XIAP和XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及其与细胞凋亡的关系

目的：研究凋亡抑制蛋白XIAP及其拮抗蛋白XAF1在中耳胆脂瘤中的表达及胆脂瘤上皮的凋亡情况,探讨三者之间的关系及意义。方法：采用组织芯片技术结合免疫组化法检测50例胆脂瘤标本及20例正常外耳道上皮中XIAP及XAF1的表达;采用末端转移酶介导的原位缺口末端标记染色（TUNEL）技术检测两组标本的凋亡状态。结果：①胆脂瘤上皮中的xI—AP、XAF1蛋白表达显著高于正常上皮（P〈0．01）。②胆脂瘤细胞凋亡显著高于正常上皮（P〈0．01）。⑧胆脂瘤上皮中,XI—AP、XAF1二者表达呈正相关（P〈0．01）;XAFI表达与凋亡呈正相关（P〈0．01）。结论：XIAP、XAF1在胆脂瘤中的表达同步升高,提示在胆脂瘤发病中,促凋亡与抑凋亡二者达到了新的平衡,使胆脂瘤上皮细胞过度增生但不能无限增殖。     

重度烧伤患者胃肠道细菌移位致全身感染的临床研究

目的调查重度烧伤患者胃肠道细菌移位致全身感染因素,为预防与治疗感染提供指导。方法收集2010年1月-2013年10月在医院接受治疗的重度烧伤患者60例,将其分为存活组(35例)和死亡组(25例),对两组患者感染程度进行比较。结果与存活组相比,死亡组患者的烧伤面积较大、烧伤指数较高、存在吸入性损伤、伴消化道出血及接受辅助呼吸治疗例数较多(P<0.05或P<0.01);存活组与死亡组的血清二胺氧化酶(DAO)分别为(1.71±0.34)kU/L与(1.94±0.51)kU/L、肠型脂肪酸结合蛋白(I-FABP)为(103.98±19.64)pg/ml与(115.56±21.75)pg/ml、内毒素为(0.14±0.02)kEU/L与(0.21±0.03)kEU/L和尿乳果糖/甘露醇(L/M)为(116.98±14.67)与(126.75±18.95)水平较高(P<0.05或P<0.01)。结论重度烧伤患者胃肠道屏障的损伤和细菌移位的程度与全身感染和预后密切相关。     

带血管蒂第一掌骨瓣治疗陈旧性腕舟骨骨折

我院 1995年 4月～ 2 0 0 1年 8月以带拇指背桡侧动脉蒂第一掌骨瓣移植治疗 3 3例陈旧性腕舟骨骨折 ,疗效较满意。临床资料本组男 2 7例 ,女 6例。年龄 16～ 3 6岁。右侧 2 0例 ,左侧13例。病程 3～ 2 5个月 ,8例可见骨折硬化 ,9例有骨囊性变。3 3例均行拇指背桡侧动脉第一掌骨瓣腕舟骨移植术。手术方法 :选择臂丛神经阻滞麻醉。①备植骨槽 :取腕掌骨桡侧手术入路 ,自桡骨茎突到第一掌骨中段作 6～ 7cm长“S”形纵切口 ,充分显露腕舟骨 ,骨膜下适当分离 ,暴露骨折端并仔细去除硬化骨 ,在舟骨背侧沿纵轴方向、横跨骨折线凿约1 0cm× 0 3cm…     

循证医学在急诊外科的应用

循怔医学（Ｅｉｄｅｎｃｅ Ｂａｓｅｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,ＥＢＭ）是指临床上任何疾病的诊疗均应遵循科学证据,在个人经验和客观科研依据上作出更加慎重、确切、合理的诊治决策。其涉及到医学的各个领域,经验医学向循征医学的转变已是临床医学发展的必然趋势~［１］。最有力的ＥＢＭ证据是大样本随机对照实验（ＲＣＴ）及系统评价（ＳＲ）,再经过Ｍｅｔａ分析,为临床研究和医疗决策提供可靠而准确的科学依据~［２］。 作为一门新兴学科,急诊医学在我国的发展仅有１０余ａ,急诊外科起步则更晚,但其在急诊医学中的地位日显重要,在危…     

