ 0.05),SLN与n-SLN、引流淋巴管与同层肌肉之间的SNR无统计学差异.MR- LG图像上可清晰显示SLN和n-SLN(共26枚)的17只荷瘤兔,其STIR图像上共有28枚淋巴结,且两者淋巴结的大小无明显差异(t=0.124,P=0.902);其SLNB检查获得32枚淋巴结(SLN18枚,n- SLN 14枚),且淋巴结大小与MR- LG图像上和STIR序列扫描所显示的淋巴结无统计学差异.结论:钆剂增强MR-LG可较好地显像VX2兔乳腺癌SLN.     

EPS对肺动脉高压大鼠右心室重构的影响及机制

探讨依帕司他(EPS)对肺动脉高压大鼠右心室重构的影响及机制。采用野百合碱(MCT)诱导的方法建立肺动脉高压大鼠模型。分别给予为50 mg/kg和100 mg/kg EPS连续干预4周,观察大鼠血流动力学指标、右心室重构及其心肌形态和心肌Cx43表达。结果显示,EPS能够降低右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP)、肺动脉收缩压(PASP)、右心室肥厚指数(RVHI),右心室质量指数(RVMI)及增加心肌Cx43表达,并呈剂量依赖效应。结果说明,EPS能改善MCT诱导的肺动脉高压大鼠右心室重构,机制可能与其增加心肌Cx43表达有关。     

肠套叠术前及术后护理

肠套叠是指肠管的部分及其附着的肠系膜套入到邻近肠腔内的一种肠梗阻。本病是婴儿时期最常见的急腹症 ,我院自 1999年 2月～ 2 0 0 1年 2月共收治 40例 ,经治疗护理均取得满意疗效。现将护理体会介绍如下。1　资料与方法1.1　一般资料　本组 40例 ,男性 31例 ,女性 9例 ,年龄在4个月～ 3岁之间 ,4～ 10个月小儿 2 6例 ,手术 36例 ,空气灌肠成功 3例 ,死亡 1例。1.2　手术方式　行肠套叠松解术 2 4例 ,行肠切除吻合术 12例。2　护理2 .1　术前护理2 .1.1　空气灌肠复位治疗后的观察　复位后的表现 :1)病儿安静 ,停止呕吐。 2 )腹部包块消失…     

体外膈肌起搏辅治中重度慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者的效果

目的 观察中重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期患者采取体外膈肌起搏辅治的效果.方法选取2017年5月-2018年5月首都医科大学大兴医院收治的中重度COPD急性加重期患者120例为观察对象,采取信封法随机分为观察组和对照组,每组60例.对照组采取常规治疗,观察组则在此基础上联合体外膈肌起搏治疗.分别于治疗前、治...     

脑卒中患者在临床护理中的心理疏导

脑卒中发病突然 ,功能损害严重 ,对生活工作影响较大 ,因而心理压力也较大。其消极的心理状况将干扰脑卒中患者本身的治疗和康复。我科近 5年来针对脑卒中患者患病后不同的心理倾向 ,在护理中采取有针对性的心理疏导 ,使其配合治疗 ,加快了康复的过程 ,取得了较好的效果。1　心理特点脑卒中的发病过程是一个突发过程。在短时间内即造成了较严重的功能缺损 ,患者心理上不能接受 ,产生焦虑和恐惧 ,在急性期的治疗中 ,由于对脑部缺血的抢救 ,大多数病人在治疗 1周内症状可明显好转 ,于是患者以为病情恢复很快 ,治愈有望 ,对医生的预后判断产生…     

优异贝母生物碱的分离与鉴定

从优异贝母的鳞茎中分离得到6种生物碱,鉴定其中4种生物碱为湖贝乙素、湖贝嗪、湖贝甲素和湖贝甲素甙。