慢性乙型肝炎中医病因病机探讨

乙型肝炎是世界流行性疾病,我国是乙型肝炎的高发地区,我国乙肝病毒携带者约有0．93亿,现症慢性乙型肝炎（CHB）患者约2千万以上,其中10％～20％可发展为肝硬化,1％-5％可演变为肝癌,不仅造成巨大的经济损失和资源消耗,也给人们的身体健康和社会生产力造成严重威胁,是我国目前面临的最严重的公共卫生问题之一。     

肝癌的肝再生微环境的研究进展及展望

提出肝癌(liver cancer, LC)的肝再生微环境的新概念有助于从整体上认识和把握肝再生微环境与炎症损伤微环境、免疫调控微环境及血管新生微环境等LC微环境对LC发生发展、复发转移影响的相关机制,探讨更为全面更加有效地通过改善LC的肝再生微环境防治LC发生发展、复发转移的措施与方案,提高LC防治能力和水平. LC的肝再生微环境影响LC的发生发展、复发转移,在消灭LC细胞或组织的基础上,结合维护正常的肝再生机制和改善LC的肝再生微环境是防治LC的重要策略之一,研究多成分、多靶点、多层次、多途径、多时限地改善肝再生微环境而延缓、阻止、甚或逆转LC的发生、发展和转移的网络式作用机制是防治LC的重要研究方向之一.近些年来,中医药改善肝再生微环境防治LC的发生发展及复发转移方面的研究与应用虽取得若干进展,但如何全面准确地揭示网络式的作用机制和如何提供高级别的循证医学证据两大关键科学问题亟待通过更加全面深入地研究,重点推进,加以解决.     

中医证候信息学概论

对中医证候信息学及其相关基本概念（证候、信息）作了明确定义，并简要论述了中医证候信息学的理论基础、主要研究内容、研究思路及方法。     

慢性乙型肝炎中医“证”分型的方法学探讨

本文介绍了中医证研究的进展,探讨了中医证研究的方法学问题,针对慢性乙型肝炎中医“证”分型的分子基础研究问题,提出了用现代生物芯片技术开展此项研究的基本思路,即采用基因表达谱芯片技术对比研究慢性乙型肝炎病程进展中不同“证”的基因表达谱差异,探讨慢性乙型肝炎中医“证”分型的基因调控网络。     

慢性乙型肝炎病毒前C区基因突变与中医证型的关系

目的 :探讨乙型肝炎病毒 ( HBV)前 C区基因突变与慢性乙型肝炎中医证型的关系。方法 :将 162例慢性乙型肝炎患者按中医辨证分为 5种证型 ,应用聚合酶链反应 -单链构象多态分析 ( PCR- SSCP)银染技术检测 HBV前 C区基因变异。结果 :慢性乙型肝炎湿热中阻型患者 HBV前 C区突变率为 61.1% ( 3 3 / 5 4 ) ;瘀血阻络型为5 7.6% ( 19/ 3 3 ) ;肝郁脾虚型为 2 9.8% ( 14 / 4 7) ;肝肾阴虚型为 3 8.1% ( 8/ 2 1) ;脾肾阳虚型为 14 .3 % ( 1/ 7)。结论 :HBV前 C区突变与慢性乙型肝炎中医证型密切相关。湿热中阻型和瘀血阻络型突变率明显高于肝郁脾虚型和脾肾阳虚型。     

HBV前C区基因变异与中医证候的相关性研究

研究慢性乙型肝炎患者HBV前C区基因变异的变化规律与中医证候的相关机制。基因芯片检测慢性乙型肝炎不同证候的HBV前C区基因变异。不同位点变异率(%)与证候相关,肝肾阴虚1764(38%),1896(68%),1899(38%);瘀血阻络1762(93%),1764(90%),1899(50%)。不同证候变异株信号强度差异显著,1762、1764;瘀血阻络>肝肾阴虚>肝郁脾虚;1862:肝肾阴虚>肝郁脾虚;>1896:肝肾阴虚>瘀血阻络>湿热中阻>肝郁脾虚;1899:瘀血阻络>肝肾阴虚>湿热中阻>肝郁脾虚。慢性乙型肝炎HBV前C区基因变异与中医证候相关,为分子证候辨证提供了一定实验依据和研究基础。     

