黄芪散有效部位群对胰岛素抵抗HepG2细胞SREBP-1c及其靶基因表达的影响

目的:观察黄芪散有效部位群(HQS)对胰岛素抵抗HepG2细胞固醇调控元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)及其靶基因表达的影响,并探讨其可能的作用机制。方法:噻唑蓝(MTT)比色法检测HQS对细胞活性的影响,采用高糖高胰岛素诱导HepG2细胞建立胰岛素抵抗模型,造模同时予以不同浓度HQS进行干预,并以二甲双胍(MET)作为阳性药,另设空白组。采用荧光D-葡萄糖同系物2-脱氧-D-葡萄糖(2-NBDG)检测细胞糖摄取量,测定细胞内甘油三酯(TG),游离脂肪酸(FFA)含量,油红O染色法观察细胞脂质沉积情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测细胞内SREBP-1c,乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1),脂肪酸合成酶(FAS),硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)基因的表达。结果:依据MTT实验结果,选择25,50,100 mg·L-1分别作为HQS低、中、高质量浓度值(HQS-L,HQS-M,HQS-H),处理时间为24 h。与空白组比较,模型组细胞糖摄取显著减少(P0.01),细胞内TG,FFA含量显著升高(P0.01),胞浆内可见大量红色的小泡性脂滴,SREBP-1c,ACC1,FAS,SCD1 mRNA的表达显著上调(P0.01)。与模型组比较,不同质量浓度HQS均可显著升高细胞糖摄取量(P0.05,P0.01),HQS-H,HQS-M可显著降低细胞中TG,FFA含量(P0.01),减少细胞内脂滴数量,HQS-L亦可降低FFA含量(P0.05),此外,HQS-H可显著下调SREBP-1c,ACC1,FAS,SCD1 mRNA的表达(P0.05,P0.01),HQS-M亦可下调SREBP-1c,FAS,SCD1 mRNA的表达(P0.05),对ACC1 mRNA表达具有一定程度的抑制。结论:HQS可能通过抑制SREBP-1c的表达,减少脂质合成,改善HepG2细胞胰岛素抵抗。     

四对结核分枝杆菌毒素-抗毒素系统基因功能的初步研究

目的探讨结核分枝杆菌毒素-抗毒素(toxin-antitoxin,TA)系统中的4对基因的功能,为研究结核分枝杆菌的传播机制提供基础科学数据。方法选取结核分枝杆菌TA系统VapBC家族中4对基因,包括VapC 4个毒素基因(Rv1720c、Rv2103c、Rv2494和Rv3408)和VapB4个抗毒素基因(Rv1721c、Rv2104c、Rv2493、Rv3407),在大肠杆菌和耻垢分枝杆菌中分别构建严谨型阿拉伯糖诱导质粒体系及乙酰胺诱导穿梭质粒体系观察VapC对细菌生长的抑制作用,及其对应的VapB解除抑制作用。结果在大肠杆菌和耻垢分枝杆菌的实验结果一致,Rv2103c具有一定抑制作用和Rv2104c具有消除抑制作用,其余3对毒素-抗毒素基因未见到明显的对细菌生长的抑制和消除抑制的作用。结论成功构建了VapBC家族在大肠杆菌及耻垢分枝杆菌中的表达体系,并发现了一对TA系统基因对细菌生长的抑制和消除抑制的作用。     

“分级诊疗制度”主题研讨

“主题研讨”主要针对全科医学/社区卫生服务领域的热点问题,邀请行业内的专家,从不同层面及角度进行主题阐述,这里面有成绩的展示,也有问题的提出。希望能够引起广大社区卫生服务工作者进一步的思考,同时也希望各位读者能够提出问题与建议,共同探讨。本期特别关注“分级诊疗制度”,针对分级诊疗制度这一主题进行了讨论,社区卫生服务管理中心与社区卫生服务中心的管理者们各抒己见,旨在为分级诊疗制度的建设建言献策,期望与全国同行共同讨论！     

