磁场对荷瘤小鼠IL1,IL6,IL8作用的研究

画磁场激活免疫机制，抑制肿瘤的生长。方法：要用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法及ＭＴＴ法对荷瘤小鼠磁疗产后细胞因子的含量进行观测，并对其抑制瘤作用进行研究。结果：磁场作用于瘤鼠脾区具有促进ＩＬ１、ＩＬ８产生，抑制ＩＬ６及瘤细胞殖的作用。     

人体寄生虫学课程现状及对策

结合多年的人体寄生虫学教学工作,分析了当前人体寄生虫学课程令人担忧的现状,提出应提高对人体寄生虫学的重视程度;加强师资队伍建设;适时调整授课内容,改进教学方法;以科研促进教学等对策,以提高人体寄生虫学教学质量。     

幽门螺杆菌TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR检测方法的建立

目的建立用于幽门螺杆菌快速定量检测和分型的TaqMan MGB探针双重荧光定量PCR方法。方法采用Primer Premier 5软件分析设计引物和探针,采用双重荧光定量PCR扩增幽门螺杆菌CagA和VacA基因片段,建立循环数与拷贝数关系的标准曲线。检测临床标本中所含幽门螺杆菌的循环数,用该方法对临床胃黏膜标本进行检测并与标准曲线对比,计算所含幽门螺杆菌的拷贝数。结果建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR方法检测幽门螺杆菌质粒的线性范围是10~2~10~8拷贝/μl,CagA和VacA基因标准曲线的相关系数分别是0.977 8和0.990 4。29份临床胃黏膜标本的CagA和VacA基因循环数Ct值分别在29~35和30~35之间,幽门螺杆菌拷贝数分别在1.0×10~(1.39)~1.0×10~(3.87)和1.0×10~(3.06)~1.0×10~(3.91)之间,且临床标本中的幽门螺杆菌均为I型。结论建立的TaqMan MGB双重荧光定量PCR法具有敏感、精确、快速的特点,可用于幽门螺杆菌的快速定量检测与分型鉴定。     

整合素连接激酶对幽门螺杆菌所致细胞凋亡的影响

目的探讨整合素连接激酶对幽门螺杆菌(Hp)致胃癌细胞MGC-803凋亡的影响。方法实验分为空白对照组(胃癌细胞MGC-803正常条件培养),激动剂作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的整合素连接激酶激动剂LPTP共培养),Hp作用组(MGC803细胞与Hp(MOI值为100∶1)共培养)和激动剂加Hp作用组(MGC803细胞与0.4μmol/L的LPTP共培养1h,与Hp(MOI值为100∶1)共培养)。24h后流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测细胞凋亡相关蛋白PARP、Casepase-3的表达。结果激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组细胞凋亡率分别为(23.45±1.484 92)%、(30.7±3.111 27)%、(16.15±1.202 08)%,与空白对照组(10.1±0.707 11)%比较,差异均有统计学意义(t值分别为-11.478,-9.131,-6.135,P0.05);激动剂加Hp作用组与Hp作用组比较差异有统计学意义(t=6.169,P0.05)。激动剂作用组、Hp作用组、激动剂加Hp作用组PARP蛋白相对表达量分别为0.89±0.57、1.245±0.21、0.87±0.057,与空白对照组0.6±0.06比较差异均有统计学意义(t值分别为-4.734,-13.492,-4.401,P0.05);Casepase-3蛋白表达分别为0.78±0.35、1.32±0.04、0.87±0.45;与空白对照组0.47±0.07比较差异有统计学意义(t值分别为-5.635,-14.577,-8.037,P0.05)。结论整合素连接激酶在Hp感染MGC-803细胞中起抗凋亡的作用。     

尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛fimH基因核酸疫苗免疫效果评价

目的研究尿路致病性大肠埃希菌Ⅰ型菌毛fimH基因核酸疫苗产生的免疫反应及其对小鼠的免疫保护作用,并比较不同免疫途径产生的免疫效果。方法选取BALB/c小鼠40只,随机分为4组(PBS组、空质粒组、pcD-NA3.0-fimH肌肉注射组、pcDNA3.0-fimH滴鼻组),用构建的fimH基因真核表达载体pcDNA3.0重组质粒分别通过肌肉注射和滴鼻(粘膜)免疫BALB/c小鼠,同时分别以载体质粒(pcDNA3.0)和PBS液为空质粒对照和空白对照,经股四头肌注射免疫小鼠,于第3周和第5周加强免疫。每次免疫前及末次免疫后2周采血检测特异IgG抗体。末次免疫后第10 d,以UPEC分离株菌液进行尿道上行攻击,攻击后第5 d进行尿液细菌培养和计数。结果免疫后,肌注组与滴鼻组小鼠血清特异性IgG抗体水平与对照组及空质粒组比较显著升高(P<0.05);UPEC分离株菌液攻击小鼠后,pcDNA3.0-fimH肌注组与滴鼻组小鼠尿液菌落数较对照组及空质粒组显著减少(P<0.05)。结论 pcDNA3.0-fimH基因疫苗可诱导BALB/c小鼠产生特异性体液免疫,对小鼠尿道上行感染具有一定的免疫保护作用,且不同的免疫途径免疫...     

以临床医学观念为基础的病原生物学课程整合探讨

为了使病原生物学课程更加完善、充实,本文以临床医学观念为基础,就师资队伍建设、理论教学内容的整合、实验教学内容的整合、病原生物学纲要的编写和教学方法改革等方面提出建议和措施。     

以器官系统为基础的病原生物学课程整合的实践探索

选取2008级临床专科生220名,随机分为实验组和对照组,实验组采取以器官系统为基础的病原生物学整合的课程设置,对照组采取传统以学科为基础的课程设置。结果实验组学生对教师授课满意度高于对照组,实验组学生理论课和实验课成绩均高于对照组,差异均有统计学意义。以器官系统为基础的病原生物学整合的课程设置优于传统的以学科为基础的课程设置。     

中药联合应用体外抗幽门螺杆菌的实验研究

目的研究金银花、白果、蜂胶对幽门螺杆菌的体外联合抗菌作用。方法应用棋盘法测定两两组合的不同浓度中药提取物对幽门螺杆菌的最低抑菌浓度,计算部分抑菌浓度(fractional inhibitory concentration,FIC)指数并判定联合效应。结果金银花与蜂胶联合应用的FIC指数为0.187(P<0.5);金银花与白果联合应用后,其FIC指数为0.502(P>0.5);白果与蜂胶联合应用的FIC指数为0.188(P<0.5)。结论金银花与蜂胶联合应用及白果与蜂胶联合应用均对幽门螺杆菌表现为协同作用;金银花与白果联合应用对幽门螺杆菌表现为相加作用;3种中药之间均无拮抗作用。     

威海地区幽门螺杆菌cagA基因3′端多态性分析

目的研究威海地区幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）临床分离株cagA基因的3′端多态性。方法采用PCR法扩增Hp临床分离株的cagA基因3′端并测序,用DNAStar 5.0软件对其进行编码氨基酸序列的比对分析。结果 63株Hp临床分离株均cagA阳性（cagA＋）,其中93.7%（59/63）为东亚型（EPIYYA-ABD）,6.3%（4/63）为西方型（EPIYYA-ABC）。3.4%（2/59）的东亚型菌株EPIYA-B突变为ESIYA-B,4株西方型型均突变为EPIYT-B。胃癌患者分离株中88.9%（16/18）为东亚型,11.1%（2/18）为西方型;非胃癌分离株中95.6%（43/45）为东亚型,4.4%（2/45）为西方型。2株分离自胃癌患者的西方型Hp EPIYA-A后的第一个氨基酸残基由赖氨酸（K）突变为谷氨酸（E）。结论威海地区Hp cagA基因以东亚型为主,但东、西方亚型Hp的致病性无显著差别,两型都存在cagA基因3′端编码氨基酸序列的改变。     

幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体构建及鉴定

目的 构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法 提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定后,将GroEL基因片段用限制性内切酶切下,克隆至真核表达载体pcDNA3.0,构建pcDNA3.0-GroEL重组质粒;采用PCR、酶切对重组质粒pcDNA3.0-GroEL进行鉴定.结果 扩增出幽门螺杆菌GroEL基因片段约1 640 bp;pcDNA3.0-GroEL重组质粒经XhoⅠ和EcoRⅠ双酶切,产生1个与GroEL基因PCR产物大小一致的小片段和1个不同于pcDNA3.0-GroEL重组质粒的大片段,表明GroEL基因已成功插入pcDNA3.0质粒中.结论 成功构建幽门螺杆菌GroEL基因真核表达载体pcDNA3.0-GroEL.