左归丸对同种异性骨髓移植小鼠肝再生相关基因信号通路的影响

背景:维持正常的肝再生足避免肝纤维化和肝癌发生发展的关键环节,中医药调控肝再生主要反映在单味或复方中药对肝细胞、间质细胞、骨髓干细胞的增殖调控.目的:利用基因芯片技术探讨中药左归丸对同种异性骨髓移植小鼠肝再生相关基因信号通路的影响.设计、时间及地点:开放件实验,于2002-01/2007-12在湖北中医学院附属医院肝病研究所完成.材料:SPF级4周龄BABL/C小鼠,雄性10只,作为供体;雌性80只,作为受体,随机分为单纯骨髓移植组、左归丸治疗组,40只/组.小鼠16K v1.0基因表达谱寡核苷酸芯片由上海生物芯片公司提供.芹归丸由熟地、淮山药、枸杞子、山茱萸、菟丝了、川牛膝、鹿角胶、龟板胶组成.方法:两组受体小鼠接受60Co源γ射线照射后,经尾静脉输入供鼠单个核细胞悬液0.2 mL(约2×106个细胞),移植后分别给予生理盐水、左归丸7g/(kg·d)灌胃,6个月后取肝组织标本.选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片,提取液氮冻存肝组织总RNA,利用反转录酶合成掺有荧光标记的cDNA探针,将探针与基因表达谱芯片杂交,筛选样奉之间杂交信号比值有差异表达的基因.利用GenBank ID和UniGene数据库将差异表达基因聚类,按基因本体分类法对聚类的差异表达基因分类,并采用KEGG数据库查询差异表达基因所涉及的信号通路.主要观察指标:差异表达基因谱.与肝再生相关的代谢及信号通路.结果:①与单纯骨髓移植组相比,左归丸治疗组差异表达基因共1 147条,已知功能基因有533条,其中209条基因涉及70种生物化学通路.②在差异表达基因涉及的代谢信号通路中,与肝再生相关的信号通路主要有Wnt信号通路、MAPK信号通路、TGF β信号通路、Jak-STAT信号通路、凋亡、Toll样受体信号通路等,这些通路中Wnt1、EGF、FGF2、FGF16、MAPKK1、E2F、CSF3、Myd88、sFRP1、sFRP5、CSF2受体、CNTF受体、Caspase 12等基因表达上调,MAPK9、Rac1、GSK3、Wnt10a、IL12a、蛋白激酶C γ、Akt2、Activin A受体等基因表达下调.结论:左归丸调控肝再生的作用机制可能在于网络式双向调控肝再生相关信号通路中的基因表达.     

左旋谷氨酸单钠-肝再生-大鼠模型的建立

已有研究资料表明,肝再生受肝再生促进因子和肝再生抑制因子严密地协调控制,但其启动与终止的具体调节机制仍不十分明确[1-5 ].特别是这一调节机制是否受中枢神经系统的控制,其与神经-内分泌-免疫网络体系的关系如何?很值得进一步探索.近年来,国外学者已开始研究肝脏与高级神经中枢的关系,1982年在意大利Serono召开的首届内分泌与肝脏专题讨论会提出了"下丘脑-垂体-肝轴"的新概念,并把肝脏视为是使激素和其他细胞调节因子成为统一的一个重要部位[6,7].     

采用循证医学方法评价中医药调控肝再生的临床试验

目的:采用循证医学方法对近10年来中医药调控肝再生的临床试验文献进行定性和定量分析。方法:参照Cochrane系统评价的要求,对选择纳入的临床试验进行方法学质量评价、数据提取和分析。对符合纳入标准的42篇涉及肝再生指标的(共3108例患者)包括中医药治疗暴发性肝炎、酒精性肝病、亚急性重型肝炎、慢性重型肝炎、肝纤维化、肝癌的随机或半随机对照试验文献纳入并进行系统评价。参照英国牛津大学循证医学中心的证据等级研究文献的证据等级作为评价标准。结果:42篇文献均为低质量的随机对照临床试验,即为2b级,其中仅1篇称随机对照多中心临床试验研究,但未详细报道具体的操作方法。结论:目前尚未见将中医药调控肝再生作为主要研究内容进行的临床试验,部分临床研究包含中医药调控肝再生的研究内容,但临床试验资料所采用的方法学质量和数据处理的可信度均偏低,设计方案不够完善和严谨。     

移植雄性骨髓的雌性小鼠肝组织肝再生相关基因的信号通路

目的:探讨骨髓形成肝细胞的分子机制.方法:采用移植♂骨髓的♀小鼠模型,♀Balb/c小鼠随机分为模型组和正常对照组,选用小鼠基因表达谱寡核苷酸芯片,利用反转录酶合成掺有荧光标记的cDNA探针,将探针与基因表达谱芯片杂交观察小鼠肝组织基因表达谱的变化,筛选样本之间杂交信号比值有差异表达的基因.采用生物信息学方法分析模型组中小鼠肝组织再生相关基因的信号通路变化规律.结果:♀小鼠在移植♂骨髓6 mo后肝组织的基因表达谱显著不同,对照组相对于正常组的差异表达基因有865条,已知功能基因有447条,其中上调基因92条,下调基因355条.与肝再生相关基因信号通路涉及HGF,TGF-β,Focal Adhesion,JAK-Stat,VEGF等信号通路,他们相关基因的上调表达促进肝细胞的增殖分化.TGF-β信号通路中相关基因下调,抑制信号通路的激活,减弱肝再生的负性作用,利于肝细胞的增殖分化.结论:♀小鼠移植♂骨髓后的肝组织基因表达谱显著变化,有可能通过其肝再生相关基因的信号通路激活或抑制调节肝再生.