UPLC-Q-TOF-MS对桑白皮总黄酮提取物的快速分析

目的:对桑白皮总黄酮提取物中的各化合物进行快速的分离和鉴定,并对其主要的裂解碎片和二级裂解规律进行探讨。方法:采用超高效液相串联四级杆飞行时间质谱联用技术(UPLC-Q-TOF-MS),在电喷雾离子源(ESI)负离子模式下进行分离和检测;使用Waters公司BRH分析柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm);以0.1%甲酸水为流动相A,乙腈为流动相B,梯度洗脱;流速0.3 m L·min~(-1);柱温为25℃。结果:基于UPLC-Q-TOF-MS技术分离所得精确相对分子质量,结合二级质谱裂解信息,使用Masslynx 4.1软件对数据进行统计和分析,并参考Sci Finder数据库(美国化学学会在线数据库学术版),桑白皮总黄酮提取物中共鉴定出13种黄酮成分,其中有7个Diels-Alder加合物,主要代表物为桑根酮C(sanggenon C),桑根酮D(sanggenon D),6种异戊烯基黄酮类化合物,代表物为桑辛素(morusin)。结论:通过超高效液相的分离,首次发现了桑白皮总黄酮提取物中的化合物在ESI源中脱去H_2和H_2O的现象,并对其二级裂解碎片的规律进行探讨,同时也为桑白皮总黄酮提取物的成分鉴定提供了一个快速、简便、可靠的方法。     

桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝血管生成相关基因的影响

目的:初步探索桑白皮黄酮提取物对2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪肝的治疗作用及机制研究。方法:将24只雄性大鼠随机分为3组,分别为正常组、模型组、桑白皮黄酮组(1.0 g·kg~(-1))。采用腹腔注射小剂量链脲佐菌素(streptozocin,STZ)结合高脂饲料喂养的方法,建立2型糖尿病伴非酒精性脂肪肝的模型,灌胃治疗16周时,观察比较桑白皮黄酮提取物对各组大鼠血清中空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),糖耐量(OGTT)变化,油红O染色和苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理改变,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),血小板衍生因子(platelet derived growth factor,PDGF)mRNA的表达。结果:灌胃干预16周后,与正常组比较,模型组大鼠FBG,TC,TG,LDL-C,含量均显著高于正常组(P0.05),应用桑白皮黄酮治疗后,上述生化指标较模型组均有显著下降(P0.05)。糖耐量试验显示模型组胰岛素敏感性下降,应用桑白皮黄酮治疗后胰岛素敏感性较模型组有显著改善。油红O染色结果显示模型组肝细胞胞浆内可见大量红染的脂肪滴,而桑白皮黄酮组肝细胞胞浆内未见红染的脂肪滴。HE染色结果显示模型组肝小叶中肝细胞发生明显的小泡样脂肪变性,部分肝细胞中脂滴融合成大的脂肪空泡,小叶中可见点状坏死,周围有炎性细胞浸润,而桑白皮黄酮组肝细胞结构正常。模型组肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量较正常组有显著升高,应用桑白皮黄酮治疗后,肝脏中VEGF,PDGF mRNA表达量明显降低(P0.05)。结论:桑白皮黄酮提取物对实验性2型糖尿病大鼠非酒精性脂肪性肝有一定的防治作用,其作用机制可能与抑制肝脏中VEGF,PDGF mRNA的表达有关。     

重视培养中医研究生临床思维中的传统思维

目的了解培养中医专业学位研究生临床思维过程中传统思维的重要性。方法加强中医专业学位研究生的中医经典的学习,尽量多阅读中国传统文化经典书籍,并在临床诊疗的过程中取其精华;加强导师队伍的传统思维培训,努力提高导师队伍的整体水平,在教学中努力渗透传统思维要素;在传统文化的熏陶下加强研究生的人文思想教育。结果中国传统文化是中医学发展的土壤和源泉,要想进一步掌握中医学的精髓,传统文化思维的渗透是非常重要的。结论主要论述对中医临床专业研究生在临床阶段的培养过程中,重视中国传统文化思维渗透的重要性及方法。     