谷氨酸脱羧酶发酵工艺的优化

用大肠杆菌AS1.505进行液态发酵生产谷氨酸脱羧酶并优化培养基,考察了碳源、氮源、复合营养物质、起始pH及发酵时间对酶活的影响,确定最佳产酶培养基组成为:葡萄糖1.0 g/dL,蛋白胨3.0 g/dL,氯化钠0.3 g/dL,磷酸氢二钾0.1 g/dL,硫酸镁0.02 g/dL,L-谷氨酸0.01g/dL,玉米浆1.5 g/dL,生物素30 t,g/L,麸皮4 g/dL;pH 6.5.在此基础上,设计发酵条件的优化实验.实验结果表明为:250 mL的三角瓶装液量25 mL,37℃,起始pH 6.5,培养18 h达到产酶高峰,产酶活力可达1 290 U/mL.     

症状体征与MRI结果不一致患者的原因分析及MED入路选择

[目的]分析症状体征与MRI结果不一致的腰椎间盘突出症患者的发病原因,探讨MED入路对手术结果的影响。[方法]根据患者症状体征与MRI结果不一致表现分为4组,并选择不同入路进行手术。[结果]MRI显示突出物小症状重组优良率为85.7%,突出物中央偏一侧症状体征在对侧组优良率为87.5%,突出物中央偏一侧症状体征为双侧组优良率为100%,突出物脱出游离症状左右不定组优良率为75%,23例患者总优良率为87%。[结论]腰椎间盘突出症患者症状体征与MRI结果不一致时,对单侧症状者应首先症状侧入路,对症状表现左右交替不定者选择双入路可能更加安全可靠,有利于取净髓核,避免遗漏神经根管及侧隐窝狭窄等问题,从而提高治疗效果。     

三叶钢板治疗Pilon骨折的初步体会

[目的]评价三叶草钢板治疗Pilon骨折的临床疗效及CPM在术后踝关节功能康复训练中的作用.[方法]分析本院自1999年7月2003年12月收住的42例Pilon骨折按Ruedi-Allgower分型,采用切开复位三叶草钢板内固定治疗,术后早期应用连续被动运动（continuous passive motion,CPM）加强踝关节功能训练.[结果]术后随访14～60个月,踝关节功能根据Bourne标准评判,42例患者总优良率85.7%.并发症主要有：6例伤口浅表感染,2例发生深部感染,1例因伤口张力大而未闭合,2例发生踝关节严重创伤性关节炎.[结论]临床治疗效果与骨折类型以及治疗方法有关,运用三叶草钢板结合CPM治疗Pilon骨折可取得满意的疗效.     

二尖瓣复合体及室间隔基底段解剖结构对经皮穿刺肥厚性心肌病室间隔化学消融术效果的影响

目的:采用超声心动图(UCG)评估二尖瓣复合体及室间隔基底段解剖结构对经皮穿刺肥厚性心肌病室间隔化学消融术(PTSMA)效果的影响.方法:选取2015年1月—2020年9月在我院因肥厚梗阻性心肌病行化学消融术的24例患者,回顾分析分为效果成功组和复发组的所有患者二尖瓣复合体及室间隔基底段解剖结构的超声数据,找到引起消融...     

