一起戊型肝炎暴发的流行病学调查

１９９４年４月２７日至５月１５日，驻天津某部队学院发生一起戊型肝炎暴发，罹患率６．８７％。病例均为男性，年龄２０￣２４岁，症状普遍较轻。血清学检测发现，２４名病例全部抗－ＨＡＶＩｇＧ阳性，其中２３人抗－ＨＥＶ阳性，ＨＣＶ，ＣＭＶ，ＥＢＶ感染标志和ＨＢｓＡｇ，抗－ＨＢｃＩｇＭ均为阴性。用ＲＴ－ＰＣＲ方法检测了３例病人血清和９例病人粪便的ＨＥＶ ＲＮＡ，１份血清和３份粪便标本呈阳性反应，证实这起肝炎暴     

一起戊型肝炎暴发的调查分析

1994年4月下旬至5月中旬,北方某大城市、某院校、某系,同一食堂就餐人员发生一起戊型肝炎暴发,该食堂就餐379人,发病24例,罹患率6.87％,这是该地区首次证实的一起戊型肝炎局部暴发。 1 一般情况 该院校环境、宿舍清洁整齐,个人卫生和食堂卫生均良好,饮用水由地区自来水公司统一供应,院内自来水管网无破损及漏水现     

人免疫缺陷病毒抗体检测的方法和策略

人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）抗体检测方法敏感性和特异性以及人群ＨＩＶ感染的流行率是影响检测结果的两个主要因素。敏感性和特异性分别指检出阳性标本和鉴别阴性标本的能力，是决定能否正确区分感染与未感染个体的主要因素。高敏感性的方法很少假阴性，当需要尽可能减少假...     

以HEV合成多肽为抗原制备抗－HEV免疫血清

用对应于戊型肝炎病毒（ｈｅｐａｔｉｔｉｓＥｖｉｒｕｓ，ＨＥＶ）开读框架ＯＲＦ１、ＯＲＦ２和ＯＲＦ３部分氨基酸序列的三段多肽为抗原，以鼠伤寒沙门菌体为载体，经静脉免疫家兔和经腹腔免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠，制备出抗－ＨＥＶ免疫血清。两次加强免疫后，经本室研制的抗－ＨＥＶ　ＩｇＧＥＬＩＳＡ试剂盒检测，１：１０稀释血清Ａ值达１．５０～２．００。用沙门菌和ＨＥＶ多肽分别做中和试验，ＨＥＶ多肽的中和抑制率大于５０％，而沙门菌不能中和血清中的抗体。用此免疫血清与抗－ＨＥＶＩｇＣ阳性的病人血清做阻断试验，阻断率大于５０％。上述结果证明家兔和小鼠产生的抗体为特异性抗－ＨＥＶ抗体。     

中国中部农村艾滋病病毒感染状况不一致夫妻的随访研究

目的 在河南省某地农村建立艾滋病病毒（HIV）感染状况不一致（DC）的夫妻队列并进行随访,观察HIV通过异性性传播的频率及其影响因素。方法 通过访谈和血清学检测,确定了52对（一方HIV阳性而另一方阴性但无吸毒、性乱、输血等HIV感染危险行为）夫妻进入研究队列,在0．5、1和2．5年进行3次随访,每次随访均询问夫妻双方的性生活和安全套使用情况,同时抽取20ml抗凝静脉血检测HIV抗体、CD4’T淋巴细胞计数以及病毒载量。结果 （1）0．5、1和2．5年的随访率分别是92．3％、75．0％和28．8％。在随访的过程中,DC夫妻中HIV阴性一方HIV抗体始终保持阴性。未出现HIV抗体阳转及HIV的传播。（2）在队列建立时（0年）以及0．5、1和2．5年随访时,DC夫妻性生活次数每月1次至每周1次的分别占65．4％、72．9％、71．7％和80．0％,有时使用或从来不用安全套的比例分别是76．9％、66．6％、69．1％和60．0％,不同随访时间性生活次数和安全套使用频率的差异无统计学意义。（3）DC夫妻中的HIV阳性一方在0．5、1和2．5年随访时,CD4^＋T淋巴细胞计数保持稳定或上升的比例分别是85．4％、66．6％和60．0％。15对在2．5年随访到双方的夫妻,HIV阳性一方中病毒载量稳定和下降的占66．7％,绝大部分病毒载量保持稳定或下降者同时CD4^＋T淋巴细胞计数也保持稳定或上升。结论 研究中未观察到HIV在夫妻之间的传播。HIV阳性一方稳定的病毒载量和CD4^＋T细胞计数可能是HIV未发生传播的原因之一,宿主的遗传免疫学因素以及HIV的生物学特性对传播的影响值得深入研究。     