二甲双胍对肺结核合并2型糖尿病患者辅助治疗的横断面研究

目的 探讨二甲双胍在抗结核治疗及结核病灶愈合过程中的辅助作用。方法 从2012 年1月1日—2016年12月31日北京胸科医院收治的肺结核合并2型糖尿病患者1 851例中随机抽取患者,依据使用二甲双胍、胰岛素等降糖药的不同将患者分组：未使用任何降糖药物（组一）;未使用二甲双胍+使用胰岛素以及其他降糖药（组二）;只使用二甲双胍（组三）;使用二甲双胍+胰岛素或其他降糖药（组四）。分析每组患者基本信息（年龄、性别、职业）、生化检查以及影像学特点。计数资料使用χ2检验,计量资料使用t检验。结果 共纳入515例患者,四组分别为156例,247例,19例和93例。四组患者在性别、年龄、职业分布上差异无统计学意义（P>0.05）。四组糖化血红蛋白差异有统计学意义（P <0.05）,其中单纯使用二甲双胍组血糖控制在正常范围内的患者比例远高于其他三组。胸部影像学复查结果,使用二甲双胍的组三与组四在左肺与右肺的病变比例分别为68.4%、63.2%和43.0%、39.8%,低于未使用二甲双胍的组一（85.3%、84.0%）和组二（83.4%、82.6%）,并且单纯使用二甲双胍组结核空洞闭合比例比其他组高,组一组二空洞未闭合或增多的比例高于组三、组四,四组出现结核病灶和空洞的差异有统计学意义（P<0.05）。结论 降糖药二甲双胍对于抗结核治疗和结核病灶的愈合有辅助作用,有利于近期血糖的控制,促进结核空洞的闭合。     

超临界CO_2萃取丹参及超声强化超临界工艺探讨

目的：探索超临界CO2萃取及超声强化超临界CO2萃取丹参酮工艺。方法：以丹参酮ⅡA、隐丹参酮及总丹参酮提取率为考察指标,正交试验法优选丹参超临界CO2萃取工艺参数,并用平行试验考察超声强化超临界提取工艺。结果：丹参超临界CO2萃取工艺为：药材粉碎过20目筛,以与药材等量的95%乙醇作夹带剂,萃取压力25 MPa,萃取温度40℃,萃取时间2 h;通过超声强化作用,萃取压力可降至18 MPa,萃取时间缩短至1.5 h,丹参酮ⅡA、隐丹参酮、总丹参酮的提取率分别提高0.50%、1.11%、0.28%。结论：丹参超临界CO2萃取丹参酮工艺稳定、可行,超声对超临界CO2萃取丹参酮具有强化作用。     

宫腔内超声初步探讨

目的 探讨宫腔内超声检查的可行性和临床意义,研究专用宫腔内超声设备.方法 气管镜进入宫腔,经操作管道进入超声探头,对子宫肌壁间肌瘤、黏膜下肌瘸、内膜癌、黏膜增厚患者和正常黏膜进行检查,共10例.结果 宫腔超声清晰观察子宫肌壁间肌瘤2例,其中1例囊性变,腹部超声未提示;黏膜下肌瘤3例;内膜癌1例,范围约2.0 cm,浸润到浅肌层;2例黏膜增厚最深达1.0 cm;2例黏膜正常.结论 应用小探头超声进行宫腔内检查是可行的,能够对子宫肌层和黏膜病变进行细微检查,有临床价值,但设备需要改进.     

肝胆管结石病的再手术治疗

肝胆管结石病的再手术治疗特别在基层医院仍存在一定困难,现将我院1990～1999年间经再次手术治疗肝胆管结石59例治疗体会报告如下。