脂肪细胞因子的负反馈作用与肥胖和2型糖尿病的形成

背景:通过分析脂肪细胞因子对机体的能量代谢及脂肪积累的调节作用,探讨脂肪组织的负反馈机制在肥胖、2型糖尿病形成中的作用。资料来源:应用计算机检索美国国立医学图书馆PubMed数据库1962-01/2005-11有关脂肪细胞因子的负反馈作用,肥胖和2型糖尿病的文章,检索词为“adipocytokines,obesity,tumornecrosisfactor-α,interleukin-6,leptin,adiponectin,resistinandPGAR”,限定语言种类为英语。资料选择:选择原创性研究论文作为参考,同时限定论文的内容必须与机体的能量代谢及脂肪积累有关;去除重复性研究、综述和其他与机体的能量代谢及脂肪积累关系不大的资料。资料提炼:共收集相关文献158篇,排除重复性研究和与本文主题相关性较小的文献123篇,本文共纳入文献35篇。资料综合:最近的研究表明脂肪组织能够分泌脂肪细胞因子以调节自身的容量。当体脂增加,脂肪细胞因子的调节作用会抑制脂肪合成,增加脂肪分解。脂肪细胞因子主要是通过抵抗胰岛素作用和减少胰岛素分泌来抑制脂肪合成,使脂肪分解增加,游离脂肪酸水平升高,抑制了血糖的利用。结论:当肥胖达到一定程度,脂肪细胞因子的负反馈作用可能是导致2型糖尿病发生的原因之一。     

电穿孔介导外源性基因转染大鼠骨骼肌卫星细胞的可行性

目的:电穿孔的原理是应用短暂高压电脉冲使细胞膜形成纳米级的微孔,外源DNA通过这些微孔或者伴随微孔关闭时膜成分的再分布而直接进入细胞内.实验拟验证电穿孔法介导外源性基因转染大鼠骨骼肌卫星细胞的可行性和转染效率,以获得基因治疗自体移植的载体.方法:实验于2006-10/2007-09在暨南大学医学院中心实验室完成.①材料:清洁级1～3 d龄SD大鼠3只,购于广东省医学实验动物中心,实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准.基因转染过程应用的pEGFP-N1质粒由本课题组保存.②实验方法:大鼠颈椎脱臼处死,在无菌条件下分离四肢肌组织,剪碎成1 mm×1 mm×1 mm组织块,采用改良酶消化法分离骨骼肌卫星细胞,再以差速贴壁和非连续梯度离心法分两步进行纯化,细胞均匀增殖至培养面80%或局部增殖过度密集时胰酶消化传代.取第3代处于对数生长期的骨骼肌卫星细胞,消化离心后调整细胞数为2.0×107L-1,取400 μL注入4 mm电击杯中,再加入pEGFP-N1质粒15 μg混匀,将电击杯放入电转槽静置5 mim.电击条件为电容1050 μF,电压180 V,脉冲时间20 ms,脉冲数2次,脉冲间隔时间1 min,电击缓冲液为不含钙镁的磷酸盐缓冲液.放电后电击杯冰浴,并用不含血清的DMEM清洗,将清洗液转入培养瓶中,4h后换用体积分数为0.1胎牛血清的完全培养基,于37℃、体积分数为0.05的CO2无菌细胞培养箱中培养.同时设不加质粒的空白对照.③实验评估:倒置显微镜下观察细胞生长状况.免疫细胞化学检测肌动蛋白的表达.随机计数多个低倍视野,计算电穿孔pEGFP-N1质粒转染卫星细胞的效率.绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪测量细胞周期.结果:①骨骼肌卫星细胞的形态:原代培养48～72 h细胞完全贴壁,呈梭形或纺垂形,长轴平行排列,胞核圆形,核仁明显.5 d时细胞町伸出一个或数个突起.随培养时间的延长,卫星细胞连接成网状.当延迟分瓶或使用分化培养基,相邻的细胞会融合成肌管,继而形成串联,且能看见肌管的跳动.传代后细胞形态旱更加一致的梭形,6 h即完全贴壁,细胞增殖速度明显加快,生长更为旺盛.传至8代卫星细胞出现老化现象.②免疫细胞化学检测:骨骼肌肌动蛋白呈阳性表达.③转染效率:pEGFP-N1质粒电转染8 h后即可看见散存发绿色荧光的卫星细胞,48～72 h达高峰,阳性表达率约35%.④细胞生长曲线及细胞周期检测:电转染细胞接种后第3天进入对数生长期,第7天由于接触抑制导致增殖速度减慢,81.5%处于G0/G1期,19.3%处于S G2 M期.未转染细胞生长曲线、细胞周期均与其相似.结论:电穿孔法介导外源性基因表达于大鼠骨骼肌卫星细胞具有较高的转染效率,操作简便,重复性好,且对卫星细胞生物学行为无明显影响.