我国HIV-1流行株gp41抗原表位筛选与串联表达

目的探讨HIV-1gp41抗原表位串联表达蛋白用于HIV抗体检测的可行性。方法用HIV-1gp41蛋白亲和层析柱制备HIV-1感染者血清中的多克隆抗体，用噬菌体展示随机十二肽库进行生物淘洗，反向吸附非特异性噬菌体。经ELISA鉴定阳性克隆，DNA测序，确定优势表位。将优势表位与文献报道的另一个优势表位串联，克隆人pQE30载体进行蛋白表达。结果成功筛选到位于HIV-1 gp41蛋白上的优势抗原表位(YGPKDAETTAIW)，串联表位(YGPKDAETTAIW-GGGS-SC-SAKFTCTTQI)在pQE30载体中实现可溶性表达。重组蛋白具有良好的抗原性，能与不同的HIV-1抗体阳性血清呈特异反应。结论HIV-1 gp41抗原表位串联表达设计足可行的，串联表位重组蛋白可用于HIV-1抗体检测，但检测灵敏性低于常规方法。     

宁夏回族自治区HIV-1感染者抗病毒治疗前免疫学与病毒学指标调查

目的了解该地区部分HIV．1感染者抗病毒治疗前CD4^＋T淋巴细胞、病毒载量分布及耐药性毒株存在情况。方法利用流式细胞技术对CD4^＋T淋巴细胞计数，使用NASBA方法测定病毒载量，利用lit-PCR获得目的基因序列，登陆http：／／hivdb．stanford．edu分析耐药突变位点。结果该地区感染人群中66．66％的患者CD4^＋T淋巴细胞数〉350个／mm^3，患者病毒载量对数平均值为3．784±1．048，检测样本中有2例出现耐药性。结论该地区HIV-1感染者目前多为无症状期，但病毒拷贝数较高，耐药性毒株流行水平较低。应在该地区加强抗病毒治疗的宣传。     

HIV-1耐药性突变位点研究进展

HIV耐药性的产生是抗病毒治疗的瓶颈,而耐药性的发生主要是因为HIV基因组中部分密码子位点发生突变所致。随着HIV耐药性研究的逐步深入,导致HIV耐药的突变位点也逐渐明晰化,尤其是针对高效抗病毒治疗中经常使用的抑制剂的耐药突变位点的研究取得了明显进展。明确HIV耐药突变位点单独存在或与其他位点联合作用下对病毒抑制剂的影响,将使得抗病毒治疗更有针对性。     

吗啡对HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞中复制的影响

目的 附测定双抗体夹心法检测p24抗原表达.用Student-t检验或方差分析(ANOVA)比较不同细胞处理组间p24抗原表达差异;采用重复测量数据的方差分析比较不同时间吗啡处理组比对照组的p24抗原表达增加或减少倍数的变化趋势.结果 HIV-1感染MT2细胞后第3、4、5和6天,3个浓度的吗啡处理的(1)组的p24抗原表达[第3天:(4.44±0.30)、(5.59±0.25)和(4.60±0.24) ng/ml;第4天:(24.30±2.66)、(31.73±1.17)和(26.02±0.37) ng/ml;第5天:(56.30±1.26)、(81.77±2.49)和(63.66±2.57) ng/ml;第6天:(150.70±8.97)、(243.09±8.93)和(173.72±7.73) ng/ml]均高于(4)组[第3~6天分别为(1.93±0.05)、(8.03±0.09)、(15.30±0.91)、(41.01±0.84) ng/ml],差异有统计学意义(第3天:t值分别为14.15、24.74和19.14,P均<0.01;第4天:t值分别为10.59、34.92和81.2,P均<0.01;第5天:t值分别为45.83、43.51和30.07,P均<0.01;第6天:t值分别为20.09、39.02和29.55,P均<0.01).3个浓度的吗啡处理的(1)组的p24抗原表达比(4)组增加的倍数,随HIV-1感染MT2细胞的时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义(F=842.18,P<0.01).HIV-1感染巨噬细胞组后第4、6、8和10天,3个浓度的吗啡处理的(5)组的p24抗原表达[第4天:(0.68±0.15)、(0.87±0.41)和(0.75±0.09) ng/ml;第6天:(1.64±0.57)、(2.07±0.12)和(1.75±0.17) ng/ml;第8天:(6.31±0.17)、(8.81±0.34)和(7.19±0.11) ng/ml;第10天:(32.30±17.55)、(50.74±17.55)和(39.74±0.56) ng/ml]均高于(8)组[第4、6、8、10天分别为(0.60±0.01)、(1.16±0.07)、(3.84±0.45)、(17.55±0.86) ng/ml],差异有统计学意义(第4天:t值分别为7.27、11.06和3.02,P均<0.05;第6天:t值分别为8.93、11.3和5.45,P均<0.01;第8天:t值分别为8.83、15.11和12.42,P均<0.01;第10天:t值分别为13.65、17.84和36.69,P均<0.01).3个浓度的吗啡处理的(5)组的p24抗原表达比(8)组增加的倍数,随HIV-1感染时间的延长具有上升的趋势,时间效应具有统计学意义(F=135.58,P<0.01).结论 吗啡能够促进HIV-1在MT2细胞和巨噬细胞内的复制,并且随着感染时间的延长而增加;吗啡促进HIV-1复制的作用可被纳洛酮阻断.

Abstract：

Objective To determine whether Morphine has the ability to enhance HIV-1 replication in MT2 and Macrophage in vitro and assess the influence of Naloxone on Morphine2s effect.Methods MT2 cells were randomly assigned into 4 groups: (1) Morphine treatment for MT2 group, (2) Morphine+Naloxone co-treatment for MT2 group, (3) Naloxone treatment for MT2 group and (4) MT2 Control;Macrophages were also randomly assigned into 4 groups: (5) Morphine treatment for Macrophage group, (6) Morphine+Naloxone co-treatment for Macrophage group, (7) Naloxone treatment for Macrophage group and (8) Macrophage Control. Group (2), (3), (6) and (7) were pre-treated with 10-8 mol/L Naloxone for 0.5 h, and then group (1) and (2) were treated with 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L Morphine for 24 h;group (5) and (6) were disposed of 10-10 mol/L Morphine for 24 h.All 8 groups were added in HIV-1 viral strain with 50% tissue culture infective dose(TCID50).P24 antigen in MT2 cells culture supernatant at day 3, 4, 5 and 6, and in Macrophages culture supernatant at day 4, 6, 8, 10 and 12 after infection were determined with ELISA.Student2s t-test and ANOVA were used to compare the differential expression in different groups, and repeated measures ANOVA was used to compare the increasing or decreasing expression of p24 antigen in morphine treatment groups than that in the control group at different time points.Results On the 3rd day of infection with HIV-1 in MT2 cells, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8mol/L dose of group (1) were (4.44?.30), (5.59?.25) and (4.60?.24) ng/ml respectively, compared to control[(1.93?.05) ng/ml, t= 14.15, 24.74 and 19.14, all P<0.01].On the 4th day, 10-12, 10-10 and 10-8mol/L dose of group (1) resulted in a significant increase of p24 antigen expression [(24.30?.66), (31.73?.17) and (26.02?.37) ng/ml]in culture supernatants compared to control[(8.03?.09) ng/ml, t=10.59, 34.92 and 81.2, all P<0.01].On the 5th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (1) were (56.30?.26), (81.77?.49) and (63.66?.57) ng/ml respectively, compared to control [(15.30?.91) ng/ml, t= 45.83, 43.51 and 30.07, all P<0.01].On the 6th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (1) were (150.70?.97), (243.09?.93) and (173.72?.73) ng/ml respectively, compared to control [(41.01?.84) ng/ml, t= 21.09, 39.02 and 29.55, all P<0.01].The enhanced multiple of p24 antigen expression in three doses of morphine treatment group compared to control increased with HIV-1 infected MT2 cells time, trend analysis of repeated measurements showed statistically significant time effect (F=842.18, P<0.01). On the 4th day of infection with HIV-1 in Macrophage cells, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) were (0.68?.15), (0.87?.41) and (0.75?.09) ng/ml respectively, compared to control [(0.60?.01) ng/ml, t= 7.27, 11.06 and 3.02, all P<0.05]. On the 6th day, 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) resulted in a significant increase of p24 antigen expression[(1.64?.57) , (2.07?.12 ) and (1.75?.17) ng/ml]in culture supernatants compared to control [(1.16?.07) ng/ml, t=8.93, 11.3 and 5.45, all P<0.01].On the 8th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of group (5) were (6.31?.17), (8.81?.34) and (7.19?.11) ng/ml respectively, compared to control [(3.84?.45) ng/ml, t=8.83, 15.11 and 12.42, all P<0.01]. On the 10th day, the expression of p24 antigen in 10-12, 10-10 and 10-8 mol/L dose of Morphine treated group were (32.30?7.55), (50.74?7.55) and (39.74?.56) ng/ml respectively, compared to control [(17.55?.86) ng/ml, t= 13.65, 17.84 and 36.69, all P<0.01].The enhanced multiple of p24 antigen expression in three doses of group (5) compared to control increased with HIV-1 infected Macrophage cells time, trend analysis of repeated measurements showed statistically significant time effect (F=135.58, P<0.01).Conclusions Morphine has the ability to enhance HIV-1 replication in MT2 cell and Macrophage. This Morphine-mediated increase of p24 antigen expression can be blocked by Naloxone.